(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210842570.X (22)申请日 2022.07.18 (71)申请人 江南大学 地址 214000 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大 道1800号 (72)发明人 李会　张毅　史劲松　许正宏　 徐建国　张晓梅　徐国强　 (74)专利代理 机构 无锡承果知识产权代理有限 公司 32373 专利代理师 肖昂 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 19/48(2006.01) C12R 1/29(2006.01) (54)发明名称 一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的 固体培养基 (57)摘要 本发明公开了一种西索米星生产用小单孢 菌快速生长的固体培养基， 所述的培养基成分包 括特定的微生物多糖(黄原胶、 结冷胶、 胶质芽孢 杆菌多糖、 环状糊精等)、 葡萄糖、 蛋白胨、 酵母 粉、 DL‑天冬素、 钾盐(磷酸氢二钾、 磷酸二氢钾、 磷酸三钾)、 镁离子(硫酸镁、 氯化镁)、 碳酸钙和 琼脂。 本发 明所述的固体培养基可供小单孢菌快 速生长， 并产生高活力小单孢菌种子。 本发明的 培养基与常用的培养基相比， 成分更加简单， 且 培养时间大大缩短了。 该培养基大大缩短了小单 孢菌种子的培养时间， 降低了西索米星发酵生产 的时间成本， 对西索米星的生产具有极其显著的 经济意义。 权利要求书1页 说明书6页 附图1页 CN 115181703 A 2022.10.14 CN 115181703 A 1.一种西索米星生产用小单孢菌快速生长的固体培养基， 其特征在于， 所述培养基包 括微生物多糖， 所述微生物多糖包括黄原胶、 结冷胶、 胶质芽孢杆菌多糖、 环状糊精其中任 意至少一种。 2.根据权利要求1所述的培养基， 其特征在于， 所述微生物多糖在配置培养基时， 提前 2‑3h溶于水中使其充分的溶解于水中。 3.根据权利要求1所述的培养基， 其特征在于， 所述微生物多糖的分子量为1500 ‑ 2000kDa。 4.根据权利要求1所述的培 养基， 其特 征在于， 所述 微生物多糖的浓度为5 ‑10g/L。 5.根据权利要求1所述的培养基， 其特征在于， 所述培养基还包括DL ‑天冬素、 蛋白胨、 酵母粉。 6.根据权利要求5所述的培养基， 其特征在于， 所述培养基还包括0.1 ‑0.3g/LDL ‑天冬 素、 3‑10g/L蛋白胨、 3 ‑10g/L酵母 粉。 7.根据权利要求1所述的培养基， 其特征在于， 所述培养基还包括磷酸盐、 镁离子盐、 碳 酸钙及琼脂 。 8.根据权利 要求7所述的培养基， 其特征在于， 所述培养基还包括1 ‑3g/L磷酸盐、 1 ‑3g/ L镁离子盐、 1‑3g/L碳酸钙及20g/L 琼脂。 9.根据权利要求7所述的培养基， 其特征在于， 所述磷酸盐包括磷酸氢二钾、 磷酸二氢 钾、 磷酸三钾其中任意至少一种， 所述镁离 子盐包括硫酸镁、 氯化镁其中任意至少一种。 10.一种小单孢菌发酵生产西索米星的方法， 其特征在于， 该方法的固体培养基采用如 权利要求1～ 9任一所述的培 养基。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115181703 A 2一种西索米星生产用小单 孢菌快速生长的固体培养基 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域， 具体涉及一种西索 米星生产用小单孢菌快速生长的 固体培养基。 背景技术 [0002]西索米星(Sisomicin)， 中文别名为西梭霉素、 西苏霉素、 紫苏霉素等， 是一种天然 的氨基糖苷类抗生素， 其生产菌株多为小 单孢菌属。 西索米星的抗菌谱、 药代动力学和毒性 类似于庆大霉素。 但与庆大霉素相比， 西索米星具有较好的保护动物免受致命假单胞菌感 染的能力。 西索米星对假单胞菌的体外活性是庆大霉素或阿米卡星的2 ‑8倍， 与妥布霉素相 似。 在治疗动物感染假单孢菌上， 西索米星的剂量平均比妥布霉素低5倍， 比庆大霉素低3 倍。 西索米星的最低抑制浓度通常为10pg ·ml‑1。 西索米星与多种青霉素具有协同作用， 对 许多假单胞菌具有抗菌作用， 包括对庆大霉素耐药 的菌株。 西索米星和 其他氨基糖苷类药 物之间的交叉抗性程度取决于不同的机制 。 虽然许多具有灭活酶的菌株对西索米星、 庆大 霉素和妥布霉素都有抗性， 但由于西索米星的高固有效价， 它对许多因其不渗透性而对其 他氨基糖苷类产生耐药性的菌株具有活性。 西索米星对约66％的对庆大霉素、 妥布霉素或 阿米卡星耐药 的菌株有活性。 西索米星的人体药理作用与庆大霉素相似， 在临床试验上一 样有效， 在某些情况下甚至更有效， 但西索米星的不良反应率与庆大霉素或妥布霉素 的不 良反应率相当。 在低于庆大霉素的剂量下， 庆大霉素耐药的假单胞菌对西索米星有反应。 此 外， 一些对庆大霉素或妥布霉素无效的感染病已经成功地使用西索米星治疗。 由于西索米 星在体内外均有很高的内在效力， 且具有化学性质稳定、 价格低和抗菌领域广范等优势， 可 能成为治疗敏感菌株引起的严重假单 胞菌感染的首选药物。 [0003]小单孢菌属分类上属于放线菌， 为革兰氏阳性菌。 小单孢菌广泛分布于自然界中， 尤其在富营养的土壤中大量存在。 其形态为纤细的菌丝体， 不存在气生菌丝， 菌丝的孢子梗 上不存在多个孢子。 小单孢菌的次级代谢产物种类丰富且价值较大， 如氨基糖苷类和大环 酰胺类等多种抗生素以及生物碱等具有抗肿瘤活性的化合物。 小 单孢菌除了可以产生新霉 素等抗生素， 还可以产生庆大霉素和西索米星等抗生素。 小单孢菌已经成为新发现的抗生 素的菌种第一 位， 其产生的抗 生素已经超过了一百种。 [0004]目前， 小单孢菌已经在工业上被用于发酵生产西索米星， 常规技术上小单孢菌斜 面生长过程中所使用的培养基主要成分非常复杂， 其主要成分为： 玉米淀粉、 麦芽糖、 酵母 粉、 KNO3、 KH2PO4、 DL‑天冬素、 CaCO3、 MgCl2、 琼脂粉、 麸皮。 但由于其生长比较缓慢且发酵单位 较低， 所以其生产成本相对较高， 因此缩短小单孢菌发酵周期和 提高其发酵单位是降低生 产成本最有效的手段。 发明内容 [0005]发明目的： 为了克服现有技术中存在的不足， 本发明提供一种西索米星生产用小 单孢菌快速生长的固体培养基， 使用添加微生物多糖的固体培养基替代传统斜面培养基作说　明　书 1/6 页 3 CN 115181703 A 3