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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210644888.7 (22)申请日 2022.06.08 (71)申请人 北京市科 学技术研究院资源环境研 究所 地址 100089 北京市海淀区西三环北路27 号 (72)发明人 郑晓伟 刘丹 王海潮 郭栋 李珊 (74)专利代理 机构 北京轻创知识产权代理有限 公司 11212 专利代理师 冯瑛琪 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/02(2006.01) C12N 1/36(2006.01)C05F 9/04(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/125(2006.01) (54)发明名称 一种用于 餐厨垃圾的生物干化的菌株、 筛选 方法及应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于餐厨垃圾的生物干 化的菌株、 筛选方法及应用, 涉及餐厨垃圾的生 物 干 化 领 域 , 所 述 菌 株 为 枯 草 芽 孢 杆 菌 (Bacillus subtilis)或解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens); 所述枯草芽孢 杆菌(Bacillussubtilis)的命名为FW91, 保藏编 号为: CGMCC No.23139; 所述解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)的命名为FW1, 保藏编号为: CGMCCNo.2 3138。 本发明筛选的菌株 协同用于餐厨垃圾生化干化处理中, 与木屑、 餐 厨垃圾以一定的比例混合, 可提高餐厨垃圾中 CODcr的去除效率, 尤其是淀粉的去除率, 高达 88%以上, 并产生大量生物热, 使餐厨垃圾中的 水分蒸发, 实现固液分离, 从而使餐厨垃圾迅速 减量, 降低餐厨垃圾的处 理运输成本 。 权利要求书2页 说明书7页 附图3页 CN 115058357 A 2022.09.16 CN 115058357 A 1.一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株, 其特征在于, 所述菌株为枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis)或解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolique faciens); 所述枯草芽孢 杆菌(Bacillus subtilis)的命名为FW91, 保藏编号为: CGMCC No.23139; 所述解淀粉芽孢 杆菌(Baci llus amyloliquefaciens)的命名为FW1, 保藏编号 为: CGMCC No.23138。 2.基于权利要求1所述一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的筛选方法, 其特征在于, 包括如下步骤: 步骤1: 餐厨垃圾的取样及驯化培养: 取餐厨垃圾和木屑按照碳氮重量比为(15 ‑35):1 调节后充分混合, 并调节含水率至55 ‑65%, 得到混合物料; 将混合物料进行有氧发酵的培 养驯化, 经5 ‑9天培养驯化, 将混合物料温度升 至65‑70℃, 得到 培养驯化的混合物料; 步骤2: 菌株的分离筛选: 取培养驯化的混合物料与无菌水按照 重量比为1:(4 ‑5)混合, 反复剧烈震荡, 形成混合菌液; 混合菌液采用倍比稀释法稀释成10‑1到10‑7梯度的菌悬液, 取相同体积量每稀释度的菌悬液于餐厨垃圾为碳源的固体培养基进行刮板涂布, 后于40 ‑ 50℃恒温培养箱观察菌落形态, 通过比较菌落形态, 挑取生长良好的菌落于固体培养基中 重复进行划线分离纯化, 直至每次得到的菌落形态特征一致, 得到三株菌株, 分别命名为 FW1、 FW2、 FW91; 步骤3: 三株菌株通过性能测定的再次筛选: 分别对FW1、 FW2、 FW91菌株扩培, 得到扩培 的FW1菌剂、 FW2菌剂及FW91菌剂, 后分别与混合物料混合, 进行有氧发酵; 通过比较扩培的 FW1菌剂、 FW2菌剂及FW91菌的粗脂肪降解率、 淀粉降解率、 蛋白质降解率、 SCOD去除率及总 减重率, 得到效果显著的FW1和FW91菌株, 即为用于餐厨垃圾的生物干化的菌株。 3.根据权利要求2所述一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的筛选方法, 其特征在于, 步骤3中菌株扩培的方法为: 1)调节扩培 培养基pH至6.5‑7.5, 后高压蒸汽灭菌; 2)在超净工作台内接种菌株, 置于33 ‑40℃, 100 ‑120r/min条件下震荡培养36 ‑60h后至 扩培培养基的培养液完全浑浊, 浊度为0.4 ‑0.6麦氏浊度时, 扩培培养基的培养液有效菌含 量达到107‑109cfu/mL, 完成菌株扩培 。 4.根据权利要求3所述一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的筛选方法, 其特征在于, 所述固体培养基为: 餐厨垃圾烘干制粉20g、 磷酸氢二钾0.05%、 硫酸镁0.05%、 1%三氯化 铁溶液0.2%、 硫酸铵0.0 5%、 酵母 粉0.05%、 氯化钠0.0 5%、 琼脂1.5%、 蒸馏水10 00ml; 所述扩培培养基为: 餐厨垃圾烘干制粉20g、 磷酸氢二钾0.05%、 硫酸镁0.05%、 1%三 氯化铁溶 液0.2%、 硫酸铵0.0 5%、 酵母 粉0.05%、 氯化钠0.0 5%、 蒸馏水10 00ml。 5.一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的复合菌剂, 其特征在于, 所述复合菌剂包括 权利要求1 中的枯草芽孢杆菌FW91和解淀粉芽孢杆菌FW1, 所述枯草芽孢杆菌FW91和所述解 淀粉芽孢杆菌FW1有效菌含量比为(1 ‑2):(1‑2)。 6.根据权利要求5所述一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的复合菌剂, 其特征在于, 所述枯草芽孢杆菌FW91和所述 解淀粉芽孢杆菌FW1有效菌含量比为1:1。 7.根据权利要求5所述一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的复合菌剂, 其特征在于, 所述复合菌剂由以下重量组分组成: 枯草芽孢杆菌FW91 0.5%‑2%, 解淀粉芽孢杆菌FW1 0.5%‑2%, 磷酸氢二钾0.04 ‑0.06%、 硫酸镁0.04 ‑0.07%、 1%三氯化铁溶液0.15 ‑0.3%、 硫酸铵0.04 ‑0.06%、 酵母 粉0.04‑0.06%、 氯化钠0.0 3‑0.06%、 余量为水。 8.根据权利要求5所述一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的复合菌剂, 其特征在于,权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 115058357 A 2所述复合菌剂由以下重量组分组成: 枯草芽孢杆菌FW91 1%‑1.5%, 解淀粉芽孢杆菌FW1 1%‑1.5%, 磷酸氢二钾0.05 ‑0.06%、 硫酸镁0.05 ‑0.06%、 1 %三氯化铁 溶液0.20 ‑0.25%、 硫酸铵0.04 ‑0.05%、 酵母 粉0.04‑0.05%、 氯化钠0.0 ‑0.05%、 余量为水。 9.一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株的复合菌剂的制备方法, 其特征在于, 将株枯 草芽孢杆菌FW91和解淀粉芽孢杆菌FW1在分别根据权利要求3进 行扩培, 得到扩培的株枯草 芽孢杆菌FW91和扩培的解淀粉芽孢杆菌FW1, 再按照重量比为(1 ‑2):(1‑2), 在30±5℃, 150 ~200rpm下培 养16‑24小时, 即得到复合菌剂。 10.基于权利要求5至8任一项所述复合菌剂的应用, 其特征在于, 所述复合菌剂在餐厨 垃圾处理中的应用。权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 115058357 A 3
专利 一种用于餐厨垃圾的生物干化的菌株、筛选方法及应用
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