(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211033651.1 (22)申请日 2022.08.26 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24485 2022.03.07 (71)申请人 甘肃省科 学院生物研究所 地址 730000 甘肃省兰州市城关区定西南 路197号 (72)发明人 李晶　刘锦霞　李娜　丁品　 付麟雲　张建军　武建荣　赵彤　 (74)专利代理 机构 兰州智和专利代理事务所 (普通合伙) 62201 专利代理师 张英荷 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01)A01P 1/00(2006.01) A01P 3/00(2006.01) C12R 1/085(2006.01) (54)发明名称 一种蜡样芽孢杆菌及其在旱作马铃薯病害 防控中的应用 (57)摘要 一株蜡样芽孢杆菌Bacillus  cereus， 于 2022年3月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理 委员会普通微生物中心， 保藏编号为CGMCC   No.24485。 该蜡样芽孢杆菌耐旱、 高度耐盐碱、 耐 较高温度、 其繁殖力强、 发酵液活性物质有多种 细菌素类及有机酸类抑菌物质和植物生长调节 化合物、 与病原菌竞争占位和遏制病原菌细胞膜 蛋白质合 成使得细胞膜严重受损， 从而达到抑菌 的目标。 蜡样芽孢杆菌B AC‑1981发酵菌 液对疮痂 链霉菌、 茄青枯劳尔氏菌、 硫色镰刀菌等多种病 原菌及其引发的旱作马铃薯疮痂病、 青枯病、 干 腐病等病害 有较强抑制活性和防控效果。 权利要求书1页 说明书11页 附图4页 CN 115261283 A 2022.11.01 CN 115261283 A 1.一株蜡样芽孢杆菌， 该蜡样芽孢杆菌是2022年3月7 日保藏于中国微生物菌种保藏管 理委员会 普通微生物中心的蜡样芽孢杆菌 Bacillus cereus ， 保藏编号 为CGMCC No.24485。 2.如权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌， 其特征在于， 所述蜡样芽孢杆菌在 分离纯化过程 中采用的分离纯化培养基配方为： 葡萄糖10 g， 蛋白胨10 g， NaCl 6.5 g， 牛肉膏5 g， MnSO4·H2O 7.5 mg， 琼脂粉适 量， 蒸馏水定容至10 00 mL， pH 7.0 。 3.如权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌在旱作马铃薯病害防控中的应用。 4.如权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌的发酵 液在旱作马铃薯病害防控中的应用。 5.如权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述发酵液制备时的发酵培养基配方为： 牛 肉膏5 g、 酵母膏2 g、 葡萄糖15 g、 蛋白胨 10.0 g、 NaCL6.0 g、 蒸馏水定容至1000 mL， pH7.0。 6.如权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述发酵液的活性物质有异汉 防己甲素、 甲 基丙二酸、 蓖麻油酸、 有机酸类抑菌物质， 吲哚乙酸、 细胞分裂素和氨基酸。 7.