(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210769291.5 (22)申请日 2022.07.01 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 202 2820 202 2.06.07 CCTCC NO： M 202 2821 202 2.06.07 (71)申请人 中国烟草总公司四川省公司 地址 610041 四川省成 都市高新区世纪城 路936号1栋1单 元 申请人 西南大学 (72)发明人 丁伟　龚杰　李斌　江其朋　 余佳敏　余祥文　董晏伶　陈芷莹　 林正全　李峰　 (74)专利代理 机构 北京中政联科专利代理事务 所(普通合伙) 11489 专利代理师 曲晶晶(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 9/26(2006.01) C12N 9/42(2006.01) A01N 63/20(2020.01) A01P 1/00(2006.01) A01P 21/00(2006.01) A01G 13/00(2006.01) A01G 22/45(2018.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 具有促生作用的烟草种子内生菌及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种具有促生作用的烟草种子 内生菌DW26， 保藏编号： CCTCC  NO： M2022821， 分 类命名为Paenibacillus  odorifer， 保藏于中国 典型培养物保藏中心。 本发明筛选的具有促生作 用的种子内生菌DW26对青枯雷尔氏菌的抑菌效 果强， 是对烟草青枯病具有良好防治效果的生防 细菌， 能产生纤维素酶和淀粉酶， 也对烟草具有 良好的促生效果， 能显著提高烟苗生物量， 可单 用或复配使用， 对烟草青枯病生物防治具有广阔 的应用前景， 还 具有影响烟株根际土壤微生物功 能多样性的功能， 可解决因烟草连作年限增加导 致的植烟土壤养分供给和土壤微生态失衡等问 题， 避免造成烟草生长发育迟缓、 质量和产量下 降。 权利要求书1页 说明书14页 附图7页 CN 114940962 A 2022.08.26 CN 114940962 A 1.具有促生作用的烟草种子内生菌， 其特征在于， 所述烟草种子内生菌为DW26， 分类命 名： Paenibacillus  odorifer， 保藏于中国典型培养物保藏中心， 地址： 武汉， 保藏日期： 2022年6月7日， 保藏编号： C CTCC NO： M 2022821。 2.根据权利要求1所述的烟草种子 内生菌， 其特征在于， 烟草种子内生菌菌株呈白色圆 形， 不透明， 在膨大 胞囊内有椭圆形芽孢。 3.根据权利要求1所述的烟草种子 内生菌， 其特征在于， 烟草种子内生菌菌株能产生纤 维素酶和淀粉酶。 4.权利要求1 ‑3任一项所述的烟草种子内生菌作为生物菌剂用于抑制和/或防治青枯 病中的应用。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 生物菌剂中烟草种子内生菌的使用浓度为 1×106cfu/mL‑1×1012cfu/mL cfu/mL。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述生物菌剂的制备方法为： 将烟草种子 内生菌DW26菌株活化后， 挑取单菌落接种至LB液体培养基， 30℃、 180r/min培养至对数期， 使用无菌水稀释至1 ×106cfu/mL‑1×1012cfu/mL对植株进行灌根处 理。 7.权利要求1 ‑3任一项所述的烟草种子 内生菌作为生物菌剂用于促进烟株植株生长中 的应用。 8.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 生物菌剂中烟草种子内生菌的使用浓度为 1×106cfu/mL‑1×1012cfu/mL。 9.一种生物菌剂， 其特 征在于， 包 含权利要求1 ‑3任一项所述的烟草种子内生菌 菌株。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114940962 A 2具有促生作用的烟草种子 内生菌及其应用 技术领域 [0001]本发明属于农业微生物防治技术领域， 涉及一株具有促生作用的烟草种子内生菌 及其应用。 背景技术 [0002]青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstonia  solanacearum)引起的一种毁灭性的土传 病害， 其病原菌 极具破坏性， 可侵染超过200种植物， 造成巨大的经济损失， 诸如 使番茄减产 0‑91％， 马铃薯减产33 ‑90％， 烟草减产10 ‑30％， 香蕉减产80 ‑100％， 花生减产20％等。 烟草 青枯病(Tobacco  bacterial  wilt)是当前烟草生产中危害严重、 防控困难的一种土传病 害。 烟草青枯病在中 国西南烟区为害广泛， 并有向高海拔冷凉地区迁移的趋势， 是实际生产 中亟待解决的植物病害。 在我国， 由于长期以来烟草连作、 施肥和管理方式不当等因素， 烟 草连作障碍严重、 烟草青枯病大面积爆发， 严重降低各 大烟区烟叶的产质量。 [0003]烟草青枯病防治面临着极大挑战。 对于烟草青枯病的防治， 目前主要有选育抗性 品种、 生物防治、 化学防治等措施。 由于化学防治存在危害人类健康和破坏生态平衡等问 题， 而生物防治具有对人畜安全、 环境友好等优点， 因此， 近年来对土传病害烟草青枯病的 生物防治越来越受到 重视， 用于防治烟草青枯病的生防细菌的研究较为广泛。 [0004]目前， 对烟草青枯病的防治研究主要集中在诱抗化合物对烟草青枯病的防治效果 和机制、 青枯病与根际微生物的互作等方面， 对植物内生菌与烟草青枯病互作关系的相关 研究较少 。 植物与内生菌协同进化， 根据内生菌的作用， 将其分为三类： 一是中性内生微生 物， 该类微生物对植物没有明显的有害或者有益作用； 二是有益内生微生物， 能够发挥保护 植物免受病原体或食草生物的侵害、 促进植物生长等有益作用； 三是潜在病原内生微生物， 产生不利于植物生长的物质。 所以找到对烟草 植株有益内生 微生物是亟需解决的问题。 发明内容 [0005]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一株具有促生作用等多性能的烟草种子内生 菌， 还提供其可在 农业产业 化上的各种应用。 [0006]为达到上述目的， 本发明提供如下技 术方案： [0007]1.具有促生作用的烟草种子内生菌， 所述烟草种子内生菌为DW26， 分类命名： Paenibacillus  odorifer， 保藏于中国典型培养物保藏中心， 地址： 武汉， 保藏日期： 2 022年 6月7日， 保藏编号： C CTCC NO： M 2022821。 [0008]进一步， 具有促生作用的烟草种子内生菌的菌株呈白色圆形， 不透明， 在膨大胞囊 内有椭圆形芽孢。 [0009]进一步， 具有促 生作用的烟草种子内生菌的菌株能产生纤维素酶和淀粉酶。 [0010]2、 上述任一项所述具有促生作用的烟草种子内生菌作为生物菌剂用于抑制和/或 防治青枯病中的应用。 [0011]进一步， 具有促生作用的烟草种子内生菌作为生物菌剂用于抑制和/或防治青枯说　明　书 1/14 页 3 CN 114940962 A 3