(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210874063.4 (22)申请日 2022.07.25 (71)申请人 江苏省农业科 学院 地址 210014 江苏省南京市玄武区钟灵街 50号 (72)发明人 于岩飞　冯志新　邵国青　王佳　 韦艳娜　谢青云　熊祺琰　张磊　 谢星　刘茂军　 (74)专利代理 机构 南京汇盛专利商标事务所 (普通合伙) 32238 专利代理师 袁静 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12R 1/35(2006.01) (54)发明名称 一种高效动物 支原体培养基及其制备方法 (57)摘要 本发明提供一种高效动物支原体培养基及 其制备方法， 属于动物医学领域。 该高效动物支 原体培养基， 是在KM2 培养基中添加FH和C4bp。 本 发明培养基的配制方法， 包括如下步骤： 在KM2 培 养基中添加无菌FH和C4bp， 得到所述培养基。 采 用本发明动物支原体培养基能够显著提高动物 支原体的CCU50值， 显著降低疫苗生成成本和提 高免疫效果。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115074297 A 2022.09.20 CN 115074297 A 1.一种高效动物 支原体培养基， 其特 征在于是在KM2培 养基中添加FH和C4bp后。 2.根据权利要求1所述培养基， 其特征在于FH的浓度为8 ‑12 μg/mL， C4bp的浓度为8 ‑12 μ g/mL。 3.根据权利要求1或2所述培 养基， 其特 征在于所述KM2培 养基中的猪血清是 未灭能的。 4.权利要求1所述培养基的配制方法， 其特征在于包括如下步骤： 在KM2培养基中添加 无菌FH和C4bp， 得到所述培 养基。 5.权利要求1所述培 养基在培 养动物支原体中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115074297 A 2一种高效动物支原体培养基 及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于动物医学 领域， 具体涉及一种高效动物 支原体培养基及其制备 方法。 背景技术 [0002]猪支原体肺炎是一种由猪肺炎支原体感染引起的慢性猪呼吸道传染病， 感染猪出 现咳嗽、 气喘、 生长缓慢， 并常伴 发猪繁殖与呼吸综合征病毒、 猪圆环病毒、 胸膜肺炎放线杆 菌等继发感染， 加剧临床症状， 造成猪呼吸道疾病综合征， 给养猪业造成重大 的经济损失。 理想的饲养环境及抗生素药物与疫苗的使用在 疾病预防方面具有较好的效果， 但抗生素存 在药物残留及耐药性问题， 在养殖业减抗、 限抗的背 景下， 疫苗成为猪支原体肺炎防治的重 要手段。 [0003]猪肺炎支原体灭活疫苗及弱毒疫苗的制备离不开高效的培养基。 然而现有的猪肺 炎支原体培养基存在菌株终点CCU50(50％color  change unit)不高、 生长缓慢等问题， 影响 猪肺炎支 原体抗原的生产及疫苗的免疫效果。 发明内容 [0004]本发明的目的是提供一种高效动物支原体培养基， 可以显著提高动物支原体的 CCU50。 [0005]本发明的目的采用如下技 术方案实现： [0006]一种高效动物 支原体培养基， 是在KM2培 养基中添加FH和C4bp后。 [0007]在本发明 中， 所述培 养基中FH的浓度为8 ‑12 μg/mL， C4bp的浓度为8 ‑12 μg/mL。 [0008]在本发明 中， 所述KM2培 养基中的猪血清是 未灭能的。 [0009]本发明还提供所述培养基的配制方法， 包括如下步骤： 在KM2培养基中添加无菌FH 和C4bp， 得到所述培 养基。 [0010]本发明还提供 所述培养基在培 养动物支原体中的应用。 [0011]有益效果： 采用本发明动物支原体培养基能够显著提高动物支原体的CCU50值， 显 著降低疫苗 生成成本和提高免疫效果。 具体实施方式 [0012]实施例1支 原体基础培养基的配制和C CU50的检测方法 [0013]1.支原体基础培养基 [0014]支原体基础培养基是改良的Sw itzer培养基， 即KM2培 养基， 其配制方法如下： [0015]配制Eagle's溶液： 取48.47g的MEM培养基(Gibco)和1.5g的L ‑谷氨酰胺溶于超纯 水， 然后用超纯 水定容至 5000mL。 [0016]配制1.7％水解乳蛋白磷酸缓冲液： 取24.00g的NaCl、 6.00g的KCl、 8.695g的 Na2HPO4、 0.60g的KH2PO4、 0.30g的CaCl2、 0.30g的MgCl2和50.00g水解乳蛋白(购自 Millipore， 产品编号613 02)溶于超纯 水， 然后用超纯 水定容至 3000mL。说　明　书 1/4 页 3 CN 115074297 A 3