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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211036975.0 (22)申请日 2022.08.24 (71)申请人 山东博科生物产业有限公司 地址 250200 山东省济南市章 丘区明水 经 济开发区(经十东路与明埠路交界山 东博科产业园) (72)发明人 卢志明 姜琳 谢清华 胡晓飞  董雯  (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/04(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种选择性幽门螺旋杆菌培养基及其制备 方法 (57)摘要 本发明公开了一种选择性培养幽门螺旋杆 菌培养基, 涉及微生物培养技术。 以水溶性壳聚 糖作为主要碳源, 添加抑菌剂在不影 响幽门螺旋 杆菌的基础上, 抑制大多数真菌、 革兰氏阳性菌 和革兰氏阴性菌的生长; 以丙酮酸钠作为辅助提 高幽门螺旋杆菌的生长和耐气性, 中和氧气的毒 性作用和抗生素的抑制作用, 从而增强幽门螺旋 杆菌的分离, 同时提供一部分碳源; 无菌冻融脱 纤维羊血提供丰富的营养物质供幽门螺旋杆菌 的生长, 实现了促使幽门螺旋杆菌快速繁殖的同 时, 又能够避免杂菌感染。 本发明具有高度选择 性、 生长率高等优点, 可应用于临床、 环境中对幽 门螺旋杆菌的检测。 权利要求书2页 说明书10页 CN 115369061 A 2022.11.22 CN 115369061 A 1.一种选择性幽门螺旋杆菌培养基, 其特征在于, 所述选择性幽门螺旋杆菌培养基包 括如下含量的成分: 2.根据权利要求1所述的一种选择性幽门螺旋杆菌培养基, 其特征在于, 所述选择性幽 门螺旋杆菌培养基包括如下含量的成分: 3.根据权利要求1或2所述的一种选择性幽门螺旋杆菌培养基, 其特征在于, 所述水溶权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 115369061 A 2性壳聚糖包括壳聚糖、 Ca2+; 所述水溶性壳聚糖的制备方法为: 壳聚糖于 乙酸溶液中溶解, 50~60℃下加入20%~ 25%(体积)H2O2解聚30~60min, 再加入70%(体积)乙醇, 静置沉淀, 离心去上清, 烘干, 得到 沉淀, 将沉淀溶于水, 加入饱和氯化钙络合, 搅拌, 得到水 溶性壳聚糖。 4.根据权利要求1或2所述的一种选择性幽门螺旋杆菌培养基, 其特征在于, 所述水溶 性壳聚糖的制备方法为: 壳聚糖于乙酸溶液中溶解, 50~60℃下加入20%~25%(体积)H2O2 解聚至壳聚糖粘度≤100Pa ·s, 再加入 70%(体积)乙醇, 静置沉淀, 离心去上清, 烘干, 得到 沉淀, 将沉淀溶于水, 20~3 0℃下加入饱和氯化钙络合, 搅拌15mi n, 得到水 溶性壳聚糖。 5.根据权利要求1或2所述的一种选择性幽门螺旋杆菌培养基, 其特征在于, 所述抑菌 剂为万古霉素、 头孢磺啶、 两性霉素B、 甲氧苄啶和硫酸多粘菌素B中的至少一种。 6.根据权利要求1或2所述的一种选择性幽门螺旋杆菌培养基, 其特征在于, 所述选择 性幽门螺 旋杆菌培养基pH为7.0~7.5 。 7.一种权利要求1所述的选择性幽门螺旋杆菌培养基的制备方法, 其特征在于, 包括如 下步骤: (1)将抑菌剂溶于水混合中, 加热灭菌或紫外照射灭菌, 得到抑菌剂溶 液; (2)取玉米淀粉溶于水中, 依次加入牛心浸粉、 酵母浸粉、 氯化钠、 胰酶消化酪蛋白胨混 合, 加热溶解, 调整pH, 灭菌; (3)灭菌后, 加入琼脂, 加入无菌冻融脱纤维羊血, 冷却, 再加入(1)中抑菌剂溶液, 冷 却, 加入水 溶性壳聚糖, 混合均匀, 得到 选择性幽门螺 旋杆菌培养基。 8.根据权利要求7所述的制备方法, 其特征在于, (3)中, 所述无菌冻融脱纤维羊血的制 备方法为: 冻融脱纤维羊血121℃, 20min灭菌后, 放置到45~55℃, 得到无菌冻融脱纤维羊 血。 9.权利要求1所述的水 溶性壳聚糖作为幽门螺 旋杆菌培养基中碳源和/或氮源的应用。权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 115369061 A 3

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