(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210856336.2 (22)申请日 2022.07.15 (71)申请人 山东鼎创生物科技有限公司 地址 257092 山东省东营市农业高新 技术 产业示范区中心街19号 (72)发明人 岳国磊　徐兴锋　郝宁宁　 (74)专利代理 机构 北京天驰君泰律师事务所 11592 专利代理师 孟锐 (51)Int.Cl. C05G 3/00(2020.01) C05G 3/60(2020.01) C05G 5/20(2020.01) C05G 3/50(2020.01) C05G 5/10(2020.01)A01G 13/00(2006.01) A01C 21/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/01(2006.01) C12R 1/11(2006.01) (54)发明名称 一种芽孢杆菌 菌肥及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明涉及一种芽孢杆菌菌肥及其制备方 法和应用， 其解决了现有技术中使用农药导致残 留、 使用化肥导致土壤板结的技术问题， 其包括 如下步骤： (1)选择菌种解淀粉芽孢杆菌、 多粘类 芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌； (2)发酵培养： 得到种 子培养液； (3)菌剂复配， 得到液体菌肥或固体菌 剂。 本发明可用于水稻种植专用菌肥的制备领 域。 权利要求书1页 说明书5页 附图1页 CN 115160064 A 2022.10.11 CN 115160064 A 1.一种芽孢杆菌 菌肥的制备 方法， 其特 征是， 包括如下步骤： (1)选择菌种淀粉芽孢杆菌(Bacillus  amyloliquefaciens)、 多粘类芽孢杆菌 (Paenibacillus polymyxa)和巨大芽孢杆菌(Baci llus megaterium)； (2)发酵培养： 将芽孢杆菌菌种接种LB固体培养基活化， 培养； 从LB培养基挑取单菌落， 接种于液体LB培 养基， 摇床培 养； 转接至装有发酵培 养基的发酵 罐， 培养， 得到种子 培养液； 将种子培养液转接至发酵罐， 培养， 解淀粉活菌达到100亿CFU/mL以上， 多粘类芽孢杆 菌、 巨大芽孢杆菌计数达到50亿CFU/mL以上， 同时将发酵液过水浴， 进行芽孢计数， 芽孢形 成率达到90％， 即判定发酵合格； (3)菌剂复配： 将解淀粉芽孢杆菌， 巨大芽孢杆菌和多粘类芽孢杆菌发酵液进行混合， 得到混合发酵液； 混合 发酵液添加黄腐酸钾、 苯甲酸钠， 水溶性硅， 用磷酸调整pH， 得到液体 菌肥； 混合发酵液， 添加糊精、 轻质碳酸钙喷雾干燥后， 分别添加黄腐 酸钾、 十二烷基硫酸钠， 水溶性硅， 混合得到 芽孢杆菌 菌粉全水溶固体菌剂。 2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌菌肥的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(2)中芽孢 杆菌发酵培养基配方及其制备如下： 糖蜜20～30公 斤， 玉米淀粉20～30公斤， 豆粕10～20公 斤， 硫酸镁5公斤， 硫酸锰1～2公斤； 磷酸氢二钾5公斤， 用水定容至1000公斤； pH7.0， 121℃ 灭菌40mi n。 3.根据权利要求1或2所述的方法制得的芽孢杆菌菌肥， 其特征是， 所述步骤(3)中得到 的液体菌肥中， 质量百分数含量分别为黄腐酸钾3 ‰、 苯甲酸钠3 ‰， 水溶性硅3 ‰， 用磷酸调 整pH 5； 活菌数在6 0亿CFU/g以上。 4.根据权利要求1或2所述方法制得的芽孢杆菌菌肥， 其特征在于： 所述步骤(3)中得到 的固体菌肥中， 质量百分数含量为黄腐酸钾3％、 十二烷基硫酸钠3％、 水溶性硅3％， 其余为 干燥后的菌粉； 活菌数在5 00亿CFU/g以上。 