(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210724465.6 (22)申请日 2022.06.24 (71)申请人 洪艳萍 地址 116000 辽宁省大连市高新园区高能 街128号 (72)发明人 洪艳萍　 (74)专利代理 机构 沈阳天赢专利代理有限公司 21251 专利代理师 孙万玲 (51)Int.Cl. A61K 36/064(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A61P 31/10(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12N 1/20(2006.01)A61K 35/747(2015.01) C12R 1/84(2006.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一种足部抑菌去脚气组合物及其制备方法 (57)摘要 本发明涉及微生物工程技术领域， 具体是一 种足部抑菌去脚气组合物及其制备方法。 组合物 由生物发酵液、 植物蛋白、 卡拉胶、 海藻糖、 天冬 氨酸、 苏氨酸、 谷氨酸构成。 各组分除生物发酵液 以外的含量比分别为： 0.01 ‑0.1％植物蛋白、 0.01‑0.5％卡拉胶、 0.01 ‑0.2％海藻糖、 0.01 ‑ 0.2％天冬氨酸、 0.01 ‑0.2％苏氨酸、 0.01 ‑0.2％ 谷氨酸。 对 人体致病真菌红色毛癣菌具有显著的 抑制作用， 而且原料成本较低、 效果明显、 作用温 和， 规避了对温和处理脚气问题具有较好的应用 价值。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115025136 A 2022.09.09 CN 115025136 A 1.一种足部抑菌去脚气组合物， 其特征在于： 所述组合物由生物发酵液、 植物蛋白、 卡 拉胶、 海藻糖、 天 冬氨酸、 苏氨酸、 谷氨酸构成。 2.根据权利要求1所述的一种足部抑菌去脚气组合物， 其特征在于： 所述生物发酵液是 由库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia  kudriavzevil)与副干酪乳杆菌(Lactobacillus   paracasei)两种菌发酵而成。 3.根据权利要求1所述的一种足部抑菌去脚气组合物， 其特征在于： 所述组合物中， 各 组分除生物发酵液以外的含量比分别为： 0.01 ‑0.1％植物蛋 白、 0.01‑0.5％卡拉胶、 0.01 ‑ 0.2％海藻糖、 0.01 ‑0.2％天冬氨酸、 0.01 ‑0.2％苏氨酸、 0.01 ‑0.2％谷氨酸。 4.根据权利要求1所述的一种足部抑菌去脚气组合物的制备方法， 其特征在于： 包括以 下步骤： (1)生物发酵 液的制备 ①种子液的培 养 将所述库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia  kudriavzevil)接种于YPD液体培养基中， 30 ℃， 摇床160rpm培养18 ‑30h， 得到种子液A； 所述YPD液体培养基配方如下： 胰蛋 白胨1‑2％， 酵母浸粉1‑2％， 葡萄糖1 ‑2％， 余量为水； 将所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus  paracasei)接种于MRS液体培养基中， 37℃静止 培养20‑28h， 得到种子液B； 所述的MRS液体培养基配方如下： 胰蛋白胨1％， 酵母浸粉0.5 ‑ 1％， 葡萄糖1 ‑2％， 牛肉蛋白胨1 ‑2％， 吐温 ‑80 1‑2％， 磷酸氢二钾0.2 ‑1％， 结晶乙酸钠 0.5‑1％， 柠檬酸三铵0.2 ‑1％， 硫酸镁0.02 ‑0.1％， 硫酸锰0.005 ‑0.01％， 余量为水， pH6.5 ‑ 7.0； ②混合培养 将步骤①得到的种子液A和种子液B进行混合， 两种种子液的体积比例为2 ‑4:1‑3， 再将 其移种至500mL锥形瓶中， 用混合培养基继续培养。 所述混合培养基组成为： 酵母提取物 2％‑3％， 胰蛋白胨2％ ‑3％， 葡萄糖2％ ‑3％， 余量为水， pH6.5‑7.0。 