ICS67.050 X04T/SDAQI 团 体 标 准 T/SDAQI041—2021 水果和蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Determinationofchlorantraniliproleresiduesinfruitandvegetablebyliquid chromatography-tandemmassspectrometrymethod 2021-09-25发布 2021-10-25实施 山东质量检验协会  发布 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 I版权说明 本文件系由山东质量检验协会（简称“协会”）组织创制的团体标准文本（含制定过程中的草案）， 协会拥有本文件的著作权，受《中华人民共和国著作权法》保护。除法律所允许的情形或事先得到协会 书面许可外，任何组织和个人不得以任何理由进行复制、销售、传播本文件，或抄袭、歪曲本文件等侵 权行为，否则，行为人应承担相应的民事、行政责任，构成犯罪的，将依法追究其刑事责任。其他文件 引用本文件，不属侵权行为。 凡利用本文件进行或支持贸易、认证等商业活动，应事先购买正式文本或得到协会书面授权。购买 本文件或获得授权，请与协会联系。 欢迎社会各界举报侵权盗版行为，协会将依法严格保护举报人信息。 联系人：范红梅 联系电话：0531-8970198615668365153 联系邮箱：[email protected] 协会对本版权声明拥有最终解释权。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东质量检验协会提出、归口并组织实施。 本文件起草单位：山东省产品质量检验研究院、滨州市食品药品检验检测中心。 本文件主要起草人：侯广月、颜士忠、王颖臻、徐志娇、李丽、周莉莉、凡书杰、李大为、曹世源、 李杜慧、刘忠强、李娜、高会兰、韩叶、刘丽洁。 本文件的所有权和解释权归山东质量检验协会。 如果您在本文件使用中发现错误或技术内容有不当之处，请及时与协会秘书处联系，将意见发送到 [email protected]。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 1水果和蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了水果和蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于苹果、桃、葡萄等水果和甘蓝、茄子、豆角等蔬菜中氯虫苯甲酰胺残留量的测定。 本文件的方法定量限为0.001mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样经乙腈提取，提取液经固相萃取柱净化，用液相色谱-串联质谱仪测定，外标法定量。 5试剂 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级水。 5.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。 5.2乙酸铵（CH3COONH4）：色谱纯。 5.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。 5.4氯化钠（NaCl）。 5.5氯虫苯甲酰胺标准品（CAS号：500008-45-7），纯度不低于99.0%，或经国家认证并授予标准物 质证书的标准物质。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 25.6氯虫苯甲酰胺标准储备溶液：称取适量氯虫苯甲酰胺标准品（精确至0.1mg），用乙腈（5.1）溶 解配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液，-18℃冷冻避光保存，有效期6个月。 5.7氯虫苯甲酰胺中间标准溶液：吸取适量氯虫苯甲酰胺标准储备溶液用乙腈（5.1）稀释配制成10μ g/mL的中间标准溶液，-18℃冷冻避光保存，有效期1个月。 5.8氯虫苯甲酰胺标准工作溶液：将氯虫苯甲酰胺中间标准溶液用空白试样基质溶液稀释成0.50 ng/mL、1.00ng/mL、5.00ng/mL、10.00ng/mL、20.00ng/mL、50.00ng/mL的系列标准工作溶液， 使用前配制。 5.9亲水微孔滤膜：0.22μm。 5.10固相萃取柱：OasisPrimeHLB（150mg），或相当者。 5.11离心管：50mL，15mL。 6仪器和设备 6.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 6.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。 6.3涡旋混合器。 6.4组织粉碎机。 6.5离心机：转速不低于6000r/min。 7试样制备 从原始样品中取出代表性样品约500g，取样部位按GB2763附录A执行，用组织粉碎机粉碎，混匀， 装入洁净的容器内，密封并标明标记。