(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210939485.5 (22)申请日 2022.08.05 (71)申请人 皖南医学院第一附属医院 （皖南医 学院弋矶山医院） 地址 241000 安徽省芜湖市赭 山西路2号 (72)发明人 徐振宇　钱学艺　伍耀　邵慧敏　 何连君　何伟杰　 (74)专利代理 机构 南京群迈知识产权代理有限 公司 32690 专利代理师 安士影 (51)Int.Cl. A61K 35/741(2015.01) A61K 31/702(2006.01) A61K 31/733(2006.01) A61P 1/04(2006.01)A61P 29/00(2006.01) C12N 1/02(2006.01) C12N 1/04(2006.01) C12N 1/20(2006.01) (54)发明名称 一种调节溃疡性结肠炎肠道菌群的组合物 及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种调节溃疡性结肠炎肠道 菌群的组合物， 包括体积比为1:1的粪便菌液和 10wt%的益生元复合物溶液， 所述益生元复合物 包括重量份数比为 （1 ‑10） ： （1‑10） ： （1‑10） ： （1‑ 10） 的低聚半乳糖、 低聚果糖、 菊粉和大豆低聚 糖。 本发明还公开了一种调节 溃疡性结肠炎肠道 菌群的组合物的制备方法及其应用。 本发明通过 粪便菌群与益生元复合物的联合使用， 具有协同 增效的作用； 小鼠实验显示， 调节溃疡性结肠炎 肠道菌群的组合物显著改善溃疡性结肠炎肠道 菌群结构， 并显著改善肠道， 增加肠道菌群丰富 度和多样性， 并且缓解溃疡性结肠炎造成的黏膜 损伤。 权利要求书2页 说明书10页 附图4页 CN 115177642 A 2022.10.14 CN 115177642 A 1.一种调节溃疡性结肠炎肠道菌群的组合物， 其特征在于， 包括体积比为1:1的粪便菌 液和10wt%的益生元复合物溶液， 所述益生元复合物包括重量份数比为 （1 ‑10） ： （1‑10） ： （1‑ 10） ： （1‑10） 的低聚半乳糖、 低聚果糖、 菊粉和大豆低聚糖。 2.根据权利要求1所述的一种调节溃疡性结肠炎肠道菌群的组合物的制备方法， 其特 征在于， 在厌氧环境下制备， 具体包括以下步骤： 步骤一， 粪便收集： 选择健康人作为供体， 使用粪便收集盒收集5 0‑150g粪便； 步骤二， 粪便重悬： 将步骤一中粪便按照质量比1： （2 ‑5） 添加到保护剂中， 以100 ‑500 转/分钟速度进行搅拌1 ‑20分钟， 得到粪便悬 液； 步骤三， 粪便过滤： 将步骤二中粪便悬液传递入厌氧工作台中， 分别经过10目、 18目、 30 目、 35目筛网进行 逐级过滤， 最终收集过 滤后的菌液； 步骤四， 制备粪菌沉淀： 将步骤三中收集的菌液以2000 ‑5000转/分钟速度离心10 ‑15 分， 进行粪菌富 集， 获得粪菌沉淀； 步骤五， 离心和洗涤： 在步骤四中收集的粪菌沉淀 中加入保护剂， 保护剂的加入量为粪 便质量的2 ‑5倍， 混合均匀后， 以2000 ‑5000转/分钟速度离心10 ‑15分， 重复2~5次， 收集菌 泥； 步骤六， 粪便菌液的制备： 将步骤五获得的菌泥加入保护剂中， 保护剂的加入量为粪便 质量的2‑5倍， 混合重悬获得粪便 菌液； 步骤七， 10wt%的益生元复合物溶液的制备： 取低聚半乳糖、 低聚果糖、 菊粉和大豆低聚 糖共10g， 添加无菌水至10 0mL， 充分溶解后， 配置成10%的水 溶液， 经0.2 2µm滤膜过滤除菌； 步骤八， 取等体积的步骤六的粪便菌液和步骤七 的10wt%的益生元复合物溶液， 混匀， 即得调节溃疡性结肠炎肠道菌群的组合物。 3.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述保护剂包括以下重量份的组分： 低聚果糖1 ‑10份； 低聚半乳糖1 ‑10份； 维生素C  0.1‑0.5份； 10%醋酸钠1 ‑5份； 甘油1 ‑10份和 0.9%NaCl 60‑100份。 4.根据权利要求3所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述保护剂的制法包括以下步骤： S01， 量取50%的0.9%NaCl， 灌入到烧杯中， 然后按照重量配比称取低聚果糖， 加入到烧 杯中， 缓慢搅拌直至低聚果糖完全溶解， 得A溶 液； S02， 称取低聚半乳糖， 加入到A溶 液中， 缓慢搅拌直至低聚半乳糖完全溶解， 得B溶 液； S03， 称取维生素C， 加入到B溶 液中， 缓慢搅拌直至维生素C 完全溶解， 得C溶 液； S04， 量取10%醋酸钠， 加入到 C溶液中， 缓慢搅拌均匀， 得D溶 液； S05， 量取甘油， 加入到D溶 液中， 缓慢搅拌， 得E溶 液； S06， 将剩余0.9%NaCl添加到E溶液中， 缓慢搅拌均匀， 所得溶液经过0.22 µm滤膜过滤， 即得。 5.根据权利要求 4所述的制备 方法， 其特 征在于， 所述缓慢搅拌的速度为6 0转/分钟。 6.根据权利 要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述健康人的定义为： 年龄在18 ‑25岁 年轻男性或女性在读大学生， 最近3个月内未发生肠道疾病且无性活动， 无新冠疫情感染 者。 7.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述厌氧环境的氧气浓度控制在0 ‑ 10%。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115177642 A 28.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤六获得的粪便菌液在 室温有氧环 境条件下， 活菌数量大于8.0 ×109cfu/mL。 9.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤六获得的粪便菌液在厌氧条件 下， 活菌数量大于19.0 ×1010cfu/mL。 10.根据权利要求1所述的一种调节溃疡性结肠炎肠道菌群的组合物在制备治疗溃疡 性结肠炎药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115177642 A 3