(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210885250.2 (22)申请日 2022.07.26 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 2021 1703 2021.12.3 0 CCTCC NO： M 2021 1704 2021.12.3 0 (71)申请人 中国科学院深圳先进技 术研究院 地址 518055 广东省深圳市南 山区深圳大 学城学苑大道1068号 申请人 深圳市澳华 集团股份有限公司 (72)发明人 马迎飞　黄志鹏　翁奥婷　 (74)专利代理 机构 深圳市科进知识产权代理事 务所(普通 合伙) 44316 专利代理师 孟洁 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C12N 7/00(2006.01) A61K 35/76(2015.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 37/04(2006.01) A01N 63/20(2020.01) A01N 63/40(2020.01) A01P 1/00(2006.01) C12R 1/63(2006.01) C12R 1/92(2006.01) A61K 35/741(2015.01) (54)发明名称 一种益生菌和噬菌 体的组合物及其应用 (57)摘要 本发明属于微生物 技术领域， 具体提供了一 种益生菌和噬菌体的组合物及其应用， 所述益生 菌和噬菌体的组合物包括： 溶藻弧菌VA3、 Halocynthiibacter、 Psychrobacter、 Ruegeria 中的至少一种和噬菌体VpC ‑1； 其中， 所述溶藻弧 菌VA3的保藏编号为CCTCC  NO:M 20211703， 分类 命名为Vibrio  alginolyticus； 所述噬菌体VpC ‑ 1的保藏编号为CCTCC  NO:M20211704， 分类命名 为Myoviridae。 益生菌组合物从对虾肠道中筛 选， 解决了益生菌对水产环境的不耐性， 当选择 多菌株进行 组合制备复合益生菌制剂时， 可以增 加菌群的多样性， 有助于水产动物肠道的菌群稳 定， 使菌群保持一个稳定的健康状态， 提高非特 异性免疫能力， 噬菌体能靶向杀灭目标弧菌， 两 者联合应用对弧菌引起的鱼虾类疾病产生预防 效果。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 115404182 A 2022.11.29 CN 115404182 A 1.一 种 益 生 菌 和噬 菌 体 的 组 合 物 ， 其 特 征 在 于 ， 包 括 ： 溶 藻 弧 菌 V A 3 、 Halocynthiibacter、 Psychrobacter、 Ruegeria中的至少一种和噬菌体VpC ‑1； 其中， 所述溶 藻弧菌VA3的保藏编号为CCTCC  NO:M 20211703， 分类命名为Vibrio  alginolyticus； 所述 噬菌体VpC ‑1的保藏编号 为CCTCC NO:M 20211704， 分类命名为Myoviridae。 2.一种抑制副溶血弧菌的复合抑菌制 剂， 其特征在于： 包括如权利要求1所述的益生菌 和噬菌体的组合物。 3.如权利要求2所述的抑制副溶血弧菌的复合抑菌制 剂， 其特征在于： 所述复合抑菌制 剂中活菌数不少于1010CFU/mL， 活噬菌体数不少于1011PFU/mL。 4.如权利要求2 ‑3任意一项所述的抑制副溶血弧菌的复合抑菌制 剂在水产养殖中的应 用。 5.如权利要求4所述的抑制副溶血弧菌的复合抑菌制剂在水产养殖中的应用， 其特征 在于： 以养殖水体体积计， 所述 复合抑菌制剂中益生菌的终浓度不少于5 ×106CFU/mL， 噬菌 体VpC‑1终浓度不少于 5×107PFU/mL。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115404182 A 2一种益生菌和噬菌 体的组合物及其应用 技术领域 [0001]本发明属于微 生物技术领域， 具体涉及一种益 生菌和噬菌体的组合物及其应用。 背景技术 [0002]我国是水产养殖大国。 近年来， 我国的水产养殖业获得迅猛发展。 随着海水养殖规 模的日益扩大和集约化养殖方式的不断推广， 疾病的频繁发生对水产规模化养殖的健康发 展造成了严重的威胁。 水产养殖的病原体主要包括细菌、 病毒、 寄生虫等， 其中细菌性疾病 是对危害程度较为 严重的一类疾病。 [0003]弧菌是能运动的芽孢短杆状细菌， 广 泛分布于近海岸、 河口海区海水及生物体内， 是海洋中最常见的细菌类群之一， 同时也是引起海水养殖鱼虾细菌性疾病最重要的病原 菌。 弧菌的致病强度与宿主的生理状态及水质环境条件等综合因素有关， 属于条件性致病 菌， 其主要通过口或伤口感染， 产生毒 素， 致使伤口肌肉溃烂化脓以及内脏器官的严重病变 从而导致鱼虾类的死亡。 由弧菌引起的疾病又称弧菌病， 具有 “流行面积广、 发病率高、 致死 性强”等特点， 是水产养殖动物的主要疾病， 同时也被确定为是阻碍水产养殖业发展的重要 限制性因素， 给养殖业造成了巨大的危害。 其中鳗弧菌(Vibrio  anguillarum)、 溶藻弧菌 (Vibrio  alginolyticus)、 哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、 副溶血弧菌(Vibrio   parahaemolyticus)和杀鲑 弧菌(Vibrio  salmonicida)  等弧菌引起的弧菌病被认为是鱼 虾类养殖中最为严重的病害之一。 早期死亡综合征， 也称作肝胰腺急性坏死综合征影响的 主要对虾种类包括凡纳滨对虾、 斑节对虾和中国明对虾在内的多个主养品种， 其中凡纳滨 对虾和斑节对虾的死亡率最高。 由于该病发病急、 造成的死亡率高、 流行范围广， 对对虾养 殖业危害严重， 备 受关注。 亚利桑那大学的研究已经确定， 该疾病是由细菌剂副溶血弧菌引 起的， 副溶血弧菌通过口腔传播并定殖于虾的胃肠道， 并产生毒力蛋白， 导致虾消化器官的 组织破坏和功能障碍 。 [0004]目前针对水产养殖相关动物疾病的预防和控制方法主要以化学抗生素法和免疫 疫苗法， 其中以化学抗生素使用为主。 作为当前控制水产动物疾病的主要手段， 化学抗生素 法具有使用方便、 见效快和疗效好等优点。 但是， 大批量频繁使用抗生素在 控制病原菌的同 时， 极大了助长了病原菌的耐药性， 并加速了广谱耐药菌的产生。 这使 得致病菌的耐药性问 题日益严重。 此外， 化学药物残留也是导致人类食源性疾病 产生的重要原因之一， 对人类健 康造成严重危害。 [0005]益生菌可在水产动 物肠道或水产环境中对有害菌进行竞争性抑制， 减少弧菌的浓 度， 使其低于发病浓度。 近年来抗生素的滥用使得益生菌的优势 一直未能完全发挥。 由于抗 生素对细菌抑制的非特异性， 有害菌在被大量清除的同时， 有益菌也被抗生素杀灭， 从而 无 法发挥益生菌的作用。 现在大众逐渐了解到抗生素滥用的危害， 开始寻找 能够取代抗生素 的抑菌和杀菌药物， 益生菌就是其中一个有效措施。 然而， 传统益生菌例如乳酸菌、 芽孢杆 菌， 在水产养殖上的使用效果并不理想， 这些益生菌并不能适应水产养殖的环 境， 例如过低 的温度(＜37℃)， 过高的含盐度(～30％)。 为了解决这个问题， 本发 明从对虾肠道中筛选出说　明　书 1/4 页 3 CN 115404182 A 3