(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221096423 3.8 (22)申请日 2022.08.11 (83)生物保 藏信息 GDMCC No： 62694 202 2.08.11 (71)申请人 广西大学 地址 530004 广西壮 族自治区南宁市西乡 塘区大学东路10 0号 (72)发明人 王梓廷　张润芝　许雄彪　刘钺　 李昕洋　杨成龙　罗义宝　 (74)专利代理 机构 南宁市科典知识产权代理事 务所(普通 合伙) 4513 5 专利代理师 戴秋连 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01)A01P 3/00(2006.01) A01G 13/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种芽孢杆菌 菌株及其应用 (57)摘要 本发明属于微生物分离培养技术领域， 具体 涉及一种芽孢杆菌菌株， 所述芽孢杆菌菌株命名 为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus  velezensis) GNZY01， 所述菌株保藏于广东省微生物菌种保藏 中心， 保藏号为： GDMCC  No： 62694。 本发明还公开 所述芽孢杆菌菌株在生物防治甘蔗根腐病中的 应用。 本发 明的芽孢杆菌菌株能够拮抗甘蔗根腐 病， 实现对甘蔗根腐病的有效防治。 权利要求书1页 说明书7页 附图4页 CN 115305222 A 2022.11.08 CN 115305222 A 1.一种芽孢杆菌菌株， 其特征在于： 所述芽孢杆菌菌株命名为贝莱斯芽孢杆菌 (Bacillus  velezensis)GNZY01， 所述菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏号为： GDMCC No： 62694。 2.如权利要求1所述芽孢杆菌菌株， 其特征在于： 所述芽孢杆菌菌株来源于患 根腐病的 甘蔗根际土 。 3.如权利要求1所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： 所述芽孢杆菌菌株在生物防治 甘蔗根腐病中的应用。 4.如权利要求3所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： 所述芽孢杆菌菌株在生物防治 甘蔗根腐病的具体步骤为： (1)制备无菌发酵液： 打制5个芽孢杆菌菌饼后接种至NB培养基中， 在37℃、 180r/min条 件下培养24h， 在80 00r/min转速下离心 20min， 上清液 经过滤器过滤， 获得无菌发酵 液； (2)制备分生孢子悬浮液： 在100mL的PDB培养基中接种3个5mm的甘蔗根腐病病原菌菌 饼， 在28℃、 13 0r/min条件下振荡培 养5d， 获得分生孢子悬浮液； (3)将无菌发酵滤液分别与分生孢子悬浮液和PDA培养基混合均匀， 在28℃下培养3d， 观察抑菌效果。 5.如权利要求3所述芽孢杆菌 菌株的应用， 其特 征在于， 具体步骤为： (1)芽孢杆菌菌悬液： 挑取芽孢杆菌菌落接种于100ml  NB培养基中， 置于恒温摇床， 在 28℃， 180r/mi n， 振荡培 养24h后得到 芽孢杆菌 菌悬液； (2)向无菌土中以重量比为11:1加入蛭石， 加入无菌土 同重量的无菌水搅拌均匀后装 入容器中， 加入 无菌土重量的3.6 ‑4.0％芽孢杆菌菌悬液， 将消毒处理过的黑皮果蔗块茎植 入， 培养7d后接入甘蔗根腐病 病原菌， 接种45d后， 观察效果。 6.如权利要求4或5所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： 所述甘蔗根腐病病原菌为 共享镰刀菌(Fusarium  commune)。 7.如权利要求4或5所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： 所述NB培养基原料为： 蛋白 胨10g， 牛肉粉3g， NaCl  5g、 蒸馏水10 00mL。 8.如权利要求4所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： PDB培养基原料为： 马铃薯 200g、 葡萄糖20g、 蒸馏水 1000mL； PDA 培养基原料为： 马铃薯200g、 葡萄糖2 0g、 琼脂粉15g、 蒸 馏水1000mL。 9.如权利要求4所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： 所述步骤(3)中， 无菌发酵滤液 与分生孢子悬浮液混合时： 分别按照体积比为1:9、 2:8、 3:7混合均匀； 无菌发酵滤液与PDA 培养基混合时： 分别按照体积比为1:9、 2: 8、 3:7混合均匀。 10.如权利要求5所述芽孢杆菌菌株的应用， 其特征在于： 所述芽孢杆菌菌悬液的OD600 为0.5。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115305222 A 2一种芽孢杆菌 菌株及其应用 技术领域 [0001]本发明属于微 生物分离 培养技术领域， 具体涉及一种芽孢杆菌 菌株及其应用。 背景技术 [0002]甘蔗是我国南方重要的糖料作物， 其产糖量占全国糖量的90％左右。 而甘蔗是禾 本科宿根作物， 在同一地块的连年种植会导致一些病原菌在植株体内或土壤中逐年积累， 使得病害严重， 种性退化， 对甘蔗 产量和产糖量构成严重威胁。 甘蔗根腐病是甘蔗生产中较 为严重的一种土传病害， 其会导致感病植株的根系 呈褐色或腐烂、 长势弱、 活力差， 造成大 面积减。 能够导致甘蔗根腐病发生的主要病菌有强雄腐霉(Pythium  arrhenomane)、 Pachymetra  chaunorhiza、 乌灵参(Xylariasp).、 芝麻茎点枯病菌(Macrophomina   phaseolina)、 Fusariummoniliforme.and  Pythium gramenicolasp.、 共享镰刀菌 (Fusarium  commune)、 Xylaria  arbuscula。 [0003]目前为止， 甘蔗根腐病 在实际生产应用上手段较少。 很多情况下使用化学药剂， 其 防效虽好， 但同时带来了食品安全、 生态环境等问题， 并且出现土壤微生态失衡、 盐渍化和 酸化等一系列严重问题。 而物理防治 见效慢、 成本高， 不适应于大规模种植。 因此， 现有防治 手段越来越难以满足甘蔗 产业健康发展的需求， 寻找有效控制甘蔗根腐病发生的方式变得 十分重要。 [0004]生物防治对人畜安全、 环境友好且不易引发抗药性， 近年来， 已有诸多关于拮抗菌 防治植物根腐病的报道， 例如， 廖海浪等通过离体根的抑病 试验表明健康黄连根系存在大 量拮抗菌能有效防治黄连根腐病； 许世洋等通过测量根围土壤中养 分含量和土壤酶的活性 表明6种菌剂复配能有效防治辣椒根腐病； 张漫漫等发现从黄瓜根际土中分离得到的棘孢 木霉FJ035(Trichoderma  asperellum)能有效防治黄瓜根腐病。 但是， 在甘蔗根腐病拮抗菌 的筛选及其生物防治的研究甚少。 发明内容 [0005]本发明旨在解决上述技术问题， 提供一种芽孢杆菌菌株， 该菌株能够拮抗甘蔗根 腐病， 实现对甘蔗根腐病的有效防治。 [0006]本发明的技 术方案为： [0007]一种芽孢杆菌菌株， 所述芽孢杆菌菌株命名为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus   velezensis)GNZY01， 所述菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏号为： GDMCCNo： 62694。 [0008]优选地， 本发明所述芽孢杆菌 菌株来源于患根腐病的甘蔗根际土 。 [0009]本发明还提供所述芽孢杆菌菌株在生物防治甘蔗根腐病中的应用， 通过应用 试 验， 可知本发明的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus  velezensis)GNZY01能够拮抗甘蔗根腐病， 实 现对甘蔗根腐病的有效防治。 [0010]优选地， 本发明所述芽孢杆菌 菌株在生物防治甘蔗根腐病的具体步骤为：说　明　书 1/7 页 3 CN 115305222 A 3