(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210836599.7 (22)申请日 2022.07.15 (66)本国优先权数据 202210781049.X 202 2.07.04 CN (71)申请人 石河子大 学 地址 832000 新疆维吾尔自治区石河子市 北四路221号石河子大 学 (72)发明人 倪伟　胡圣伟　李晓悦　李村院　 (74)专利代理 机构 乌鲁木齐恒智专利商标代理 事务所(普通 合伙) 65102 专利代理师 李靖 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/02(2006.01) A23K 10/18(2016.01)A23K 50/10(2016.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 一种高效降解纤维素的混合菌制剂的制备 (57)摘要 本发明公开了一种能够高效降解纤维素的 混合菌制剂。 通过初筛与复筛相结合的方式从马 肠道中分离筛选出高效降解纤维素的细菌， 对其 进行种属鉴定后， 将产酶能力强的前5株菌等比 例混合制成混合菌制剂， 利用口服的方式饲喂给 绵羊， 动物实验 结果表明该混合菌制剂能够通过 提高饲料转化率的方式显著增加绵羊日增重。 本 发明制备的混合菌制剂能够高效降解农业生产 活动中产生的纤维素类物质， 提高纤维素能源的 利用效率， 此外也可用于解决纤维素燃烧和废弃 造成的环 境污染等问题； 可作为畜牧业养殖中的 饲料添加剂， 提高饲料的转化效率， 改善动物肠 道菌群与健康。 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 CN 115044517 A 2022.09.13 CN 115044517 A 1.一种能够提高绵羊日增重和饲 料转化率的高效降解纤维素的混合菌制剂的配方， 其 特征在于： 包括以下步骤： 马盲肠内容物样本的采集： 采集马的盲肠内容物； 纤维素降解菌的分离培养： 通过刚果红染色法初筛和摇瓶发酵法复筛相结合的方式对 马盲肠中降解纤维素的细菌进行分离 筛选； 羧甲基纤维素酶活力的测定： 将筛选得到的菌株使用DNS显色法进行羧甲基纤维素酶 活力的测定， 选出酶活最高的五株菌， 包括两株短小芽孢杆菌和三株漳州芽孢杆菌； 纤维素降解菌混合制 剂的制备： 将筛选出的酶活较 高的短小芽孢杆菌和酶活较 高的漳 州芽孢杆菌进行等浓度混合， 使总活菌数为5 ×1010CFU/mL， 即得到降解纤维素的混合菌制 剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115044517 A 2一种高效降解纤维素的混合菌制剂的制备 技术领域 [0001]本发明属于微生物生态制剂领域， 涉及一种微生物制剂， 具体涉及一种高效 降解 纤维素的混合菌制剂的制备。 背景技术 [0002]我国作为农业大国， 每年的秸秆产量十分可观， 但是由于其主要成分纤维素复杂 的结构特点， 导致其利用率非常有限(Lynd  L R,Laser M S,Bransby  D,et al、 How  biotech can transform  biofuels[J]、 Nature  biotechnology,2008,26(2):169 ‑172)。 绝 大部分因无法分解利用 而废弃或直接在田间进行焚烧处理， 只有一小部分被用作畜牧饲 料， 这不仅极大程度上降低了秸秆资源的有效利用率， 并给自然环 境带来巨大威胁。 纤维素 作为一种 可再生资源， 其降解和转化是自然界最基本也最重要的碳素循环， 在畜牧业生产 和饲料工业中， 添加纤维素酶或纤维素降解菌， 不仅能够在提高饲料转化率的同时保持家 畜动物的生产性能， 还能缓解环境污染和能源短缺的危机。 因此， 如何将纤维素转化为可利 用的能源一直是人类不断探索的课题。 目前主要利用微生物产生的纤维素酶降解纤维素， 该方法具有反应温和且无污染的特点。 自然界中大多数微生物都具有降解纤维素 的能力， 其中细菌由于具有生长速度快、 操作简单、 大规模培养成本低等优势而被广泛用于生产纤 维素酶。 因此， 从动物肠道中分离培养出生长繁殖快且纤维素酶活高的细菌一直是研究的 热点。 [0003]马作为典型的后肠消化型食草动 物， 由于其具有役用、 赛用、 乳用和肉用等多种重 要的用途而被广泛饲养在全球各地， 其膨大 的盲肠中共生了大量的微生物， 能够高效地降 解饲草中难以消化的纤维素， 生成单糖和短链脂肪酸等利于机体吸收的成分。 同时， 有研究 表明在消 化相同饲草的时候， 后肠消 化型动物比反刍类动物释放更少的甲烷和氢气， 对环 境更加友好(苏少锋.蒙古马胃肠道细菌群落组成及纤维素分解菌的研究[D].呼和浩特： 内 蒙古农业大学,2019.)。 目前， 已有 大量研究报道， 分别从梅花鹿、 双峰驼、 牦牛、 羊、 藏猪、 大 熊猫等多种动物的胃肠道或粪便中分离出了纤维素降解菌。 然而， 目前对马盲肠中微生物 的研究相对匮乏。 因此， 深入研究马盲肠中的纤维素降解菌可能会为应对环境危机、 能源危 机、 新型益 生菌的开发等方面 提供新的解决方案 。 [0004]因此， 本发明通过对马肠道中的微生物进行分离筛选与培养， 获得了能够高效 降 解纤维素的细菌， 将其制成干粉制剂， 并在绵羊体内对其降解纤维素的功能进行验证。 发明内容 [0005]本发明的目的是解决纤维素降解效率低的问题， 提供一种高效的降解纤维素的混 合菌制剂。 该混合菌制剂比其 他单一细菌降解效率高， 是一种非常有效的纤维素降解产品。 [0006]为了达到上述的技 术效果， 本发明采取以下技 术方案： [0007]本发明将产酶高的5株纤维素降解菌制成混合制剂， 解决了单一菌株酶产量低， 酶 活差的问题； 同时本发 明的纤维素降解菌来源于马肠道， 不仅安全无毒害作用， 同时能够有说　明　书 1/5 页 3 CN 115044517 A 3