(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211016602.7 (22)申请日 2022.08.24 (71)申请人 青海省地方病预防控制所 地址 810000 青海省西宁市城中区新城南 路81号 申请人 青海省动物疫病预防控制中心 (72)发明人 谢辉　王谢忠　赵元博　张立成　 米宝玉　拉华　游潇倩　刘蓉菁　 张晓英　巴特　 (74)专利代理 机构 北京惠科 金知识产权代理有 限公司 1 1981 专利代理师 瞿晓晶 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12Q 1/04(2006.01)C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种选择敏感培养基对腐败材料检测鼠疫 耶尔森氏菌 检测的应用效果 (57)摘要 本发明提供了一种选择敏感培养基对腐败 材料检测鼠疫耶尔森氏菌检测的应用效果， 属于 鼠疫菌分离培养技术领域。 本发 明提供的从腐败 材料中分离培养鼠疫耶尔森菌的培养基， 包括如 下原料： 0.1％溶血赫氏培养基、 十二烷基硫酸 钠、 红霉素、 胆盐、 阿莫西林、 甘露醇和中性红。 本 发明培养基中性红指示剂在酸性环境中产生红 色集团附着于菌落上， 使鼠疫菌菌落显示红色， 对变形杆菌、 大肠杆菌和革兰氏阳性菌抑制作用 强， 适用于检验腐败和杂菌污染的动物材料， 具 有高特异性和强敏感性， 培养24h鼠疫菌发育为 典型成熟菌落。 而且生长的鼠疫菌菌落典型， 易 于挑选， 在野外材 料鼠疫菌分离有实际意 义。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 115261280 A 2022.11.01 CN 115261280 A 1.一种从腐败材料中分离培养鼠疫耶尔森菌的培养基， 其特征在于， 所述培养基包括 如下原料： 0.1％溶血赫氏培养基、 十二烷基硫酸钠、 红霉素、 胆盐、 阿莫西林、 甘露醇和中性 红。 2.根据权利要求1所述的培 养基， 其特 征在于， 所述胆盐为胆盐3号。 3.根据权利要求1所述的培养基， 其特征在于， 所述0.1％溶血赫氏培养基由牛肉消化 液、 水、 蛋白胨、 赫氏琼脂、 乳糖和脱纤维兔血组成， 上述各原料的体积重量比为200ml： 800ml： 8‑10g： 13‑14g： 10‑11g： 0.1‑0.2ml。 4.根据权利要求1所述的培养基， 其特征在于， 所述培养基 中0.1％溶血赫氏培养基、 十 二烷基硫酸钠、 红霉素、 胆盐、 阿莫西林、 甘露醇和中性红的体积重量比为1000ml： 0.36 ‑ 0.43g： 0.0 004‑0.0005g： 4.7‑5.5g： 0.01 15‑0.0125g： 0.8 ‑1g： 0.02‑0.03g。 5.根据权利要求3所述的培养基， 其特征在于， 所述0.1％溶血赫氏培养基的制备方法 包括如下步骤： 将牛肉消化液、 水、 蛋白胨、 琼脂和乳糖混合后， 调pH为7.2～7.4， 灭菌后冷 却， 加入脱纤维兔溶 血。 6.权利要求1‑5任意一项所述培养基的制备方法， 其特征在于， 包括如 下步骤： 将0.1％ 溶血赫氏培 养基、 十二 烷基硫酸钠、 红霉素、 胆盐、 阿莫西林、 甘露醇和中性红混合即得。 7.权利要求1 ‑5任意一项所述培 养基在分离 培养鼠疫耶尔森菌的应用。 8.权利要求1 ‑5任意一项所述培 养基在从腐败材 料中分离 培养鼠疫耶尔森菌的应用。 9.权利要求1 ‑5任意一项所述培 养基在鼠疫监测中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261280 A 2一种选择敏感培养基对腐败材料检测鼠疫耶尔森氏菌检测的 应用效果 技术领域 [0001]本发明属于鼠疫菌分离培养技术领域， 尤其涉及 一种选择敏感培养基对腐败材料 检测鼠疫耶尔森氏菌检测的应用效果。 背景技术 [0002]在鼠疫疫源地监测中， 当动物鼠疫处于流行末期或静息期时， 由于鼠疫菌毒力减 弱或完全丧失， 不能致动物死亡， 但存在于动物体内。 由于菌量减少， 若按一般常规培养基 分离鼠疫菌比较困难， 因此进行培养时必须要求特别敏感的增菌培养基分离鼠疫菌， 而且 自然界鼠疫菌一般从自毙动物体内分离， 由于自毙动物腐败， 从一个污染的材料中分离鼠 疫耶尔森菌(鼠疫菌)， 受变形杆菌、 革兰氏阳性菌的影响， 鼠疫菌分离困难。 因此研制一种 能够从腐败材料中分离鼠疫耶尔森菌的选择培养基， 能够提高鼠疫菌的分离率， 是野外鼠 疫监测现场及实验室研究的关键技术。 现有鼠疫菌的选择培养基主要有龙胆紫培养基， 在 实际工作中， 龙胆紫培养基分离污染(腐败)材料中的鼠疫菌效果不理想。 本领域亟需提供 一种能够很好的从腐败材 料中分离鼠疫耶尔森菌的培 养基。 发明内容 [0003]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一种特异性高、 敏感性强的能够很好的从腐败 材料中分离鼠疫耶尔森菌的培 养基。 [0004]为了实现上述发明目的， 本发明提供了以下技 术方案： [0005]本发明提供了一种从腐败材料中分离培养鼠疫耶尔森菌的培养基， 所述培养基包 括如下原料： 0.1％溶血赫氏培养基、 十二烷基硫酸钠、 红霉素、 胆盐、 阿莫西林、 甘露醇和中 性红。 [0006]优选的， 所述胆盐为胆盐3号。 [0007]优选的， 所述0.1％溶血赫氏培养基由牛肉消化液、 水、 蛋白胨、 赫氏琼脂、 乳糖和 脱纤维兔血组成， 上述各原料的体积重量比为200ml： 800ml： 8 ‑10g： 13‑14g： 10‑11g： 0.1‑ 0.2ml。 [0008]优选的， 所述培养基中0.1％溶血赫氏培养基、 十二烷基硫酸钠、 红霉素、 胆盐、 阿 莫西林、 甘露醇和中性红的体积重量比为1000ml： 0.36 ‑0.43g： 0.0004 ‑0.0005g： 4.7 ‑5.5g： 0.0115‑0.0125g： 0.8 ‑1g： 0.02‑0.03g。 [0009]优选的， 所述0.1％溶血赫氏培养基的制备方法包括如下步骤： 将牛肉消化液、 水、 蛋白胨、 琼脂和乳糖混合后， 调pH为7.2 ～7.4， 灭菌后冷却， 加入脱纤维兔溶 血。 [0010]本发明还提供了一种上述培养基的制备方法， 包括如下步骤： 将0.1％溶血赫氏培 养基、 十二 烷基硫酸钠、 红霉素、 胆盐、 阿莫西林、 甘露醇和中性红混合即得。 [0011]本发明还提供了一种上述培 养基在分离 培养鼠疫耶尔森菌的应用 [0012]本发明还提供了一种上述培 养基在从腐败材 料中分离 培养鼠疫耶尔森菌的应用。说　明　书 1/6 页 3 CN 115261280 A 3