(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210756046.0 (22)申请日 2022.06.29 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 202 2670 202 2.05.19 (71)申请人 浙江工业大 学 地址 310014 浙江省杭州市拱 墅区潮王路 18号 (72)发明人 朱廷恒　肖峰　李永曙　 (74)专利代理 机构 杭州天正专利事务所有限公 司 33201 专利代理师 李世玉 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C02F 3/34(2006.01) C12R 1/38(2006.01)C02F 101/30(2006.01) C02F 103/30(2006.01) (54)发明名称 假单胞菌SX-10及其在偶氮染料脱色中的应 用 (57)摘要 本发明公开了一种假单胞菌SX ‑10及其在偶 氮染料脱色中的应用， 所述偶氮染料包括分散大 红S‑R、 分散橙HGL、 分散橙S ‑3RF、 分散黄棕S ‑ 4RL、 分散红玉S ‑5BL、 分散深蓝HGL。 本发明假单 胞菌SX‑10在最佳脱色条件下(温度3 7℃、 共底物 1g/L酵母提取物、 微嗜氧)对浓度为100mg/L偶氮 染料分散大红S ‑R的脱色率达94.3％、 分散深蓝 HGL脱色率达96.3％、 分散橙HGL、 分散橙S ‑3RF、 分散黄棕S ‑4RL、 分散红玉S ‑5BL脱色率分别为 70.9％、 77.3％、 87.1％、 83.9％。 假单胞菌SX ‑10 有应用于偶氮染料废水生化处理工程的可能， 促 进废水中偶氮染料的脱色及降解。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图3页 CN 115216427 A 2022.10.21 CN 115216427 A 1.假单胞菌(Pseudomonas)S X‑10， 保藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏日期： 2022年 5月19日， 保藏编号： C CTCC NO： M 2022670， 地址： 中国武汉， 武汉大 学， 邮政编码： 43 0072。 2.一种权利要求1所述 假单胞菌SX‑10在偶氮染料脱色中的应用。 3.如权利要求2所述的应用， 其特征在于所述偶氮染料包括分散大红S ‑R、 分散橙HGL、 分散橙S‑3RF、 分散 黄棕S‑4RL、 分散红玉S ‑5BL、 分散深蓝 HGL。 4.如权利 要求2所述的应用， 其特征在于， 所述应用的方法为： 将假单胞菌SX ‑10菌液加 入含偶氮染料的无机盐培 养基中， 在20℃ ‑37℃静置条件下培 养， 实现偶氮染料的脱色。 5.如权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述无机盐培养基组成为： 0.5g/L  NaCl、 1g/ L NaH2PO4、 1g/L Na2HPO4、 0.5g/L MgSO4、 0.1g/L CaCl、 1g/L共底物， 溶剂为水； 所述共底物 为玉米粉、 酵母 粉或酵母提取物。 6.如权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述假单胞菌SX ‑10菌液OD600为2.0‑2.3， 体 积投加量 为5％。 7.如权利要求 4所述的应用， 其特 征在于， 所述偶氮染料加入 浓度为50mg/L‑800mg/L。 8.如权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述假单胞菌SX ‑10菌液按如下方法制备： (1)将假单胞菌SX ‑10接种至LB固体培养基平板， 37℃恒温培养箱培养1d； LB固体培养基： 10g/L NaCl、 10g/L胰蛋白胨、 5g/L酵母提取物， 20g/L 琼脂， 溶剂为水； (2)挑取步骤(1)平板上培养好 的SX‑10菌落接种到LB液体培养基， 37℃180rpm恒温摇 床培养1d， 获取一级种子 液； LB液体培养基： 10g/L  NaCl、 10g/L胰蛋白胨、 5g/L酵母提取物， 溶剂为水； (3)将步骤(2)中一级种子液按体积浓度5％的接种量接种到LB液体培养基中， 37℃、 180rpm恒温摇床培养2d， 离心， 收集菌体， 并用无菌水清洗并稀释， 获得假单胞菌SX ‑10菌 液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115216427 A 2假单胞菌SX ‑10及其在偶氮染料 脱色中的应用 (一)技术领域 [0001]本发明涉及一株从自然环境筛选的假单胞菌SX ‑10及其在偶氮染料脱色中的应 用。 (二)背景技术 [0002]据报道， 目前中国每年大约生产染料70多万吨， 消耗量达60万吨。 这些染料被广泛 应用于许多行业， 如纺织、 造纸、 食品、 制革厂、 化妆品和制药工业。 这些染料按化学结构大 致可以分为偶氮类、 蒽醌类、 芳甲烷类、 酞菁类和 硝基类， 其中偶氮类染料是品种最多、 应用 最广的， 在合成类染料中占比达70％以上， 占全球可用商业 染料的60％以上。 偶氮染料的显 色源于其化学结构中的偶氮键( ‑N＝N‑)， 在偶氮染料被利用的同时大约有10％ ‑15％的未 结合染料在流出物中排出。 这些释放的染料不仅对野生动植物有毒， 还会通过阻止阳光进 入深水层， 降低水体氧气的溶解度， 破坏水生生态系统。 此外， 许多偶氮染料和其中间体芳 香胺具有剧毒和致癌性， 通过食物链 威胁到人类生命健康安全和水生物种。 因此， 如何安全 有效的去除废水中的偶氮染料已经形成了一个迫在眉睫的问题。 废水中偶氮染料的去除有 很多的物理和化学方法， 比如膜吸 附、 芬顿氧化、 化学絮凝等等， 这些方法的缺点是要么投 资成本高， 要么产生大量的活性污泥造成二次污染且都处理过程繁琐， 处理效率不高。 相比 于物理和 化学方法， 依靠微生物菌群的生物法有着巨大 的优势， 即惊人 的分解代谢多样性 以及微生物种群先天就存在于受染料污染的环境中， 由于各种污染物的选择压力， 微生物 降解顽固性污染物的能力是不断进化的。 生物法高度依赖的微生物菌群是由一个个微生物 菌株所构成， 这些微生物菌株相互协作， 通过直接作用和共代谢对染料及其中间体进行降 解。 [0003]目前国内外研究者已经从环境中分离出很多能够对偶氮染料达到降解目的的菌 株， 主要包括芽孢杆菌、 假单胞菌、 酵母菌、 白腐真菌等等。 但是， 目前为止通过微生物处理 染料废水成功的案例 很少， 主要原因就是对偶氮染料高效降解的菌株资源还是不够丰富， 各种菌株对偶氮染料及其中间体降解 程度有限。 [0004]因此， 从环境中筛选出更多对偶 氮染料及 其中间体有高效降解作用的菌株非常重 要。 (三)发明内容 [0005]本发明目的是提供一株从污水厂活性污泥中筛选 的偶氮染料高效脱色菌株 ‑‑假 单胞菌(Pseudomonas)SX ‑10及其对偶氮染料脱色的应用， 解决了目前偶氮染料脱色菌株较 难分离及偶氮染料脱色菌株微 生物资源不够丰富的问题。 [0006]本发明采用的技 术方案是： [0007]本发明提供了一株 从自然环境筛选的新菌株 ‑‑假单胞菌(Pseudomonas)SX ‑10， 该 菌株SX‑10保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)， 保藏日期： 2022年5月  19日， 保藏编 号： CCTCC  NO： M 2022670， 地址： 中国湖北省武汉市武昌区珞珈山路16号武汉大学， 邮政编说　明　书 1/6 页 3 CN 115216427 A 3