(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210743010.9 (22)申请日 2022.06.28 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24209 2021.12.2 9 (71)申请人 焦作市佰役安 生物工程有限公司 地址 454350 河南省焦作市修武县 郇封镇 产业集聚区华芳路19号-1号 (72)发明人 常艺海　王文龙　秦立群　牛俊轲　 李高强　刘永立　段丹霞　张杰　 刘祖琳　练豪帅　 (74)专利代理 机构 焦作市科彤知识产权代理事 务所(普通 合伙) 41133 专利代理师 杨晓彤 (51)Int.Cl. A61K 36/8998(2006.01)A61K 9/00(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61K 47/12(2006.01) A61K 47/40(2006.01) A61P 11/06(2006.01) A61P 11/14(2006.01) A61K 35/742(2015.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/10(2006.01) (54)发明名称 一种饲用发酵中药口服液的制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种饲用发酵中药口服液的 制备方法， 包括地衣芽孢杆菌活化接种到种子液 培养基中发酵， 获得地衣芽孢杆菌种子液； 地衣 芽孢杆菌种子液接种到含有中药粉混合物的液 体发酵培养基中发酵， 得到地衣芽孢杆菌 ‑中药 粉发酵液混合物； 地衣芽孢杆菌 ‑中药粉发酵液 混合物进行离心分离， 对上清液进行分离纯化得 到饲用发酵中药浓缩液； 向饲用发酵中药浓缩液 中加入稳定剂进行调配， 得到饲用发酵中药口服 液。 本发明使用特定的地衣芽孢杆菌使得中药粉 混合物一同在液体发酵培养基中发酵， 利用在发 酵过程中的升温和降温替代中药的蒸煮过程， 特 定的地衣芽孢杆菌在发酵过程中产生的抗菌肽 和多种酶系， 将中药中的活性物质进一步分解和 释放， 增强活性。 权利要求书2页 说明书5页 序列表1页 附图1页 CN 115089672 A 2022.09.23 CN 115089672 A 1.一种饲用发酵中药口服液的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1地衣芽孢杆菌种子液制备， 将地衣芽孢杆菌活化接种到种子液培养基中发酵， 获得 地衣芽孢杆菌种子液； S2地衣芽孢杆菌 ‑中药粉发酵液混合物制备， 将步骤S1获得的地衣芽孢杆菌种子液接 种到含有中药粉混合物的液体发酵培养基中发酵， 得到地衣芽孢杆菌 ‑中药粉发酵液混合 物； S3固液分离， 将地衣芽孢杆菌 ‑中药粉发酵液混合物进行离心分离， 得到上清液和沉 淀； 使用超滤膜对上清液进行分离纯化， 得到饲用发酵中药浓 缩液； S4饲用发酵中药口服液制备， 将步骤S3获得的饲用发酵中药浓缩液加入稳定剂进行调 配， 得到饲用发酵中药口服液。 2.根据权利要求1所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述地衣 芽孢杆菌(Bacillus  licheniformis)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心， 保藏时间为2021年12月2 9日， 保藏 号为CGMCC No.24209。 3.根据权利要求1所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S1中， 地衣芽孢杆菌的菌体浓度为1 ×106‑1×109CFU/ml； 每升种子液培养基中包括： 蔗糖7 ‑18g、 牛骨蛋白胨6 ‑14g、 酵母浸粉9 ‑20g、 氯化钠0.3 ‑ 0.9g、 硫酸镁0.5 ‑0.9g、 硫酸锰0.02 ‑0.09g、 柠檬酸三铵3 ‑8g、 磷酸氢二钾4 ‑9g， 其余为纯 水。 4.根据权利要求3所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S1中， 发酵 条件为： pH值 为5.0‑8.0， 发酵温度为28 ‑42℃， 发酵时间为20 ‑44h。 5.根据权利要求1所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S2中， 地衣芽孢杆菌种子液以5 ‑14％的接种量接种至含有中药粉混合物的液体发酵培养 基； 每升所述含有中药粉混合物的液体发酵培养基中包括： 花生饼粉30 ‑60g、 可定性淀粉 20‑50g、 骨蛋白粉5 ‑20g、 氯化钠3 ‑8g、 磷酸氢二钾4 ‑9g、 磷酸二氢钾4 ‑9g、 硫酸镁0.8 ‑4g、 中 药粉混合物80 ‑150g、 其余为水； 步骤S2的发酵 条件为： pH值 为5‑8， 发酵温度为28 ‑42℃， 发酵时间为20 ‑44h。 6.根据权利要求5所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述中药 粉混合物包括以下重量份的各组分： 柴胡5 ‑20份、 黄芩10 ‑30份、 金银花7 ‑25份、 穿心莲15 ‑ 22份、 地棉草8 ‑15份、 艾叶10 ‑25份、 麦冬5 ‑10份、 甘草6 ‑10份、 大枣5‑10份、 麦芽5‑15份。 7.根据权利要求1所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S3中， 离心分离时采用碟式离心机， 碟式离心机的转速为5000 ‑7000rpm， 离心时间15 ‑ 35min； 超滤膜的截留范围为10 ‑50KD。 8.根据权利要求1所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S4中， 稳定剂的加入量 为饲用发酵中药口服液质量的3 ‑10％。 9.根据权利要求8所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述步骤 S4中， 稳定剂 包括以下重量份的各组分： 黄原胶15 ‑30份、 山梨酸钾20 ‑50份、 苯甲酸钠15 ‑30 份、 双乙酸钠15 ‑30份、 β‑环糊精5‑20份。 10.根据权利要求9所述的一种饲用发酵中药口服液的制备方法， 其特征在于： 所述饲权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115089672 A 2用发酵中药口服液的分子量 为10‑50KD。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115089672 A 3