5.如权利要求3或4所述的芽孢杆菌菌肥作为水稻种植专用菌肥的应用， 其特征是， 每 亩水稻使用固体粉末菌剂1公 斤加水40公斤液面喷施， 用于防病； 或者每亩使用液体菌肥10 ～20L用于增产， 在秧苗期、 分蘖期和孕穗期分别使用1次随水冲施。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115160064 A 2一种芽孢杆菌 菌肥及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及一种菌肥及其制 备方法和应用， 具体地说， 涉及一种芽孢杆菌菌肥及 其制备方法和应用。 背景技术 [0002]粮食问题永远是关系到我国国计民生的大事。 水稻是我国最重要的粮食作物， 其 播种面积和总产量均居国内粮食作物首位， 我国约60％的人以稻米为主食， 在我国粮食生 产中有举足轻重的地位。 水稻的生长发育需要较多的营养元素， 其生长过程中易受病 虫侵 害， 在获得高产的前提下， 就必须有效地施肥和解病 虫害问题， 才能提高我国的水稻产量。 然而常年过量的化肥和农药的使用， 导致环境的污染、 水稻产量的降低， 已经危及到人类健 康的安全。 为了减少环境污染和健康 安全隐患， 提高化肥利用率和减少农药的使用， 微生物 菌剂在水稻种植中的应用已成为 一个重要的解决手段。 发明内容 [0003]本发明就是为了解决现有技术中使用农药导致残留、 使用化肥导致土壤板结的技 术问题， 提供一种可减少农药的使用和提高化肥利用率的芽孢杆菌菌肥及其制备方法和应 用。 [0004]为此， 本发明提供一种芽孢杆菌菌肥的制备方法， 其特征是， 包括如下步骤： (1)选 择菌种淀粉芽孢杆菌(B acillus amyloliquefaciens)、 多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus   polymyxa)和巨大芽孢杆菌(Bacillus  megaterium)； (2)发酵培养： 将芽孢杆菌菌种接种LB 固体培养基活化， 37℃培养24h； 从LB培养基挑取单菌落， 接种于液体LB培养基， 摇床培养， 220rpm， 37℃培养24h； 转接至装有发酵培养基的200L发酵罐， 37℃培养24h， 得到种 子培养 液。 将种子培养液3％的接种量转接至发酵培养基2吨发酵罐， 控制温度为35℃； 溶氧控制 30％， 转速150rpm， 培养18h左右下罐。 解淀粉活菌达到100亿CFU/mL以上， 多粘类芽孢杆菌、 巨大芽孢杆菌计数达到50亿CFU/mL以上， 同时将发酵液过80℃水浴10min， 进行芽孢计数， 芽孢形成率达到90％， 即判定发酵合格； (3)菌剂复配。 将解淀粉芽孢杆菌， 巨大芽孢杆菌和 多粘类芽孢杆菌发酵液按1:2:2的比例进行混合， 得到 混合发酵液。 混合 发酵液按体积的千 分之三分别添加黄腐酸钾、 苯甲酸钠， 水溶性硅， 用磷酸调整pH  5， 得到液体菌肥； 混合发酵 液， 添加糊精、 轻质碳酸钙喷雾干燥后， 分别添加黄腐酸钾、 十二烷基硫酸钠， 水溶性硅； 混 合得到芽孢杆菌 菌粉全水溶固体菌剂。 [0005]优选的， 所述步骤(2)中芽孢杆菌发酵培养基配方及其制备如下： 糖蜜20～30公 斤， 玉米淀粉20～30公斤， 豆粕10～20公斤， 硫酸镁5公斤， 硫酸锰1～2公斤； 磷酸氢二钾5公 斤， 用水定容至10 00公斤； pH7.0， 121℃灭菌， 40mi n。 [0006]优选的， 所述步骤(3)中得到的液体菌肥中黄腐酸钾、 苯甲酸钠， 水溶性硅质量百 分数含量均为3 ‰， 用磷酸调整pH  5； 活菌数在6 0亿CFU/g以上。 [0007]优选的， 所述步骤(3)中得到的固体菌肥含黄腐酸钾、 十二烷基硫酸钠、 水溶性硅说　明　书 1/5 页 3 CN 115160064 A 3