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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210629474.7 (22)申请日 2022.06.06 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO: V202239 2022.05.12 CCTCC NO: V202046 2020.07.21 (71)申请人 南京农业大 学 地址 211225 江苏省南京市溧水区白马镇 国家农业科技园南京农业大 学基地 申请人 南京昌吉生物科技有限公司 (72)发明人 范红结 肖宁 周红 李剑男  蔺辉星  (74)专利代理 机构 南京中律知识产权代理事务 所(普通合伙) 32341 专利代理师 沈振涛(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A61K 39/02(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 1/00(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、 疫苗及其应 用 (57)摘要 本发明公开了一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌 株、 疫苗及其应用, 所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌 株保藏在中国典型培养物保藏中心, 命名为 LJS19051 ‑P80, 保藏日期为2022年5月12日, 保藏 编号为CCTCC  NO: V202239 。 所述胞内劳森菌弱毒 疫苗菌株用于制作胞内劳森菌弱毒疫苗菌株疫 苗, 能有效预防猪增生性回肠炎。 本发明以前期 分离的胞内劳森菌LJS19051菌株为疫苗候选菌 株, 使用体外传代致弱方式对其进行致弱, 并选 择合适代次的致弱菌株制备胞内劳森菌弱毒疫 苗, 为猪增生性回肠炎商品化弱毒疫苗的研制及 猪场猪增生 性回肠炎的有效防控奠定 了基础。 权利要求书1页 说明书7页 附图6页 CN 114836356 A 2022.08.02 CN 114836356 A 1.一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株, 其特征在于, 所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌株保藏在 中国典型培养物保藏中心, 命名为LJS19051 ‑P80, 保藏 日期为2022年5月12日, 保藏编号为 CCTCC NO: V202239。 2.权利要求1所述的胞内劳森菌弱毒疫苗菌株在制备预防动物感染胞内劳森菌的药物 中的应用。 3.权利要求1所述的胞内劳森菌弱毒疫苗菌株在制备预防猪感染胞内劳森菌的药物中 的应用。 4.权利要求1所述的胞内劳森菌弱毒疫苗菌株在制备预防猪增生性回肠炎的药物中的 应用。 5.一种胞内劳森菌弱毒疫苗, 其特征在于, 其有 效成分为权利要求1所述的胞内劳森菌 弱毒疫苗菌株。 6.权利要求5所述的胞内劳森菌弱毒 疫苗的制备 方法, 其特 征在于, 包括以下步骤: (1)制备不同代次胞内劳森菌LJS190 51攻毒液; (2)评价不同代次LJS190 51致弱效果, 选择第80代LJS190 51; (3)利用上述第80代LJS190 51, 制备所述胞内劳森菌弱毒 疫苗。 7.权利要求5所述的胞内劳森菌弱毒疫苗在制备预防动物感染胞内劳森菌的药物中的 应用。 8.权利要求5所述的胞内劳森菌弱毒疫苗在制备预防猪感染胞内劳森菌的药物中的应 用。 9.权利要求5所述的胞内劳森菌弱毒疫苗在制备预防猪增生性回肠炎的药物中的应 用。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114836356 A 2一种胞内劳森菌弱毒疫苗 菌株、 疫苗及其应用 技术领域 [0001]本发明属于兽用生物制品技术领域, 具体涉及一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、 疫 苗及其应用。 背景技术 [0002]猪增生性回肠炎(Porcine  proliferative  enteropathy,PPE)是由胞内劳森菌 (Lawsonia  intracellularis,L.intracellularis,LI)感染引起、 在世 界各地猪场中普遍 存在的一种肠道疾病, 以生长育肥猪生长发育缓慢, 料肉比下降为主要 特征, 给养猪业带来 严重经济损失。 据报道, 美国每年因PPE造成的经济损失高达2000万美元。 据美国学者 Moller报道, 回肠炎对每头感染猪的经济损失至少为1.5 31美元。 [0003]临床上对于PPE的防控, 目前主要依赖疫苗免疫预防和药物治疗。 研究表明, 高剂 量的泰妙菌素、 泰乐菌素、 金霉素、 林可霉素和喹乙醇等药物对LI有效。 迄今为止, 全球共有 2种商品化PPE疫苗, 一种为勃林格殷格翰公司生产的弱毒疫苗 另一种为默克动 物保健公司生产的灭活疫苗 Ileitis。 已有研究表明, 两种疫苗对预防PPE均有一 定的免疫保护效果。 Jacobs等通过对 Lawsonia有效性进行评价, 发现该疫苗无论 单独使用, 还是与 PCV M Hyo混合免疫接种, 均能够提高猪群日增重、 降低粪便排 菌数量、 减轻组织病理损伤等, 对猪 群具有较好的免疫保护作用。 [0004]在国内, 由于国外PPE商品化疫苗价格昂贵, 加之PPE为一种慢性损耗性疾病, 猪群 感染后多 呈亚临床症状, 死亡率低, 因此并未引起养殖户的高度重视, 从而限制了商品化疫 苗在中国的使用, 而抗菌药物已成为国内兽医或养殖户控制该病的首选方法。 研究表明, 对 LI有效的药物可在短时间内控制PPE, 但由于LI为严格胞内寄生菌, 无法在体外无细胞培养 基上生长, 导致其分离培养极其困难。 因此, 当爆发PPE时, 很难像其他细菌一样, 在短时间 内通过药敏试验筛选出对LI敏感的药物。 此外, 随着农业农村部禁抗减抗政策的实施, 无抗 饲养将成为未来养猪业发展的必然趋势。 因此, 研制安全、 有效的具有自主知识产权的PPE 疫苗对于P PE的有效防控具有重要意 义。 发明内容 [0005]发明目的: 针对上述技术问题, 本发明提供了一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、 疫苗 及其应用, 制备的胞内劳森菌弱毒 疫苗, 为猪场P PE有效防控奠定基础。 [0006]技术方案: 为了 达到上述发明目的, 本发明所采用的技 术方案如下: [0007]一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株, 所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌株保藏在中国典型培 养物保藏中心, 命名为LJS19051 ‑P80, 保藏日期为2022年5月12日, 保藏编号为CCTCC  NO: V202239。 [0008]所述的胞内劳森菌弱毒疫苗菌株在制备预防动物感染胞内劳森菌的药物中的应 用。 [0009]所述的胞内劳森菌弱毒 疫苗菌株在制备 预防猪感染胞内劳森菌的药物中的应用说 明 书 1/7 页 3 CN 114836356 A 3

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