(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210699465.5 (22)申请日 2022.06.20 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 19407 2020.01.17 (71)申请人 中国科学院天津 工业生物技术研究 所 地址 300450 天津市滨 海新区空港经济区 西七道32号 (72)发明人 夏建业　徐超　白玉卿　姜玮　 夏海容　 (74)专利代理 机构 北京知文通达知识产权代理 事务所(普通 合伙) 16051 专利代理师 欧阳石文 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)A23L 3/3571(2006.01) C12R 1/24(2006.01) (54)发明名称 一种短乳杆菌及其抑菌物质制备方法 (57)摘要 本发 明 公 开 了 一 种短 乳 杆 菌 C G M C C   No.19407及其抑菌物质制备方法， 涉及微生物发 酵及提取领域。 本发明提供的短乳杆菌属于益生 菌， 是公认GRAS菌株。 其发酵产物对多种真菌、 细 菌， 如黑曲霉、 酵母菌、 金黄色葡萄球菌、 大肠杆 菌等均有良好的抑菌活性。 本发 明还提供一种所 述抑菌物质的提取制备方法， 包括以下步骤： （1） 菌株接种于发酵培养基进行发酵培养； （2） 发酵 结束后除菌， 得澄清发酵液； （3） 澄清发酵液经阴 离子交换树脂进行吸附； （4） 吸附后树脂加解析 液进行解析； （5） 解析液干燥得最终产品。 本发明 提供的菌株及所得产品安全可靠， 抑菌谱广泛， 在食品、 饲料、 农业 等领域有较高的应用价 值。 权利要求书1页 说明书4页 附图5页 CN 114806976 A 2022.07.29 CN 114806976 A 1.一种有广泛抑菌活性的短乳杆菌 菌株， 该菌株保藏 号为CGMCC No. 19407。 2.权利要求1所述的有广泛抑菌活性短乳杆菌 菌株在制备生物防腐剂中的应用。 3.利用如权利要求1所述的短乳杆菌 菌株生产生物防腐剂的方法。 4.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 发酵培养所述的短乳杆菌 菌株， 从发酵的培 养液进行干燥获得生物防腐剂。 5.根据权利要求3所述的方法， 其特征在于， 所述发酵培养条件为30 ‑37℃， 50 ‑100  rpm， 培养24‑48 h;其中所述发酵培 养基为MRS液体培 养基。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特 征在于， 在发酵培 养前进行 下述培养： （1） 斜面培养： 将所述短乳杆菌菌株在无菌条件下接种于固体斜面培养基上， 30 ‑37℃ 培养24‑48h,其中所述的固体斜 面培养基为脱脂 乳培养基； （2） 种子培养： 将步骤 （1） 所培养的短乳杆菌在无菌条件下接种于液体种子培养基， 30 ‑ 37℃静置 培养12 h； 其中所述的种子 培养基为液体MRS培 养基。 7.根据权利要求 4所述的方法， 其特 征在于， 所述干燥 为喷雾干燥法。 8.根据权利 要求6所述的方法， 其特征在于， 喷雾干燥的条件是进口温度为120 ‑210℃， 出口温度6 0‑100℃， 干燥后添加其重量计为5% ‑20%改性淀粉、 麦 芽糊精和/或环糊精。 9.根据权利要求4所述的方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 将发酵液澄清， 收集清液； 用阴离子交换树脂处理澄清后发酵液； 使用解析液对阴离子交换树脂进行洗脱， 收集洗脱 液； 洗脱液干燥得生物防腐剂。 10.权利要求9所述的方法， 其特征在于： 所述澄清的方法选自管式离心机离心、 碟片式 离心机离心、 陶瓷膜过 滤、 中空纤维膜过 滤。 