(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210806824.2 (22)申请日 2022.07.08 (71)申请人 中国农业大 学 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 袁京　杨燕　李国学　马若男　 宫小燕　杨佳　孔艺霖　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 孙怡 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C05F 17/20(2020.01) C05F 15/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/10(2006.01)C12R 1/465(2006.01) (54)发明名称 一种耐高温纤维素降解菌剂的制备方法及 其在堆肥中应用 (57)摘要 本发明涉及微生物 技术领域， 具体涉及一种 耐高温纤维素 降解菌剂的制备方法及其在堆肥 中应用。 本发明以超高温(>80℃)堆肥后腐化期 产品为原料， 筛选和制备耐高温纤维素降解菌 剂。 具体地， 本发明中， 采用选择性培养基培养经 超高温堆肥的腐熟堆肥产物， 所述超高温是指堆 肥温度大于80℃， 并持续5天以上。 采用本发明制 备得到的菌剂， 在堆肥过程中， 能使厨余垃圾等 有机固体废弃物快速升温， 3天升至 70℃以上， 较 对照处理进入高温期时间提前5天， 有效提高了 堆肥效率； 在堆肥28天后， 可以显著提高堆肥腐 熟度， 显著促进 有机质的降解 转化。 权利要求书1页 说明书5页 附图5页 CN 115029281 A 2022.09.09 CN 115029281 A 1.一种耐高温纤维素降解菌剂的制备方法， 其特征在于， 采用选择性培养基培养超高 温堆肥体系后熟化期的产物， 获得所述菌剂； 所述超高温是指堆肥温度大于80℃， 并持续5 天以上。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其特征在于， 所述超高温堆肥体系为工厂化堆肥， 堆肥原料为有机物料和辅料， 超高温堆肥体系初始含 水率为60％～70％， 碳氮比为 15～25， 通风速率为0.2～0.6L·kg‑1DM·min‑1， 堆肥周期为10～3 0天； 所述有机物料为畜禽粪便或厨余垃圾； 所述辅料为农作物秸秆、 园林剪枝、 稻壳、 锯末。 3.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 所述选择培养基为滤纸富集培养基， 采用滤纸富集培养基对超高温堆肥体系后熟化期产物进行三次及以上的传代培养， 获得所 述耐高温纤维素降解菌剂。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述滤纸富集培养基的配方包括： 蛋 白胨、 酵母粉、 NaCl、 MgSO4·7H2O、 KH2PO4·7H2O、 FeSO4·7H2O、 MnSO4·4H2O、 滤纸和微晶纤维 素。 5.权利要求1～4任一所述的制备方法在耐高温纤维素降解菌筛选或耐高温纤维素降 解菌剂制备中的应用。 6.一种菌剂， 其特 征在于， 由权利要求1～4任一项所述制备 方法制备 得到。 7.权利要求1～4任一项所述的制备方法或权利要求6所述的菌剂， 在提高堆肥温度和 有机质降解 率、 提高堆肥中厚壁菌门含量中的应用。 8.一种降解纤维素物料的方法， 其特征在于， 将权利要求6所述的菌剂应用到含有纤维 素的物料进行好氧堆肥。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特征在于， 以质量计， 菌剂的添加量为堆肥原料的 2％‑5％； 所述堆肥原料包括有机物料和辅料； 所述有机物料包括畜禽粪便、 厨余垃圾， 所述 辅料包括农作物秸秆、 园林剪枝、 稻壳、 锯末。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115029281 A 2一种耐高 温纤维素降解菌剂的制备方 法及其在堆肥中应用 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物技术领域， 具体涉及一种耐高温纤维素降解菌剂的制备方法及 其在堆肥中应用。 背景技术 [0002]好氧堆肥技术是实现有机固体废弃物无害化和肥料化利用的有效方式。 然而传统 好氧堆肥存在腐熟周期长、 二次污染、 产品品质较差等问题， 严重限制了该技术的发展与推 广。 超高温堆肥技术可加速物料有机质降解， 提升堆肥温度， 缩短堆肥周期， 提高堆肥腐熟 度。 目前超高温堆肥构建方式主要分为三种： 堆肥前期添加腐熟物料、 堆肥前期直接添加超 嗜热菌剂、 堆肥前期进 行高温预 处理， 每一种方式之间优缺点各不相同， 其中添加超嗜热菌 剂方法具有操作简单、 耗能低、 效果稳定等优点， 但是 人工筛选和培养的嗜热菌有限。 [0003]农作物秸秆作为农业固体废弃物的重要组成部分， 含有大量的纤维素(35％～ 50％)、 半纤维素(10％～30％)和木质素(10％～36％)， 这些木质纤维素在堆肥过程中分解 速度十分缓慢， 可能导致堆肥效率低、 堆肥产品质量不佳， 进一步影响作物生长。 因此， 纤维 素降解速率是影响堆肥效率的关键。 已有研究报道， 纤维素的分解主要发生在堆肥高温期， 高温对于纤维素的降解有促进作用， 主要 是由于高温可作为预 处理加速破坏秸秆 纤维素的 结晶度， 使其结构疏松， 加快纤维素 的降解速率。 通过添加嗜热菌剂可使堆肥达到超高温， 并且外源微生物可能加速堆肥中纤维素 的降解。 因此， 高温纤维素降解菌将有利于堆肥温 度的提升、 缩短堆肥周期、 促进纤维素的降解以及提高堆肥产品的腐熟度。 但是耐 高温纤维 素降解菌较为 缺乏， 需要 进一步在富含纤维素的高温体系中进行筛 选。 [0004]因此， 如何提高有机废弃物好氧堆肥过程中纤维素等有机质的降解率， 进而缩短 堆肥周期是本领域 技术人员亟需解决的问题。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种耐高温纤维素降解菌剂的制备方法及其在堆肥中的应 用。 [0006]第一方面， 本发明提供一种耐高温纤维素降解菌剂的制 备方法， 采用选择性培养 基培养超高温堆肥体系后熟化期的产物， 获得所述菌剂； 所述超高温堆肥体系是指堆肥温 度大于80℃， 并持续5天以上。 [0007]在本发明提供的制 备方法中， 所述超高温堆肥的原料包括有机物料和辅料； 优选 地， 所述有机物料包括畜禽粪便、 厨余垃圾， 所述辅料包括农作物秸秆、 园林剪枝、 稻壳、 锯 末。 [0008]更具体地， 本发明中超高温堆肥体系应为大仓工程试验， 初始含水率为60％～ 70％， 碳氮比为15～25， 在0.2～0.6L ·kg‑1DM·min‑1的强制通风下， 所述超高温堆肥体系 后熟化期的产物， 为超高温堆肥体系发酵10～3 0天得到超高温堆肥产品。 [0009]现有技术中纤维素降解菌剂及菌剂制备原料的缺点在于： 1)使用常规堆肥原料或说　明　书 1/5 页 3 CN 115029281 A 3