ICS67.060 X04T/SDAQI 团 体 标 准 T/SDAQI042—2021 谷物中氯虫苯甲酰胺残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 Determinationofchlorantraniliproleresiduesincerealsbyliquid chromatography-tandemmassspectrometricmethod 2021-10-25实施 山东质量检验协会  发布2021-09-25发布 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 I版权说明 本文件系由山东质量检验协会（简称“协会”）组织创制的团体标准文本（含制定过程中的草案）， 协会拥有本文件的著作权，受《中华人民共和国著作权法》保护。除法律所允许的情形或事先得到协会 书面许可外，任何组织和个人不得以任何理由进行复制、销售、传播本文件，或抄袭、歪曲本文件等侵 权行为，否则，行为人应承担相应的民事、行政责任，构成犯罪的，将依法追究其刑事责任。其他文件 引用本文件，不属侵权行为。 凡利用本文件进行或支持贸易、认证等商业活动，应事先购买正式文本或得到协会书面授权。购买 本文件或获得授权，请与协会联系。 欢迎社会各界举报侵权盗版行为，协会将依法严格保护举报人信息。 联系人：范红梅 联系电话：0531-8970198615668365153 联系邮箱：[email protected] 协会对本版权声明拥有最终解释权。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由山东质量检验协会提出并归口。 本文件起草单位：山东省产品质量检验研究院、滨州市食品药品检验检测中心。 本文件主要起草人：侯广月、卞英芳、李秀超、张永菊、周莉莉、王一村、刘丽洁、李娜、孔寒、 颜士忠、高伟、高翠、刚强、李大为、姚傲男。 本文件的所有权和解释权归山东质量检验协会。 如果您在本文件使用中发现错误或技术内容有不当之处，请及时与协会秘书处联系，将意见发送到 [email protected]。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 1谷物中氯虫苯甲酰胺残留量的测定液相色谱-串联质谱法 1范围 本文件规定了液相色谱-串联质谱测定小麦、大米、小米、玉米、小麦粉、玉米粉等谷物及其制品 中氯虫苯甲酰胺残留量的方法。 本文件适用于小麦、大米、小米、玉米、小麦粉、玉米粉等谷物及其制品中氯虫苯甲酰胺残留量的 测定。 本文件的方法定量限为0.0005mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4原理 试样用饱和氯化钠水溶液浸泡后用乙腈匀浆提取，提取液经固相萃取净化后，采用液相色谱-质谱/ 质谱检测，外标法定量。 5试剂 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 5.1乙腈（CH3CN）：色谱纯。 5.2乙酸铵（CH3COONH4）：色谱纯。 5.3甲酸（HCOOH）：色谱纯。 5.4氯化钠（NaCl）。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 25.5饱和氯化钠水溶液：称取45g氯化钠，加入100mL水，充分溶解后备用。 5.65mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）：称取0.385g乙酸铵，用水溶解后加入1mL甲酸， 最后用水定容至1L。 5.7乙腈水溶液（8:2，V/V）：取800mL乙腈（5.1），加入200mL水，摇匀备用。 5.8氯虫苯甲酰胺标准品（CAS号：500008-45-7），纯度不低于99.0%，或经国家认证并授予标准物 质证书的标准物质。 5.9氯虫苯甲酰胺标准储备溶液（1.0mg/mL）：准确称取10mg（精确至0.1mg）氯虫苯甲酰胺标准 品，用乙腈（5.1）溶解配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，-18℃冷冻避光保存。有效期6个 月。 5.10氯虫苯甲酰胺中间标准溶液（10μg/mL）：准确移取1mL氯虫苯甲酰胺标准储备液（5.9）于 100mL容量瓶中，用乙腈（5.1）定容至刻度，混匀，-18℃冷冻避光保存。有效期1个月。 5.11氯虫苯甲酰胺标准工作溶液：将氯虫苯甲酰胺中间标准溶液（5.10）用乙腈水（5.7）依次稀释 成0.2ng/mL、0.5ng/mL、1.0ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL的系列标准溶液。使 用前配制。 5.12固相萃取柱：OasisPrimeHLB（150mg），或相当者。 5.13亲水微孔滤膜：0.22µm。 6仪器和设备 6.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。 