(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211049458.7 (22)申请日 2022.08.30 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.25432 202 2.07.29 (71)申请人 河北农业大 学 地址 071001 河北省保定市南市区乐凯南 大街2596号 申请人 中国农业大 学 (72)发明人 田洪涛　宋菲　李晨　黄昆仑　 李东尧　贺晓云　张娜　闫子茹　 周杨坪　 (74)专利代理 机构 北京诚呈知识产权代理事务 所(普通合伙) 11883 专利代理师 杨凌波(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23L 5/20(2016.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 克劳氏碱性卤杆菌PA21及其在降解马铃薯 龙葵素中的应用 (57)摘要 本发明公开了属于生物技术领域的一株克 劳氏碱性卤杆菌(Alkalihalobacillusclausii) PA21， 保藏日期为2022年7月29日， 保藏编号为 CGMCC NO.25432。 本发明的克劳氏碱性卤杆菌 PA21菌株耐药， 不存在质粒， 无溶血活性， 不产生 有害代谢产物， 具有良好的环 境适应性和较高的 龙葵素耐受性。 该菌株的最适降解温度为37℃， 最适降解pH为7.5， 对α ‑茄碱和α ‑卡茄碱的降 解率均在90％以上。 权利要求书1页 说明书9页 附图4页 CN 115404184 A 2022.11.29 CN 115404184 A 1.克劳氏碱性卤杆菌(Alkalihalobacillus  clausii)PA21， 其特征在于， 其保藏编号 为CGMCC NO.25432。 2.权利要求1所述的克劳氏碱性卤杆菌在降解马铃薯龙葵素中的应用。 3.根据权利要求2所述的克劳氏碱性卤杆菌在降解马铃薯龙葵素中的应用， 其特征在 于， 所述克劳氏碱性卤杆菌降解马铃薯龙葵素的最 适降解温度为37℃， 最 适降解pH为7.5 。 4.提高权利要求1所述的克劳氏碱性卤杆菌对马铃薯龙葵素的降解率的培养基， 其特 征在于， 在LB培 养基的基础上额外添加乳糖作为添加碳源。 5.提高权利要求4所述的克劳氏碱性卤杆菌对马铃薯龙葵素的降解率的培养基， 其特 征在于， 包括蛋白胨10g、 牛肉膏3g、 NaCl  5g， 还包括乳糖10g。 6.一种降解马铃薯龙葵素的菌剂， 其特征在于， 包含权利要求1所述的保藏编号为 CGMCC NO.25432的克劳氏碱性卤杆菌 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115404184 A 2克劳氏碱性卤杆菌PA21及其在降解马铃薯龙葵素 中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及微 生物领域， 具体涉及克劳氏碱性卤杆菌及其应用。 背景技术 [0002]马铃薯(Solanum  tuberosum  L.)是继玉米、 小麦和水稻之后的世界第四大粮食作 物。 据农业农村部2020年统计， 全国马铃薯鲜薯产量达到1亿吨， 占全球20％以上， 种植面积 稳定在8000万亩以上。 贮藏过程中， 马铃薯会因打破休眠期而发芽， 同时伴随着内生毒 素龙 葵素含量上升。 龙葵素的主要成分为α ‑茄碱和α‑卡茄碱。 在我国， 由于马铃薯龙葵素含量上 升而造成的产业损失 高达15‑20％。 因此， 降低块茎毒素含量， 减少产业损失显得尤为重要。 各个国家对马铃薯中的龙葵素限量标准要求不同， 但大都认为块茎中龙葵碱的含量应低于 200mg/kg。 实际生产中， 没有抑制龙葵素的专用试剂， 而是通过施用抑芽剂氯苯胺灵 (CIPC)， 在抑芽的同时以达到抑制龙葵素含量增加的目的， 但CIPC在安全性上存在一定风 险。 还可通过基因改造进行马铃薯育种， 降低龙葵素含量， 但是基因改造育种周期长、 降毒 率不高。 由此可见， 无论是化学手段还 是基因改造手段都存在明显不 足， 亟需寻找新的高效 安全的解毒技 术或产品。 [0003]微生物降解是利用微生物和或其产物来降解食品中的污染物， 包括外源污染物 (农药重金属残留等)和内源毒 素。 微生物可以在生长过程中将有毒的污染物 转化为无毒化 合物。 到目前为止， 已经开 发出许多微生物来降解食品中的污染物。 微生物降解以其代谢多 样性， 降解产 物对食品和环境没有二次污染等优点成为有效去除食品毒 素污染物的首选技 术。 [0004]近年来， 内生细菌在微生物降解中的作用引起了大多数研究人员的关注。 内生细 菌定植于不同的植物组织， 对其宿 主植物没有任何致病性。 许多内生细菌， 特别是在污染环 境中生长的定殖植物， 产生许多降解酶， 并促进根际和内生圈中存在的几种污染物的降解。 内生细菌作为一种丰富的微生物资源， 值得进一步研究， 以评估其在降解食品污染物中的 作用。 发明内容 [0005]本发明旨在解决上述问题， 提供一株克劳氏碱性卤杆菌(Alkalihalobacillus   clausii)PA21， 保藏编号 为CGMCC NO.25432， 并提供了其在降解马铃薯龙葵素中的应用。 [0006]本发明从分离得到 的马铃薯块茎内生菌中， 筛选出3株具有较高龙葵素降解作用 的菌株， 经过形态学特征、 理化特征、 安全性检测， 综合龙葵素降解率及菌株安全性试验结 果， 选取PA21菌株为最佳菌株。 16s  rDNA鉴定， PA21菌株为克劳氏碱性卤杆菌， 命名为克劳 氏碱性卤杆菌(Alkalih alobacillus  clausii)PA21。 经安全性检测PA21菌株对头孢他啶、 红霉素、 乙酰螺旋霉素、 阿奇霉素和麦迪霉素耐药， 不存在质粒， 无溶血活性， 不产生有害代 谢产物。 克劳氏碱性卤杆菌PA21具有很强的降解马铃薯龙葵素的作用， 降解龙葵素的降解 产物为茄啶。 克劳氏碱性卤杆菌PA21降解马铃薯龙葵素的最适降解温度为37℃， 最适降解说　明　书 1/9 页 3 CN 115404184 A 3