ICS67.160.10 X61T/AHFIA 安徽省食品行业协会团体标准 T/AHFIA043—2019 白酒中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的测定高 效液相色谱法 Determinationofα-linolenicacidandL-phenyllacticacidinalcoholicproductsby highperformanceliquidchromatography 2019-12-30发布 2020-01-30实施 安徽省食品行业协会发布 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/AHFIA043—2019 I前  言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准由安徽省食品行业协会提出并归口。 本标准附录A为资料性附录。 本标准起草单位：安徽古井贡酒股份有限公司、安徽瑞思威尔科技有限公司、安徽国科检测科技有 限公司、安徽润安信科检测科技有限公司。 本标准主要起草人：王银辉、张会敏、刘国英、王录、沈小梅、胡心行、马金同、秦杰杰、杨恩贺、 汪菲、朱梦旭。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 T/AHFIA043—2019 1 白酒中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的测定高效液相色谱法 1范围 本标准规定了酒类产品中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于酒类产品中α-亚麻酸和L-苯基乳酸含量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 3原理 酒样除醇净化后，使用高效液相色谱仪进行测定。采用外标法定量检测α-亚麻酸和L-苯基乳酸的 含量。 4试剂与材料 以下所用试剂，除特别注明外，均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：色谱纯。 4.2乙酸铵：色谱纯。 4.3乙酸：色谱纯。 4.4磷酸：色谱纯。 4.5α-亚麻酸标准品：纯度≥99.99%。 4.6L-苯基乳酸标准品：纯度≥99.99%。 4.7水相微孔滤膜：0.22μm。 4.80.1%磷酸溶液：准确吸取1mL磷酸置于1000mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，用0.22 μm的微孔滤膜过滤。 4.9α-亚麻酸标准储备液：称取50.0gα-亚麻酸标准品置于50mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇 匀。 4.10L-苯基乳酸标准储备液：称取25.0gL-苯基乳酸标准品置于25mL容量瓶中，加水定容至刻度， 摇匀。 4.11混合标准使用液：根据所测酒类产品中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的含量，分别取一定量的单标储 备液稀释至一系列浓度，配制成混合标准使用液。 全国团体标准信息平台 T/AHFIA043—2019 25仪器与设备 5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。 5.2分析天平：感量0.1mg。 5.3超声波清洗仪。 5.4旋转蒸发仪。 6分析步骤 6.1试样制备 准确量取50mL试样置于100mL旋转瓶中，在40℃，20MPa下，旋转蒸发至3-5mL，转移并加水定容 至10mL容量瓶中，经0.22μm滤膜过滤，获得待测样品。 6.2测定 6.2.1仪器参考条件 6.2.1.1色谱柱：BEHC18色谱柱。 6.2.1.2柱温：35℃。 6.2.1.3流动相：甲醇：0.1%磷酸水溶液=95:5（体积比）。 6.2.1.4流速：0.3mL/min 6.2.1.5洗脱方式：等度洗脱。 6.2.1.6检测波长：205nm。 6.2.2标准曲线的制作 准确吸取α-亚麻酸和L-苯基乳酸混合标准溶液，分别配制5个不同浓度（α-亚麻酸标准曲线浓 度：20mg/L、40mg/L、80mg/L、160mg/L、400mg/L；L-苯基乳酸标准曲线浓度：25mg/L、50mg/L、100mg/L、 200mg/L、500mg/L）。在6.2.1条件下测定，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标 准色谱图参见附录A。 6.2.3试样溶液的测定 将待测样品根据情况，适当稀释后上机检测，即得待测样品中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的浓度。 7结果计算 试样中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的含量A以毫克每升（mg/L）表示，按式（1）计算： nVCA  21 V（1） 式中： A——试样中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； C——待测样品中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V1——待测样品的体积，单位为毫升（mL）； 全国团体标准信息平台 T/AHFIA043—2019 3 V2——试样的体积，单位为毫升（mL）； n——处理后溶液稀释的倍数； 每个试样取两份进行平行测定，以两次平行测定的算数平均值为测定结果，结果保留小数点后两位 数字。 8精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，不应超过算术平均值的15%。 9检出限和定量限 酒类产品中α-亚麻酸和L-苯基乳酸的检出限均为1.00mg/L，定量限均为5.00mg/L。 全国团体标准信息平台 T/AHFIA043—2019 4AA 附录A （资料性附录） α-亚麻酸和L-苯基乳酸标准色谱图 α-亚麻酸和L-苯基乳酸标准色谱图见图A.1。AU 0.000.100.200.300.400.500.600.70 分钟0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 图A.1α-亚麻酸和L-苯基乳酸标准色谱图 _________________________________ L-苯 基 乳 酸α-亚 麻 酸 全国团体标准信息平台