6.2分析天平：感量分别为0.1mg和0.01g。 6.3组织粉碎机。 6.4高速匀浆机。 6.5涡旋混合器。 6.6离心机：转速不低于6000r/min。 7试样制备 从原始样品取出有代表性样品约500g，取样部位按GB2763附录A执行，用组织粉碎机粉碎，混匀， 装入洁净的容器内，密闭并标明标记。4℃以下保存。 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 38试验步骤 8.1提取 称取试样10g（精确至0.01g），置于离心管中，加入15mL饱和氯化钠水溶液（5.5），震荡混匀， 静置30min后，准确加入20mL乙腈（5.1），高速匀浆提取1min，6000r/min离心5min，收集上清 液，待净化。 8.2净化 取2mL待净化液过OasisPrimeHLB小柱（5.12），收集净化液，取800μL净化液，加200μL 水，充分混匀后，过0.22μm亲水微孔滤膜，上机分析。 8.3液相色谱参考条件 8.3.1色谱柱：Poroshell120EC-C18，2.7μm，100mm×2.1mm（内径），或其他等效色谱柱。 8.3.2流动相：A相为5mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸），B相为乙腈，梯度洗脱程序见表1。 8.3.3流速：0.3mL/min。 8.3.4柱温：35℃。 8.3.5进样体积：5μL。 表1梯度洗脱表 时间，min A相，% B相，% 0.00 95 5 2.00 95 5 6.00 5 95 8.00 5 95 8.10 95 5 10.00 95 5 8.4质谱参考条件 质谱参考条件列出如下： a)离子源：电喷雾离子源； b)离子化模式：正离子模式； c）毛细管电压：4.5kV； d）干燥气温度：300℃； e）干燥气流量：7L/min； f）雾化气压力：35psi； g）鞘气温度：325℃； 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 4h）鞘气流量：12L/min； i）检测方式：多反应监测模式； j）其他质谱参数见下表2。 表2氯虫苯甲酰胺的质谱参数 化合物 母离子（m/z） 子离子（m/z）碎裂电压 （V）碰撞能量 （eV） 氯虫苯甲酰胺484.1 285.9a110 13 484.1 453.0 110 17 注：对不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。 a为定量离子。 8.5定性测定 按液相色谱和质谱参考条件测定试样溶液和标准工作溶液，试样溶液中氯虫苯甲酰胺的保留时间与 标准工作溶液的保留时间相一致，偏差在±2.5%之内。 每种化合物的质谱定性离子必须出现，至少应包括一个母离子和两个子离子，而且同一检测批次， 对同一化合物，样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度比与浓度相当的标准溶液相比，其允许偏差 不超过表3规定的范围。 表3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度k(%) K>50 50≥k>20 20≥k>10 k≤10 允许的相对偏差(%) ±20 ±25 ±30 ±50 8.6定量测定 将标准工作溶液和试样溶液依次注入液相色谱-质谱联用仪中，保留时间和定性离子定性，测得定 量离子峰面积，待测样液中化合物的响应值应在仪器检测的定量测定线性范围之内，超过线性范围时应 根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。色谱图信息见附录A。 8.7平行试验 按上述规定对同一试样进行平行试验测定。 8.8空白试验 除不加试料外,按上述规定进行操作。 9试验数据处理 试样中氯虫苯甲酰胺的含量按式（1）计算： 12 0 1000)-(XVmVV cc  ..................................(1) 全国团体标准信息平台 T/SDAQI042—2021 5式中： X—试样中氯虫苯甲酰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c—由标准曲线得到的试样溶液中氯虫苯甲酰胺的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； c0—由标准曲线得到的空白试样溶液中氯虫苯甲酰胺的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V—试样提取溶液的体积，单位为毫升（mL）； V1—试样分取提取溶液的体积，单位为毫升（mL）； V2—试样定容体积，单位为毫升（mL）； m—试样质量，单位为克（g）； 1000—由μg/kg转换为mg/kg的换算因子。 计算结果应扣除空白值，以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，