如权利要求3或4所述的应用， 其特征在于， 所述蜡样芽孢杆菌的发酵液对疮痂链霉 菌、 茄青枯劳尔氏菌、 胡萝卜软腐欧文氏菌软腐致病 型、 胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐致病型、 丁香假单胞菌致病型、 环腐棒杆菌、 粉痂菌、 尖镰孢菌、 硫色镰刀菌、 茄链格孢菌中一种或任 两种及以上引发的旱作马铃薯疮痂病、 青枯病、 软腐病、 黑胫病、 环腐病、 粉痂病、 枯萎病、 干 腐病和早疫病防控中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115261283 A 2一种蜡样芽孢杆菌及其在旱作 马铃薯病害防控中的应用 技术领域 [0001]本发明属于植物 保护技术领域， 具体涉及 一种蜡样芽孢杆菌及 其在旱作马铃薯病 害防控中的应用。 背景技术 [0002]中国是全世界马铃薯种植面积最大的国家之一， 每年种植马铃薯的面积均超过   500 万 hm2， 占全球种植面积的  1/5 以上， 主产区主要分布在相对干旱的西南山区、 西北、 内蒙古和 东北地区， 是这些地区农村经济发展的特色产业之一， 也是当地农民的主要经济 来源之一， 马铃薯的种植面积已经是1998  年的一倍多， 产量增加了三倍以上。 但是， 随着马 铃薯种植面积的扩大和连作重茬， 马铃薯病 虫害的发生也越来越严重， 目前已知的包括早 疫病、 晚疫病、 黑痣病、 枯萎病、 干腐病 等30 多种真菌病害、 腐烂病、 青枯病等3种细菌病害 和10 多种病毒病害、 蛴螬、 金针虫、 地老虎等7  种地下害虫和  根腐线虫、 腐烂茎线虫等4   种线虫病害。 这些病 虫害都给马铃薯生产带来严重危害， 影响马铃薯产量和品质。 目前， 对 于这些病 虫害的防控主要包括培育抗病品种、 农业措施和 化学防治等， 由于马铃薯抗病品 种培育周期长、 抗病效果不稳定、 品种很少， 农业轮作技术经济效益不能保证， 硫代氨基甲 酸盐类、 苯并咪唑类等杀菌剂、 多菌灵等化学农药防治仍是生产上控制马铃薯病 虫害的主 要技术手段， 但是由于频繁大量使用化学农药， 多 数病虫害逐渐产生了适应性和抗药性， 需 要进一步加大药量才能达到预期的防控效果， 如此一来形成恶性循环， 环境污染、 产品品质 下降和病虫害抗药性成为目前生产上急需解决的问题。 [0003]生物防治是利用生物物种种间和种内的相互关系， 以一种或一类生物控制另一种 或另一类生物以减少危害的措施， 包括调节病原物种群、 保护性排除方法和自身防御等， 是 在农业生态系统中调节寄主植物的微生物环境， 使其利于寄主而不利于病原， 或者是植物 中寄主和病原物互相作用时， 发生有利于寄主而不利于病原菌的影响， 从而达到病害防治 的目的。 生物防治具有不污染环境、 对人畜安全、 靶标不易产生抗药性、 无残留等优点成为 缓解目前马铃薯 生产中病虫害防控难题的有效技术之一。 目前， 用于植病生防的因子很多， 包括拮抗微生物、 抗生素和植物诱导剂等。 国内外研究的生防菌种类较多， 主要包括真菌、 细菌、 放线菌和病毒， 其中木霉菌、 毛壳菌、 酵母菌、 淡紫拟青霉菌、 厚壁孢子轮枝菌及菌根 真菌等生防真菌和枯草芽孢杆菌、 放射性土壤农杆菌和荧光假单胞杆菌等生防细菌， 但由 于自身的天然缺陷， 大多数应用也相对局限。 芽孢杆菌是农业生产中应用相对较多的一种 生防菌， 作为微生态环境的优势种群， 具有繁殖力强， 理化性质稳定， 以及促进植物生长等 优点， 能够满足农药减量控害增效以及绿色农业可持续发展的要求， 但目前应用于生防的 芽孢杆菌的抗逆性相对不够理想， 尤其抗旱耐盐碱能力不足， 导致在旱作农业环境下繁殖 慢、 定殖难从而应用效果不稳定。 而我国的马铃薯绝大对数产区在干旱和半干旱地区， 因 此， 生防微生物的筛选首先要考虑菌种的抗旱、 耐盐、 抗酸碱等抗逆性能， 以及发酵液活性 物质丰度等， 才能保证其应用效果。 本发 明针对旱作马铃薯 生产中病虫害的发生、 危害和防 治现状， 从当地土壤环境分离抗逆高活性 目标功能菌， 克服同属生防菌在寒旱、 干燥、 强紫说　明　书 1/11 页 3 CN 115261283 A 3