(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210777205.5 (22)申请日 2022.06.30 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 2021 1350 2021.1 1.01 (71)申请人 浙江隆木环保科技有限公司 地址 315100 浙江省宁波市 鄞州区浙江创 新中心4号楼15F 申请人 庆阳陇沣海绵城市 建设管理运营有 限责任公司 　 西北农林科技大 学 (72)发明人 李丹萍　刘永德　刘海　陈春磊　 张彦雄　郝新伟　沈锡辉　毛婷婷　 (74)专利代理 机构 杭州斯可 睿专利事务所有限 公司 33241 专利代理师 林天哲(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/36(2006.01) C12N 1/02(2006.01) C05F 11/08(2006.01) C05G 3/00(2020.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种解磷菌及其在盐碱地的应用 (57)摘要 本发明公开了一株解磷菌在盐碱地中的应 用。 该菌分离自甘肃省 庆阳市小崆峒沟盐碱土壤 中， 经鉴定为Mixta  theicola， 命名为米克斯塔 菌N1， 该菌保藏单位为： 中国典型培养物保藏中 心 （CCTCC） ， 地址： 中国武汉武汉大学， 保藏日： 2021.11.1， 保藏登记号为： CCTCC  M 20211350。 该菌株能够在低温和较高盐碱环 境中生存， 并且 在低温盐碱环 境中具有较强的解磷能力， 该菌株 在低温盐碱条件 下的解磷特性， 可以有效为盐碱 土壤中植物 生长提供有效的磷， 并且适合应用于 我国寒冷地区广泛分布的盐碱地， 为提高我国寒 冷地区盐碱土壤的磷供给及盐碱地的开发利用 提供了解决办 法。 权利要求书1页 说明书4页 序列表1页 附图4页 CN 115322923 A 2022.11.11 CN 115322923 A 1.一株解磷菌， 其特征在于， 该菌为米克斯塔菌 （Mixta  theicola） N1， 保藏单位为： 中 国典型培养物保藏中心 （CCTCC） ， 地址： 中国武汉武汉大学， 保藏日： 2021.11.1， 保藏登记号 为： CCTCC M 20211350。 2.一种根据权利要求1所述的解磷菌在低温盐碱条件下解无机磷的应用。 3.一种根据权利要求1所述的解磷菌的培养方法， 包括对菌种的驯化分离， 其特征是选 用采自甘肃省庆阳市小崆峒沟的盐碱 土壤中， 具体步骤如下: （1） 驯化富集： 取5g土壤在100ml无菌水中震荡混匀， 吸取5ml土壤溶液加入到NaCl质量 分数为5%， pH值 为9.0的无机磷液体培 养基中， 在15℃条件下， 180  r/min培养6天； （2） 分离纯化： 驯化富集好的菌液采用稀释涂布平板法涂到无机磷琼脂培养基上， 30℃ 倒置培养5天， 挑取产生透明圈的单菌落在无机磷琼脂培养基上划线 纯化， 观察纯化菌株的 解磷圈产生情况， 纯化得到能产生 解磷圈的菌株N1； 所述用于驯化富集上述解磷菌的培养基， 为无机磷液体培养基， 其配方为： 葡萄糖 10.0g， (NH4)2S04 0.5g， KCl  0.3g， NaCl 50.0g， MgS O4·7H20 0.3g , FeS04·7H20 0.03g， MnS04·H2O 0.03g， Ca3(PO4)2 5.0g， 去离 子水1000m1， pH 9.0。 4.根据权利要求2所述的解磷菌在低温盐碱条件下解无机磷的应用， 其特征在是所述 无机磷为Ca3(PO4)2。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115322923 A 2一种解磷菌及其在盐碱地的应用 【技术领域】 [0001]本发明涉及应用微 生物技术领域， 具体涉及一种解磷菌及其在盐碱地的应用。 【技术背景】 [0002]土地的盐碱化使土壤理化性质无法满足作物的生长。 特别是在盐碱地中植物生长 所必须的磷元素主要以正磷酸盐的形式储存在土壤中， 这种形式存在的磷 元素很难被植物 直接吸收利用。 而通过施磷肥来提高土壤磷供给的方式效率不高， 施入到土壤中的磷肥当 季利用率低于25％， 其余全部被固定在土壤中； 所以如何将盐碱地中的无机正磷酸盐中的 磷元素成为植物所需的有效磷的技术研发对盐碱地的作物开垦利用具有十分积极的现实 意义。 [0003]中国专利CN201711267727.6_公开了一种无机解磷菌， 它是一种伯克霍尔德氏菌， 可吸收土壤中的难溶态的无机磷并通过自身的新陈代谢将磷固定在体内， 最后再排出体外 形成可以被植物吸收利用的磷形态， 由此实现有效降解无机磷， 减少磷肥的施用量， 提高磷 肥的利用率。 但是微生物的生长受 限于周围环境条件， 盐碱土壤的高盐碱胁迫下会导致微 生物无法生存或使溶磷微生物的溶磷能力完全丧失， 降低了对盐碱地改良的有效性。 该专 利所提供 的解磷菌也一样， 由于其不抗盐碱， 所以它对盐碱环境的土壤就不能发挥其对无 机磷转换成有效磷的作用。 [0004]解磷微生物在土壤中广泛存在， 它们可以溶解不溶性无机(矿物)磷， 增加土壤不 溶性磷的生物有效性， 供植物使用。 因此， 给盐碱土壤接种耐盐碱性的溶磷微生物进 行盐碱 地改良是一种彻底解决问题的方法， 使之对盐碱地土壤的改良更安全和可持续， 但是自然 界的大部分盐碱地中解磷微生物很少， 这就需要 人为地将其分离培育适合于盐碱地环境生 存的解磷微 生物， 从而再返回盐碱地去改良盐碱地成为 适合植物生长的土壤。 [0005]中国专利202011132508.9公开了一种耐盐碱解磷菌及其应用， 其所述的解磷菌是 巨大芽孢杆菌Bacillus  megaterium， 其公开 资料介绍能够耐受pH值9.5， 5.0％NaCl的盐碱 条件， 在其公开的实施例中表明其在pH值7.5， 1.0％NaCl的盐碱条件下3天后的解磷能力为 158.24mg， 在pH值9.5， 5.0％NaCl的盐碱条件下3天后的解磷能力为105.28mg， 但这种解磷 效果是远远不够满足盐碱地的改良的， 并且该公开的耐盐碱的解磷菌并不耐寒， 从公开资 料介绍可知其最适合的生长环境温度是30℃， 所以在寒冷地区， 该菌的生存能力和其表现 的解磷活性 就会很差， 甚至没有能力， 而我国很大部分的盐碱地都是分布在寒冷地区。 【发明内容】 [0006]本发明的目的是为解决上述技术的不足而提供一种能够耐受低温盐碱环境， 并且 有效发挥解磷能力、 提高土壤可 溶磷含量的解磷菌及其在盐碱地的应用。 [0007]为了实现上述目的， 本发明所提供的解磷米克斯塔菌为米克斯塔菌N1， 拉丁文名 称是： Mixta theicolaN1， 菌株保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)， 地址： 中国武汉 武汉大学， 保藏日： 2021年1 1月1日， 保藏登记号： C CTCC M 20211350。说　明　书 1/4 页 3 CN 115322923 A 3