(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211030814.0 (22)申请日 2022.08.26 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24481 2022.03.07 (71)申请人 甘肃省科 学院生物研究所 地址 730000 甘肃省兰州市城关区定西南 路197号 (72)发明人 刘锦霞　李娜　李晶　丁品　 付麟雲　武建荣　张建军　 (74)专利代理 机构 兰州智和专利代理事务所 (普通合伙) 62201 专利代理师 张英荷 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/02(2006.01)A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01) A01P 1/00(2006.01) A01G 22/05(2018.01) A01G 13/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种解淀粉芽孢杆菌及其在黄瓜病害防控 中的应用 (57)摘要 本 发 明 提 供 了 一 株 解 淀 粉 芽 孢 杆 菌 Bacillus  amyloliquefac iens， 于2022年03月07 日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通 微生物中心， 保藏编号为CGMCC  No.24481。 该菌 株耐旱、 繁殖生长快、 在土壤和植株中定殖能力 强， 发酵液活性物质种类丰富， 通过破坏病原菌 细胞壁和细胞膜稳定性、 降低对宿主植物的浸染 能力， 达到抑菌目的。 所述解淀粉芽孢杆菌 Bacillus  amyloliquefaciens 发酵液对黄瓜多 种病原菌有抑制活性， 对其引发黄瓜病害防效 好， 且具有增强植物抗病能力。 权利要求书1页 说明书13页 附图6页 CN 115261282 A 2022.11.01 CN 115261282 A 1.一株解淀粉芽孢杆菌， 该解淀粉芽孢杆菌是2022年3月7 日保藏于中国微生物菌种保 藏管理委员会普通微生物中心的解淀粉芽孢杆菌 Bacillus amyloliquefaciens ， 保藏编号 为CGMCC No.24481。 2.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌， 其特征在于， 所述解淀粉芽孢杆菌在分离纯化 过程中采用的分离纯化培养基配方为： 葡萄糖10 g， 蛋白胨8 g， NaCl 5 g， 牛肉膏5 g， MnSO4·H2O 0.003g， 琼脂粉适 量,蒸馏水定容至10 00 mL， pH 7.0 。 3.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌在黄瓜病害防控中的应用。 4.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌的发酵 液在黄瓜病害防控中的应用。 5.如权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述发酵液制备时的发酵培养基配方为： 牛 肉膏6 g、 酵母膏5 g、 葡萄糖13 g、 蒸馏水定容至1000 mL， pH7.0， 此 发酵培养基促进解淀粉 芽孢杆菌生长 繁殖， 提高了其发酵 液含菌量和抑菌活性。 6.如权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述发酵液中有丙烯酸、 大黄酸、 吡啶基乙 酸、 奎宁酸、 异考布松、 异樱花苷、 黄麻醇苷、 异 紫花前胡内酯、 山柑子碱、 去甲氧基姜黄素和 白头翁素有机酸、 生物碱和抑菌素类发酵液活性物质， 及氨基酸和褪黑素植物抗胁迫化合 物。 7.如权利要求3或4所述的应用， 其特征在于， 所述解淀粉芽孢杆菌在对尖镰孢菌、 胡萝 卜软腐欧文氏菌软腐致病型、 大丽轮枝菌、 立枯丝核菌、 单囊壳孢、 霜霉菌及丁香假单胞菌 和黄假单胞菌中一种或任两种及以上引发的黄瓜枯萎病、 腐烂病、 黄萎病、 丝核茎基腐病、 白粉病、 霜霉病和细菌性褐斑病防控中的应用。 8.如权利要求3或4所述的应用， 其特征在于， 所述解淀粉芽孢杆菌在提高植物抗病原 浸染能力和抗逆境胁迫能力中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261282 A 2一种解淀 粉芽孢杆菌及其在黄瓜病害防控中的应用 技术领域 [0001]本发明属于植物 保护技术领域， 具体涉及 一种生防解淀粉芽孢杆菌及 其在黄瓜病 害防控中的应用。 背景技术 [0002]黄瓜属葫芦科植物， 在全国各地被广 泛种植， 是人们餐桌常见菜肴之一， 是市场上 的畅销蔬菜产品， 为了满足巨大的市场需求， 黄瓜种植已经实现了周年连续生产供应， 主要 有露地栽培和设施栽培， 由于黄瓜植株不像西红柿、 辣椒等自身有 特殊气味抵抗生物侵害， 无论哪种栽培方式黄瓜均是最容易受到病害侵犯的蔬菜品种， 加之连作障碍使得黄瓜成为 蔬菜病害发生重灾区。 常见的黄瓜病害主要有霜 霉病、 白粉病、 灰霉病、 枯萎病、 黑星病， 腐 烂病、 黄萎病、 丝核茎基腐病等病害， 主要通过土壤传播危害， 苗期、 成株期均可发病。 这些 病害的危害来势 猛， 病害重， 传播快， 如不及时防治， 将给黄瓜生产造成毁灭性的损失， 在流 行年份受害地块黄瓜减产 20%～30%， 严重流行时损失达50%～60%， 甚至绝收。 目前的防治 方 法主要为嫁接栽培防治、 轮作防治和化学农药防治， 国内外还有利用生态防治、 物理防治、 生物防治等多种防治方法缓解化学农药防治 带来的潜在危害， 其中生物防治 尤其生防微生 物以其生态友好、 对 人畜环境安全、 无残留等优点成为目前的研究热点， 但实际生产中可用 于黄瓜病害防控的生防菌及其制剂 很少， 远远不能满足防控应用需求。 因此， 本发 明从具有 杀虫抑菌活性的农药资源植物中分离高活性高抗逆生防菌种， 为黄瓜病害生物防控提供基 础物质和技 术支撑。 发明内容 [0003]本发明的第一个目的是提供一株解淀粉芽孢杆菌， 该解淀粉芽孢杆菌具有耐盐 碱、 在黄瓜根茎叶及其根围土壤能稳定定殖且定殖能力强， 通过提高病原菌脂质过氧化水 平， 破坏病原菌细胞膜稳定性， 达 到抑菌防病的目的。 [0004]上述解淀粉芽孢杆菌是2022年3月7日保藏于位于北京市朝阳区北辰西路1号院3 号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的解淀粉芽孢杆菌 Bacillus   amyloliquefaciens ， 保藏编号 为CGMCC No.24481。 [0005]所述解淀粉芽孢杆菌 Bacillus  amyloliquefaciens 是从甘肃省玛曲县高海拔草 场的毒杂草黄帚橐吾茎中分离纯化筛选的活性内生菌株BSS ‑142， 经过形态观 察、 生理生化 鉴定 和16S  rDNA分子鉴定最终 确定该菌株为解淀粉芽孢杆菌 Bacillus   amyloliquefaciens 。 [0006]所述解淀粉芽孢杆菌 Bacillus  amyloliquefaciens 在分离纯化过程中采用的分 离纯化培养基配方为： 葡萄糖10  g， 蛋白胨8  g， NaCl 5  g， 牛肉膏5  g， MnSO4·H2O 0.003g， 琼脂粉适量,蒸馏水定容至1000  mL， pH 7.0。 该分离纯化培养基有利于解淀粉芽孢杆菌生 长富集， 提高了分离纯化效率。 [0007]所述解淀粉芽孢杆菌 Bacillus  amyloliquefaciens 耐盐碱， 在NaCL浓度10%～20%说　明　书 1/13 页 3 CN 115261282 A 3