(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210867095.1 (22)申请日 2022.07.21 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.23132 2021.08.09 (71)申请人 北京工商大 学 地址 100000 北京市海淀区阜成路3 3号 (72)发明人 李萌　张永涛　王昌涛　赵净沙　 王冬冬　赵丹　张佳婵　 (74)专利代理 机构 北京维正专利代理有限公司 11508 专利代理师 俞晓博 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 1/04(2006.01) C12N 1/38(2006.01)C12N 1/02(2006.01) A61K 8/99(2017.01) A61Q 19/08(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种解淀粉芽孢杆菌B A-1， 溶胞产物及其制 备方法， 在化妆品中的应用和面霜 (57)摘要 本申请涉及日用化妆品领域， 具体公开了一 种解淀粉芽孢杆菌BA ‑1， 溶胞产物及其制备方 法， 在化妆品中的应用和面霜。 所述解淀粉芽孢 杆菌BA‑1分离自黄酒曲中， 2 021年08月09日保藏 于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心， 保藏编号为CGMCC  No.23132。 利用解淀粉 芽孢杆菌BA ‑1制备溶胞产物， 所述溶胞产物安全 性高， 能够提高体内多种抗氧化物和抗氧化物酶 的数量， 可以分别降低活性氧和过氧化物的数 量， 降低细胞氧化应激损伤的可能性， 能够对细 胞进行有效地保护， 延缓细胞的凋亡和衰老。 将 溶胞产物用于化妆品中， 对人体皮肤无刺激性， 具有补水滋养、 修复屏障和紧致肌肤 等效果。 权利要求书1页 说明书15页 附图12页 CN 115011531 A 2022.09.06 CN 115011531 A 1.一种解淀粉芽孢杆菌BA ‑1， 其特征在于， 分离自黄酒曲中， 2021年08月09日保藏于中 国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心， 保藏编号 为CGMCC No. 23132。 2.一种溶 胞产物的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤， （1） 菌种活化： 将权利要求1所述 解淀粉芽孢杆菌BA ‑1进行活化， 制得活化菌种； （2） 菌种纯化： 将所述活化菌种梯度稀释铺板， 获得 单菌落菌种； （3） 菌种扩培： 将所述单菌落菌种接种在 液体培养基中， 培养至OD值为 （0.5 ‑1.0） ， 获得 种子液； （4） 接菌和摇菌： 将所述种子液接种于液体培 养基中发酵， 获得发酵 液； （5） 离心： 将所述发酵 液进行离心处 理， 获得菌泥； （6） 破碎： 将所述菌泥加入无菌水配制成菌液， 利用细胞超声破碎仪进行破碎， 将破碎 后的菌液加热， 离心后收集上清液， 即得 溶胞产物。 3.根据权利要求2所述溶胞产物的制备方法， 其特征在于， 所述液体培养基包括葡萄糖 10.0 g/L、 磷酸钙5.0  g/L、 硫酸铵0.5  g/L、 氯化钾0.2  g/L、 七水硫酸镁0.1  g/L、 硫酸锰 0.0001 g/L、 硫酸亚铁0.0001  g/L和酵母提取物0.5  g/L， pH值7.0 ±0.2， 120℃灭菌30分 钟。 4.根据权利要求2所述溶胞产物的制备方法， 其特征在于， 所述菌种活化、 所述菌种纯 化、 所述菌种扩培和所述发酵的温度均为28℃。 5.一种溶胞产物， 特征在于， 通过权利要求2 ‑4任一项所述溶胞产物的制备方法制备获 得。 6.根据权利要求5所述溶 胞产物， 其特 征在于， 所述溶 胞产物的浓度为0.31 ‑5%。 7.根据权利要求5所述溶 胞产物， 其特 征在于， 所述溶 胞产物的浓度为0.31 ‑2.5%。 8.一种如权利要求5 ‑7任一项所述溶 胞产物在化妆品中的应用。 9.一种面霜， 其特 征在于， 包括权利要求5所述的溶 胞产物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115011531 A 2一种解淀 粉芽孢杆菌 BA‑1， 溶胞产物及其制备方 法， 在化妆品 中的应用和面霜 技术领域 [0001]本申请涉及日用化妆品领域， 更具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌BA ‑1， 溶胞产物及 其制备方法， 在化妆品中的应用和面霜。 背景技术 [0002]皮肤衰老是人们持续关注的问题， 除自然衰老外， 外界的刺激会引起皮肤产生氧 化应激， 加快皮肤的衰老， 如长波紫外线UVA的照射是导致皮肤衰老的一个关键因素。 经过 长波紫外线UVA的照射后会导致皮肤变黑、 皱纹增多、 弹性下降等诸多问题。 在人体中， Nrf2/Keap1和TGF ‑β /samds是分别调控抗氧化应酶和胶原蛋白相关基因转录表达的信号通 路。 因此， 通过调控Nrf2/Keap1和TGF ‑β /smads信号通路的传导是缓解皮肤衰老的重要途 径。 [0003]在延缓皮肤衰老问题上， 主要利用的是植物资源中的提取物。 近年来， 有益菌的代 谢活性分子引起了人们的关注， 如抗菌肽、 抗氧化肽、 抗氧化酶和多糖类等。 有益菌的代谢 活性分子具有一定的延缓皮肤衰老的作用， 而微生物活性物质的开 发利用相比于植物资源 的利用具有更好的应用前 景和更低的成本 。 [0004]解淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens)是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性 很高的细菌， 其内富含活性物质， 对人畜无毒无害。 在解淀粉芽孢杆菌生长过程中， 能够代 谢生成多种抗菌素和 抗氧化酶， 具有广泛地抑菌活性， 并在一定程度上抑制病原体生物膜 的生成。 解淀粉芽孢杆菌在农业、 畜牧业以及日用工业中的应用较广， 但是， 在化妆品方面 的研究应用中未有涉及。 发明内容 [0005]为了提高皮肤抵抗紫外线引起的氧化应激的能力， 本申请提供了一种解淀粉芽孢 杆菌BA‑1， 溶胞产物及其制备 方法， 在化妆品中的应用和面霜。 [0006]第一方面， 本申请提供了一种解淀粉芽孢杆菌BA ‑1， 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus   amyloliquefaciens)分离自黄酒曲中， 2021年08月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物 中心(简称CGMCC， 地址为： 北京市朝 阳区北辰西路1号院3号)， 保藏编号为 CGMCC No.23132。 [0007]本申请中， 解淀粉芽孢杆菌BA ‑1的分离培养方法包括以下步骤： (1)取5g黄酒曲接种于100mL  YPD培养基中， 于24 ‑37℃下培养24 ‑48h， 制得菌悬 液； (2)将上述菌悬 液置于80℃水浴中加热20 ‑30min， 以杀死不能形成芽孢的菌体； (3)将加热处理过的菌悬液稀释10‑5‑10‑7， 每个稀释梯度的菌悬液取200 μL加入固 体培养基， 倒置 于50‑60℃培养箱培养24‑48h； (4)挑取形态规则的菌落， 在固体培养基上划线培养， 进行多次反复的分离纯化，说　明　书 1/15 页 3 CN 115011531 A 3