ICS 67.050 C53 食品及食品包装表面中新型冠状病毒 采样与实时荧光 RT-PCR 检测方法 Sampling and Real -time RT-PCR assay fo r detection of SARS -CoV-2 in food and food packaging surface 2020-12-30发布 2021-01-20实施 T/CAQI 15 9-2020 中 国 质 量 检 验 协 会 CAQI 团 体 标 准 发布 全国团体标准信息平台 T/CAQI 15 9-2020 II 目 次 前 言................................ ................................ . III 引 言................................ ................................ .. IV 1 范围 ................................ ................................ .. 1 2 规范性引用文件 ................................ ........................ 1 3 术语和定义 ................................ ............................ 1 4 试剂 ................................ ................................ .. 1 5 仪器设备 ................................ .............................. 2 6 操作步骤 ................................ .............................. 2 7 结果分析 ................................ .............................. 3 8 实验室安全 ................................ ............................ 3 附录A ................................ ................................ ... 5 附录B ................................ ................................ ... 6 （English Version ） ................................ ...................... 7 全国团体标准信息平台 T/CAQI 15 9-2020 III 前 言 本文件按照 GB/T1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容有可能涉及专利， 本文件的发布机构不应承担识别这些专利的 责任。 本文件由中国检验检疫科学研究院综合检测中心提出，由中国质量检验协会归口。 本文件主要起草单位：中国检验检疫科学研究院综合检测中心、湖南赫西仪器装备有限 公司、安徽拓维检测服务有限公司、赫斯缇亚 (北京)生物科技有限公司、北京森康生物技术 开发有限公司、上海华测品标检测技术有限公司、北京戴纳实验科技有限公司、 杭州博日科 技股份有限公司 、广州华腾生物医药科技有限公司、吉林大学、军事医学科学院军事兽医研 究所、润方（长春）生物科技有限公司、鲲鹏 基因（北京）科技有限责任公司、中国检验检 疫科学研究院卫生检验检疫研究所、中国海关科学技术研究中心、北京服装学院、新疆塔里 木大学、新疆大学、中检科创（北京）测试认证有限责任公司、国正检验认证有限公司、 CAIQTEST Malaysia SDN BHD （马来西亚）、北京卓诚惠生生物科技股份有限公司、 CLUB D’ AMIS SINO CONGOLAIS （刚果金）、 GENESEQ SDN BHD （马来西亚）、 LAB-IND RESOURCE SDN BHD（马来西亚）、北京化工大学环渤海生物产业研究院、北京洛奇医学 实验室股份有限公 司、溯源生命生物工程股份有限公司、天津海关动植物与食品检测中心、北京市餐饮行业协 会、北京包装饮用水行业协会、中检科（北京）测试技术有限公司、 CLUB DES AMIS SINO-BURKINABE （布基纳法索）。 本文件主要起草人：乐粉鹏、刘键、李强、丁凯、寻继勇、迟海鹏、李建华、柴平海、 魏晓宏、 商晓辉、夏志平、谢水林、房恒通、焦虎平、王梓、袁吉泽、李洋、胡孔新、刘丽 娟、江丽、龚䶮、周立成、 CHNG SOO EE 、郭汉文、吕小毅、杨洁、张家兵、张婵、云环、 付文钰、万笑宇、何健、袁常柱、吴博隆、刘旸、 安少宁、 ILITO LOFONGO Daddy Patrick 、 GAN HAN MING 、LIEW SHYUE YIH 、任宝刚、王芳、罗艳娟、辛明亮、袁军、王斌、李杰光、 赵亚洲。 本文件主要专家组成员：张传福、李仁清、高丽娟、张磊、聂会忠。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 T/CAQI 15 9-2020 IV 引 言 2019年12月以来，全世界爆发新型冠状病毒肺炎（ Corona Virus Disease 2019 ， COVID-19），简称“新冠肺炎”，新冠肺炎传播途径主要为呼吸道飞沫传播和接触传播，呼 吸道飞沫传播可以通过佩戴口罩来进行阻断，人体、环 境以及食品的直接接触成为造成新冠 肺炎传播的潜在风险。 2020年1月12日，世界卫生组织正式将 2019新型冠状病毒命名为 SARS-CoV-2。 本文件在满足 《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》 （国卫办疾控函 〔 2020〕 156号）的前提下，进一步规范食品及食品包装表面中新冠病毒的采样及检测方法。目前国 内尚未建立食品及食品包装表面中新型冠状病毒采样及检测的相关标准， 本文件的推出将填 补国家在食品及食品包装表面中采集及检测新冠病毒标准的空白， 形成统一的采样和核酸检 测操作规程。 本文件中涉及到的实验室生物安全要求及人员 防护要求应按照 《医疗机构新型冠状病毒 核酸检测工作手册（试行）》、《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》等相关国 家规定执行。 高风险地区样品采集及检测工作应在当地实验室进行，防止样品跨区域运输产生污染。 当使用本文件方法检测出阳性样品，应履行国家相关管理要求。 全国团体标准信息平台 T/CAQI 15 9-2020 1 食品及食品包装表面中新型冠状病毒采样与实时荧光 RT-PCR检测方法 1 范围 本文件规定了食品及食品包装表面新型冠状病毒实时荧光 RT-PCR 检测方法。 其中包括 术语、检测试剂、仪器设备、实验操作步骤、结果分析、实验室生物安全等。 本文件适用于食品及食品包装表面中新型冠状病毒的检测， 包含水产品 （含活水 生动物） 表面、其他动物类产品表面、植物类食品表面、内外包装表面 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行）》（联防联控机制医疗发〔 2020〕 271 号） 《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》（国卫办科教函﹝ 2020﹞70 号） 《农贸（集贸）市场新型冠状 病毒环境监测技术规范》 （联防联控机制综发〔 2020〕221 号） 《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南》（国卫办疾控函〔 2020〕156 号） 《特定场所消毒技术方案》（国卫办疾控函〔 2020〕156 号） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 。 3.1 实时荧光 RT-PCR 实时荧光逆转录 -聚合酶链式反应。 3.2 Ct值 每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数 。 3.3 RNA 核糖核酸 。 3.4 PBS 磷酸盐缓冲盐水 。 4 试剂 4.1 样品采集试剂 全国团体标准信息平台 T/CAQI 15 9-2020 2 病毒采样液可选择以下 试剂：组织培养液（ MEM、RPMI1640 培养液等）、缓冲液（ HANKS 液、 PBS 缓冲液等）、添加有 RNA 稳定剂的溶液、等渗液（生理盐水等）或商品化采样试 剂盒。（建议直接选取商品化无菌病毒采样管，内含采样拭子）。 4.2 RNA 提取试剂 选取商品化的病毒 RNA 提取试剂盒或 TRIzol RNA 提取试剂。 4.3 消毒剂 75%乙醇、有效氯浓度 0.2%的消毒剂或其他有效消毒剂 。 5 仪器设备 5.1 荧光RT-PCR检测仪。 5.2 高速离心机：转速≥ 4000r/min 。