11.权利要求9所述的方法， 其特征在于： 所述阴离子交换树脂为强碱性离子交换树脂 或弱碱性离 子交换树脂 。 12.权利要求9所述的方法， 其特征在于： 所述的解析液为0.5 ‑5%盐酸、 0.5 ‑5%氯化钠或 0.5‑5%氢氧化钠溶 液的一种或两种混合。 13.权利要求9所述的方法， 其特征在于： 所述洗脱液干燥的方法为真空干燥、 喷雾干燥 或冷冻干燥。 14.如权利要求3 ‑13任一项所述的方法制备 得到的生物防腐剂。 15.如权利要求1所述的短乳杆菌菌株， 如权利要求14所述的生物防腐剂在食品、 饲料 中作为防腐剂的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114806976 A 2一种短乳杆菌及其抑菌物质制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及一种短乳杆菌和其 生物防腐剂的制备 方法及应用， 属于微 生物领域。 背景技术 [0002]根据 《全国遏制动物源细菌耐药行动计划(2017 ‑2020年)》 的部署， 自2020年起， 农 业部废止了金霉素、 土霉素等13个药物饲料添加剂， 寻找合适的替抗产品是目前饲料行业 面临的挑战。 同时 随着抗生素滥用、 食品安全等问题日益严重， 健康安全成为消费者对食品 选择的更高要求。 如何实现饲料禁抗、 养殖减抗、 食品无抗成为饲料、 食品行业共同面临的 重要难题。 [0003]乳酸菌作为GRAS菌株， 可以产生多种抑菌物质， 应用乳酸菌及其代谢产物来解决 食品和饲料安全问题是目前研究的热点， 比如Nisin， 已广泛应用于食品行业。 但 Nisin抑菌 普较窄， 仅对部分革兰氏阳性细菌抑制效果较好， 对霉菌、 酵母等真菌无抑制效果。 本专利 所述短乳杆菌代谢产物对多种真菌、 革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌， 如黑 曲霉、 美琪酵母、 镰刀菌、 金黄色葡萄球菌、 大肠杆菌等均有良好的抑菌活性， 抑菌普广泛。 [0004]现阶段乳酸菌抑菌产品多以活菌发酵液或微生态制剂为主， 但乳酸菌 活菌很难直 接添加到食品中， 无法直接作为防腐剂使用。 乳酸菌发酵液可以作为饲料直接添加到动物 饲料中， 但活菌微生态制剂活性容易降低且不易保存。 对发酵液的抑菌成分进 行分离提取， 将方便保藏、 运输及添加使用。 发明内容 [0005]本发明为解决上述现有技术中所存在的技术缺陷， 提供了一种短乳杆菌及其物防 腐剂的制备 方法， 因而提供一种抑菌普广泛的生物防腐剂， 解决食品饲料的安全问题。 [0006]为实现上述发明目的， 采取的技 术方案为： 本发明提供一种有广泛抑菌活性的短乳杆菌菌株， 该菌株保藏号为CGMCC  No.  19407。 [0007]还提供所述的有广泛抑菌活性短乳杆菌 菌株在制备生物防腐剂中的应用。 [0008]进一步提供利用 所述的短乳杆菌菌株生产生物防腐剂的方法。 具体包括以下步 骤： 发酵培 养所述的短乳杆菌 菌株， 从发酵的培 养液进行干燥获得生物防腐剂。 [0009]优选地， 所述发酵培养条件为30 ‑37℃， 50‑100 rpm， 培养24 ‑48 h;其中所述发酵 培养基为MRS液体培 养基。 [0010]一个实施方式 中， 在发酵培 养前进行 下述培养： （1） 斜面培养： 将所述短乳杆菌菌株在无菌条件下接种于固体斜面培养基上， 30 ‑ 37℃培养24‑48h,其中所述的固体斜 面培养基为脱脂 乳培养基； （2） 种子培养： 将步骤 （1） 所培养的短乳杆菌在无菌条件下接种于液体种子培养 基， 30‑37℃静置 培养12 h； 其中所述的种子 培养基为液体MRS培 养基。 [0011]优选地， 所述干燥为喷雾干燥法。 更具体地， 喷雾干燥的条件是进口温度为120 ‑说　明　书 1/4 页 3 CN 114806976 A 3