(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210860121.8 (22)申请日 2022.07.20 (83)生物保 藏信息 GDMCC NO.6215 0 2021.12.21 (71)申请人 安徽粤智徽源生物科技有限公司 地址 233010 安徽省蚌埠市中国 （安徽） 自 由贸易试验区蚌埠片区禹会区长青乡 兴华路新型工业化产业示范基地一期 13号楼1楼和5楼 (72)发明人 于素凤　刘浩　孙成武　 (74)专利代理 机构 合肥辉达知识产权代理事务 所(普通合伙) 3416 5 专利代理师 汪守勇 (51)Int.Cl. C12P 19/12(2006.01)C12P 19/04(2006.01) C12P 19/00(2006.01) C12P 19/14(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12N 9/24(2006.01) C08J 3/12(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C08L 5/08(2006.01) (54)发明名称 一种酶解壳聚糖制备壳寡 糖的方法 (57)摘要 一种酶解壳聚糖制备壳寡糖的方法， 涉及壳 寡糖制备技术领域。 通过壳聚糖与冰醋酸在一定 的温度下溶胀后， 在壳聚糖酶的作用下降解成为 壳寡糖液体， 最终通过喷雾干燥获得壳寡糖粉 体。 在保证壳寡糖的纯度、 溶解度、 丝滑感等生物 活性为前提， 有效的降低干燥制粉的物料的损 失、 缩短干燥时间降低生产成本， 使得喷雾的壳 寡糖的粉体的色泽均匀。 本发明通过优选菌株制 成的酶液， 进行降解壳聚糖， 制备的壳寡糖品质 较高。 采用经离心后的壳寡糖液体， 排除无其他 杂质干扰喷雾效果。 壳寡糖液体质量浓度8％ ‑ 20％和pH3.0 ‑7.0的条件下， 不会被喷雾干燥的 高温破坏空间结构， 也不会因温度高而变性成为 不溶物质， 其仍保持良好的纯度和溶解度等生物 活性。 权利要求书1页 说明书4页 附图1页 CN 115181770 A 2022.10.14 CN 115181770 A 1.一种酶解壳聚糖制备壳寡糖的方法， 其特 征在于， 步骤如下： (1)制备酶液 制备酶液所采用的酶是由分类学命名为热带芽孢杆菌， 拉丁名为Bacillus  tropicus， 编号为LHLJW.A06的菌种所分泌出来的， 该菌种已保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏 编号为GDMCC NO.62150， 保藏日期为2021年12月21日， 保藏单位地址为广州市先烈中路100 号大院59号楼5楼， 广东省科 学院微生物研究所， 邮政编码510 070； (2)溶胀 在反应釜中加入壳聚糖原料与冰醋酸， 通过溶胀反应使壳聚糖完全溶解成壳聚糖胶 体； (3)降解反应 向壳聚糖胶体中加入步骤(1)制备的酶液， 进行降解反应； (4)壳寡糖液体预处 理 将步骤(3)降解获得的反应液， 经 过调节pH、 离心或者过 滤、 除菌后得到壳寡糖液体； (5)喷雾干燥 抽取步骤(4)获得的壳寡糖液体进入离心式喷雾干燥塔， 壳寡糖液体通过雾化喷洒瞬 间高温迅速汽化形成粉状固体， 粉状固体在经过二次旋风分离器收集后得到浅黄色壳寡糖 粉末。 2.如权利 要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(2)中于50 ‑60℃温度条件下进行1 ‑2h的 溶胀反应， 冰醋酸的添加量 为壳聚糖原料的3％ ‑5％。 3.如权利 要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(3)中降解反应于50 ‑60℃温度条件下进 行， 降解时间为8 ‑12h， 酶液的添加量 为壳聚糖原料的3％ ‑5％。 4.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(4)中控制得到的壳寡糖液体的浓度质 量分数为8％ ‑20％， pH值调节为3.0 ‑7.0。 5.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 步骤(5)中设置喷雾干燥塔的进风温度170 ‑ 180℃， 出风温度为80 ‑90℃， 进料泵速为5 0‑60ml/min。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115181770 A 2一种酶解壳聚糖制备壳寡糖的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及壳寡糖制备技术领域， 具体是涉及一种酶解壳聚糖制备壳寡糖的方 法。 背景技术 [0002]壳寡糖又被成为氨基壳寡糖素、 寡聚糖等， 是通过壳聚糖在壳聚糖酶的作用下降 解成一种聚合度在2 ‑20的氨基糖类化合物， 分子量在3000Da左右， 具有良好的水溶性且具 有较高的生物活性的低聚壳寡糖。 壳寡糖脱乙酰度越高， 自由基含量越多壳寡糖抑菌活性 越高， 所以壳寡糖本身就是一种混合物， 不同的分子量其功能特性不同。 因壳寡糖具有成膜 性、 透气性、 吸湿性、 无毒无味、 杀菌性等活性， 所以广泛应用于农业、 化工、 纺织、 畜牧、 生物 医药等诸多领域， 常被作医药用品、 纺织和环保原材料、 饲料、 保鲜剂、 农药等。 壳寡糖在农 业上的应用显著， 不会引起植物的抗药性， 能够诱导植物产生防御机制， 可以促进植物生长 发育， 改善品质， 抵抗作物多种病虫害， 提高作物在低 温、 干旱、 盐碱等逆境中的抵抗力， 因 此可以广泛的应用在 农业上， 又成无毒无害的新型生物农药。 [0003]目前， 在生产壳寡糖时， 需要将酶解液进行干燥， 如何选择干燥方式对生产壳寡糖 产品的品质起到至关重要。 而工业上干燥壳寡糖的方式主要有冷冻干燥、 热风干燥、 真空干 燥等。 其中， 冷冻干燥是最理想的干燥方式， 但是冷冻干燥投资成本高且操作费用特别高， 从提高了生产成本。 冷冻干燥 都是实验室常用的方法， 不太适合工业化生产。 热风喷雾干燥 浪费电的同时而且也很浪费物料。 [0004]喷雾干燥， 作为一种瞬间干燥技术， 物料的受热时间短、 产品的色泽均匀、 有效成 分不易破坏等优势， 是一种适用于液态物料干燥理想的干燥的方法， 也能实现连续生产， 降 低物料浪费， 对生产壳寡糖的工业化生产有重要意义。 但是， 由于壳寡糖是一种氨基多糖类 化合物， 如果干燥工艺设置不当， 在干燥过程易产生美拉德反应， 使得产品的色泽加深， 还 会影响壳寡糖的生物活性。 发明内容 [0005]本发明公开了一种酶解壳聚糖制备壳寡糖的方法， 在保证壳寡糖的纯度、 溶解度、 丝滑感等生物活性为前提， 有效的降低干燥制粉的物料 的损失、 缩短干燥时间降低生产成 本， 使得喷雾的壳寡糖的粉体的色泽均匀， 减少研磨筛 选等工序。 [0006]为了实现上述目的， 本发明所采用的技 术方案为： [0007]一种酶解壳聚糖制备壳寡糖的方法， 步骤如下： [0008](1)制备酶液 [0009]制备酶液所采用的酶是由分类学命名为热带芽孢杆菌， 拉丁名为Bacillus   tropicus， 编号为LHLJW.A06的菌种所分泌出来的， 该菌种已保藏于广东省微生物菌种保藏 中心， 保藏编号为GDMCC  NO.62150， 保藏日期为2021年12月21日， 保藏单位地址为广州市先 烈中路10 0号大院59号楼5楼， 广东省科 学院微生物研究所， 邮政编码510 070；说　明　书 1/4 页 3 CN 115181770 A 3