所述的混合培养条件为： 混合种子液的总接种量为5 ‑10％； 培养方式为： 前18至24小时 温度为28 ‑32℃， 转速100 ‑200rpm； 之后继续培养24小时， 温度为36 ‑38℃， 转速45 ‑55rpm， 混 合培养结束即制得复合发酵 液； ③工作用生物发酵 液制备 将步骤②中所得复合发酵液先在2 ‑8℃， 2000 ‑5000rpm条件下离心15 ‑30min， 弃去沉 淀， 将上清液再在2 ‑8℃， 5000 ‑10000rpm条件下离心15 ‑30min， 弃去沉淀， 将上清液体收集 到透明丝口瓶中。 将丝口瓶的上清液转移到抽滤机中， 抽滤机上样孔中用0.22 μm规格的滤 膜， 在0.1 ‑0.5MPa压力下进行抽滤， 用烧杯接住抽滤 液， 此即是工作用生物发酵 液； (2)抑菌复合液制备 用量筒称取1L(1)中所述工作用生物发酵液， 按照0.01 ‑0.1％植物蛋白、 0.01 ‑0.5％卡 拉胶、 0.01 ‑0.2％海藻糖、 0.01 ‑0.2％天冬氨酸、 0.01 ‑0.2％苏氨酸、 0.01 ‑0.2％谷氨酸的 配方比例， 分别称取对应组分， 然后添加到工作用生物发酵液中， 在18 ‑26℃条件下， 用20 ‑ 50rpm转速搅拌子搅拌溶解2 ‑4h， 此即为抑菌复合液。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115025136 A 2一种足部抑菌 去脚气组合物及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物工程技术领域， 具体是一种足部抑菌去脚气组合物及其制备方 法。 背景技术 [0002]现阶段， 脚气问题在社会中已经屡见不鲜， 脚气 通常表现出 “干、 痒、 臭 ”三个特征。 这是由于足部皮肤中的角质层异常丰富并且含有大量角蛋白， 同时含大量的汗腺， 但皮脂 腺的分布却远低于其他皮肤， 由于足部通风散热环境较差， 汗腺分泌的大量汗液无法及时 散去， 皮脂腺较少而无法产生足够的脂肪酸抑制细菌和真菌的生长， 再加上足部大量的角 质层蛋白以及极易使足部细菌和真菌过度滋生， 细菌大量繁殖并分解角质蛋白， 再混合汗 液中的尿素、 乳酸便会产生难闻的臭味， 即脚臭。 脚干主要 是因为角质细胞过厚， 水分不 足， 脚痒主要 是癣菌活动刺激了脚部神经。 目前， 足部的常见致病微生物多为真菌类癣菌， 常见 的菌落为红色毛癣菌、 丝状毛癣菌等， 还有部分的细菌如金黄色葡萄球菌等。 [0003]现阶段， 市面上销售的处理足部问题的产品多以化学抑菌物质为主， 且多为消字 号的杀菌剂， 其主要原理有以下方面： 第一， 破坏足部菌落细胞壁， 导致菌落无法生存， 但该 类杀菌产品的刺激性通常较大。 第二， 干粉类物质(如滑石粉)能够有效的吸收足部分泌的 汗液， 通过将汗液及时中和吸收， 降低足部的湿滑感和黏腻感， 改变局部环境， 从源头上导 致菌落没有水分无法生长， 但是该类物质因使用复杂， 难以携带， 持续效果差反响不佳， 且 因滑石粉等物质粒度较小， 很容易堵塞毛孔， 导致炎症。 第三， 通过加快皮肤细胞的代谢， 加 快角质层细胞脱落， 进而整体去除菌落， 这类原料主要有水杨酸， 亚油酸等， 但酸类物质的 刺激性和对皮肤的破坏较大， 使人们在使用时心存 畏惧。 [0004]针对以上市售产品功能单一、 效果不显著、 副作用大等缺点， 难以满足当前市场对 足部问题改善的需求， 鉴于此， 该项目以生物发酵技术为主导， 通过复合配制做成足部抑菌 复合液， 以作用温和， 安全有效， 多靶点 等特性来弥补市场产品的空白。 发明内容 [0005]为解决上述问题， 即解决上述背景技术提出的问题， 本发明提出了一种 足部抑菌 去脚气组合物及其制备 方法， 技术方案如下： [0006](1)生物发酵 液的制备 [0007]①种子液的培 养 [0008]将所述库德 里阿兹威毕赤酵母(Pichia  kudriavzevil)接种于YPD液体培养基中， 30℃， 摇床160rpm培养18 ‑30h， 得到种子液A； 所述YPD液体培养基配方如下： 胰蛋白胨1 ‑ 2％， 酵母 浸粉1‑2％， 葡萄糖1 ‑2％， 余量为水； [0009]将所述副干酪乳杆菌(Lactobacillus  paracasei)接种于MRS液体培养基中， 37   ℃静止培养20 ‑28h， 得到种子液B； 所述的MRS液体培养基配方如下： 胰蛋白胨1％， 酵母浸粉 0.5‑1％， 葡萄糖1 ‑2％， 牛肉蛋白胨1 ‑2％， 吐温 ‑80 1‑2％， 磷酸氢二钾0.2 ‑1％， 结晶乙酸说　明　书 1/5 页 3 CN 115025136 A 3