-18℃以下冷冻保存。 8试验步骤 8.1提取 称取10g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入5g氯化钠，再加入20mL乙腈，涡旋 混匀后，6000r/min离心5min，上清液待净化。 8.2净化 取3mL上清液过PrimeHLB固相萃取柱，收集净化液，净化液经微孔滤膜过滤后上机测定。 8.3仪器参考条件 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 38.3.1液相色谱参考条件 色谱柱：Poroshell120EC-C18，2.7μm，100mm×2.1mm（内径），或相当者； 流动相：A相为0.1%甲酸水溶液（含5mmol/L乙酸铵），B相为乙腈，梯度洗脱程序见表1； 流速：0.3mL/min； 柱温：35℃； 进样体积：5μL。 表1流动相梯度洗脱程序 时间，min A相，% B相，% 0.00 95.00 5.00 2.00 95.00 5.00 6.00 5.00 95.00 8.00 5.00 95.00 8.10 95.00 5.00 10.00 95.00 5.00 8.3.2质谱参考条件 离子源：电喷雾离子源； 扫描方式：正离子扫描； 检测方式：多反应监测； 其他质谱参考条件参照附录A。 8.4定性测定 在8.3设定的仪器条件下测定试样和标准工作溶液，如果试样中待测物质的色谱峰保留时间与标准 工作溶液一致，偏差在±2.5%以内，定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液相比，相对丰度 偏差不超过表2中规定的范围，则可判断试样中存在对应的待测物。 表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% ＞50 ＞20～50 ＞10～20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.5定量测定 在8.3设定的仪器条件下测定标准工作溶液，以峰面积为纵坐标，标准工作溶液浓度为横坐标绘制 标准工作曲线，用标准工作曲线对试样进行定量。试样溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范 围内。标准物质的多反应监测色谱图参见附录B。 8.6平行试验 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 4按上述规定对同一试样进行平行试验测定。 8.7空白试验 除不加试样外，均按上述测定条件和步骤进行。 9试验数据处理 试样中氯虫苯甲酰胺的含量按式（1）计算： mVc 1000X ........................(1) 式中： X—试样中氯虫苯甲酰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c—由标准工作曲线得到的试样溶液中氯虫苯甲酰胺的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V—试样提取溶液的体积，单位为毫升（mL）； m—试样质量，单位为克（g）； 1000—由μg/kg转换为mg/kg的换算因子； 计算结果应扣除空白值，以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留3 位有效数字。 10回收率和精密度 方法的回收率和精密度的试验数据见附录C。 11灵敏度 本方法的定量限为0.001mg/kg。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 5A 附录A （资料性） 参考质谱条件 参考质谱条件如下： a）干燥气温度：300℃ b）干燥气流量：7L/min c）雾化气压力：35psi d）鞘气温度：325℃ e）鞘气流量：12L/min f）毛细管电压：4500V 其他质谱参数见表A.1 表A.1氯虫苯甲酰胺的质谱参数 化合物 监测离子 驻留时间（ms） 碰撞能量(eV) 氯虫苯甲酰胺484.1＞285.9* 50 13 484.1＞453.0 50 17 注：*表示定量分析的离子对；对于不同质谱仪器，仪器参数可能不同。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 6附录B （资料性） A 氯虫苯甲酰胺多反应监测（MRM）色谱图 全国团体标准信息平台 T/SDAQI041—2021 7附录C （资料性） 表C.1水果和蔬菜中氯虫苯甲酰胺的回收率结果（n=6） 基质加标水平（0.001mg/kg） 加标水平（0.01mg/kg） 加标水平（0.05mg/kg） 平均回收率/% RSD/% 平均回收率/% RSD/% 平均回收率/% RSD/% 苹果 86.3 4.16 84.3 4.74 83.7 3.04 桃 81.7 2.12 83.5 2.80 82.3 2.11 葡萄 84.0 2.59 87.4 3.08 84.3 2.95 柑橘 84.6 3.26 85.5 4.03 88.2 2.60 番茄 91.9 3.57