(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221075413 6.6 (22)申请日 2022.06.29 (71)申请人 江苏大学 地址 212013 江苏省镇江市京口区学府路 301号 (72)发明人 陈华友　卢晨曦　陈曦华　蔡康涛　 王振　李守志　高恶斌　倪忠　 雍阳春　王洪成　 (74)专利代理 机构 南京智造力知识产权代理有 限公司 32382 专利代理师 李侨飞 (51)Int.Cl. A23K 10/12(2016.01) A23K 10/30(2016.01) A23K 10/37(2016.01)A23K 20/189(2016.01) A23K 50/80(2016.01) A01K 67/02(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12Q 1/04(2006.01) A61K 36/539(2006.01) A61K 35/64(2015.01) A61K 36/287(2006.01) A61K 36/47(2006.01) A61P 31/04(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/865(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方法及其用途 (57)摘要 本发明属于生物饲料领域， 具体涉及一种防 治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲料添加剂的 制备方法及其用途； 步骤为： 活化菌株、 培养得到 芽孢杆菌、 酵母菌和乳酸菌发酵种子液； 将研磨 成粉的复方中药材与豆粕、 次粉混合后， 添加复 合酶得到发酵培养基， 接种芽孢杆菌发酵种子 液、 酵母菌发酵种子液以及乳酸菌发酵种子液， 在密闭条件 下进行厌 氧发酵后得到最终产品； 本 发明采用复方中药材进行菌酶协同发酵， 得到的 产品能够 有效控制嗜水气单胞菌， 且 该饲料添加 剂中富含益生菌， 可有效提升养殖动物的免疫 力， 具还有酸香味、 动物喜食； 且利于工业生产， 使用方便、 便 于贮藏， 具 备良好的应用前 景。 权利要求书2页 说明书23页 附图9页 CN 115088785 A 2022.09.23 CN 115088785 A 1.一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法， 其特征在于， 制备 步骤如下： (1)配制发酵培养基： 将复方中药材、 豆粕与 次粉混合， 再添加纤维素酶、 半纤维素酶、 单宁酶， 混合后得到固态发酵培 养基； 发酵培养基的各组分重量百分含量分别为： 复方中药 材10～90％； 豆粕6～54％； 次粉4～3 6％； 复合酶添加量0.1～10％； 所述复方中药材由以下重量百分比的材料组成： 黄芩4～36％、 五倍子2.4～21.6％、 野 菊花2.8～ 25.2％、 地锦草0.8～7.2％； 所述复合酶由纤维素酶、 半纤维素酶和单宁酶组成； (2)将芽孢杆菌、 酵母菌和乳酸菌分别接种到相应的液体培养基进行活化培养， 分别得 到芽孢杆菌发酵种子液、 酵母菌发酵种子液和乳酸菌发酵种子液； (3)接种步骤(2)得到的芽孢杆菌种子液、 酵母菌种子液、 乳酸菌种子液于步骤(1)得到 的发酵培养基中， 调整发酵温度以及培养基的含水量， 混合均匀， 得到发酵混合物， 在密闭 条件下进行厌氧发酵后得到防治嗜水气单 胞菌感染的发酵中药饲料 添加剂。 2.根据权利要求1所述的一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方 法， 步骤(1)中所述豆粕在 使用时需要烘干、 研磨成粉末状使用； 所述粉末是过50 ‑80目筛得 到； 所述复方中药 材研磨成粉末状使用， 所述粉末是 过50‑80目筛得到 。 所述纤维素酶、 半纤维素酶、 单宁酶的质量比为2:2:3； 所述， 复合酶中， 半纤维素酶酶 活力为5万u/g， 纤维素酶和单宁酶的酶活均为1万u/g。 3.根据权利要求1所述的一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方 法， 步骤(1)中所述发酵培 养基的各组分重量百分含量分别为： 复方中药 材50％； 豆粕30％； 次粉20％； 复合酶添加量1％； 所述复方中药材由以下重量百分比的材料组成： 黄芩20％、 五倍子 12％、 野菊花14％、 地锦草 4％。 4.根据权利要求1所述的一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方 法， 其特征在于， 步骤(2)中所述的芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌； 所述酵母菌为酿 酒酵母； 所述 乳酸菌为 植物乳杆菌、 发酵乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌 。 5.根据权利要求1所述的一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方 法， 其特征在于， 步骤(3)中所述芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液接种时的用量与 发酵培养基关系均为0.1～9ml： 100g； 所述芽孢杆菌和酵母菌的活菌总 数均为1.0 ×108～ 2.8×109cfu/mL； 所述酵母菌发酵种子液为 酿酒酵母发酵种子液； 所述乳酸菌发酵种子液为植物乳杆菌发酵种子液、 发酵乳杆菌发酵种子液和鼠李糖乳 杆菌发酵种子液， 活菌总数为1.5 ×108～3.5×109cfu/mL， 所述乳酸菌发酵种子液的接种量 与发酵培 养基关系为0.8～5.7ml： 10 0g；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115088785 A 2所述乳酸菌发酵种子液、 芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液接种时的体积比为 2： 2： 3。 6.根据权利要求5所述的一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方 法， 其特征在于， 所述芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液接种时的用量与发酵培养 基关系均为2ml： 10 0g。 7.根据权利要求1所述的一种防治嗜水气单胞菌的复方发酵中药饲 料添加剂的制备方 法， 其特征在于， 步骤(3)中所述 发酵培养基的含水量为40％～60％； 所述 发酵时间为5～20 天， 发酵温度为24～38℃。 8.根据权利要求1～7任一项所述的方法制备的复方发酵中药饲料 添加剂。 9.根据权利要求8所述的复方发酵中药饲料添加剂用于添加到水产养殖饲料中抑制嗜 水气单胞菌的用途。 10.根据权利要求9所述的用途， 其特征在于， 具体操作 是： 将复方发酵中药饲 料添加剂 添加到水产饲料中得到 混合饲料进行喂养； 所述复方发酵中药饲料添加剂的添加量占混合 饲料的重量 为5％～25％。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115088785 A 3