(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210671325.7 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 陕西康禾 立丰生物科技药业有限公 司 地址 714104 陕西省渭南市华州区工业园 区瓜坡精细化工区 (72)发明人 夏宝成　赵商洛　 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C05F 11/08(2006.01) C05G 3/60(2020.01) A01N 63/30(2020.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01) A01G 13/00(2006.01)C12R 1/645(2006.01) C12R 1/10(2006.01) (54)发明名称 一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的 制备及应用 (57)摘要 本发明公开了生物农药技术领域的一种用 于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备及应用， 包括以下步骤： A： 斜面培养， 将菌种地衣芽孢杆 菌和球孢白僵菌在不同培养基中斜面培养， B： 液 体种子培养， 将A步骤斜面培养的菌种进行液体 环境下在培养基中培养种子液； C： 种子液配比， 将B步骤的种子液按照1： 1比例配比； D： 将步骤C 的液体种子接种于发酵培养基中， 进行配置菌 剂， 当发酵罐中的种子 液的活菌 数≥20亿/ml时， 停止发酵； E： 将步骤D中的菌剂配置成固体粉剂； 本发明采用液体深层发酵技术， 将有益微生物混 菌同罐发酵复合培养； 本发明的防治对象是茄子 根腐病和烟草根腐病； 其杀菌机理是通过占位和 有益微生物分泌的活性产物进行杀菌， 提高了防 治效果。 权利要求书2页 说明书5页 附图1页 CN 114958677 A 2022.08.30 CN 114958677 A 1.一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 制备过程包括斜面培 养、 液体种子 培养、 种子液配比、 发酵 罐发酵以及固体粉剂的制备， 所述制备 过程具体如下： 步骤一： 将菌种地衣芽孢杆菌和球孢白僵 菌在无菌条件下分别接种于斜 面培养基中； 步骤二： 调节温度至2 9℃， 使斜 面培养基在29℃下培养3天； 步骤三： 将步骤二的斜面培养基中的菌种地衣芽孢杆菌和球孢白僵菌在无菌条件下分 别接种于装有液体培 养基的液体三角瓶中； 步骤四： 调节温度至2 9℃， 并将液体三角瓶 放置在15 0r/min的摇床中， 培 养2天； 步骤五： 将步骤四的液体三角瓶中培养出的地衣芽孢杆菌和球孢白僵菌的种子液按照 一定的重量百分比进行配比混合； 步骤六： 将步骤五中配比好的液体种子接种到液体发酵罐中， 发酵培养64小时， 且发酵 液中的活菌数≥20亿/ml时， 停止发酵， 即得 液体菌剂； 步骤七： 将步骤六中制备好的液体菌剂作为原药， 与粉碎的灭菌有机肥、 白炭黑做载体 混合， 混合后产物 放入干燥室进 行常温风干干燥， 干燥后进 行粉碎， 包装即得固体粉状生物 菌剂。 2.根据权利要求1所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 步骤一中所述斜面培养基组分按照重量百分比分为： 葡萄糖0.5％、 酵母浸粉0.8％、 蛋白胨 0.5％以及氯化钠1.0％， 所述 斜面培养基的pH为7.1。 3.根据权利要求1所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 步骤三中所述液体培养基组分按照重量百分比分为： 蛋白胨2％、 酵母浸膏1.0％、 氯化钠 1.0％、 葡萄糖0.5％以及余 量的水， 所述液体培 养基的pH为7.0 。 4.根据权利要求1所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 步骤五中的地衣芽孢杆菌和球孢白僵 菌的种子液以各5 0％的重量百分比进行配比。 5.根据权利要求1所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 步骤六中的发酵培养基组分按照重量百分比分为： 糖蜜1.2％、 葡萄糖0.8％、 玉米淀粉 1.3％、 豆粕粉1.5％、 硫酸镁0.03％、 木醋酸1.5％、 尿素0.12％、 磷酸二氢钾0.04％、 蛋白胨 0.1％、 酵母粉0.05％以及余量水， 液体种子接种到液体发酵罐中的接种 量为15％， 其接种 条件为:培 养温度为2 9℃， 转速190r/mi n， 液体种子与发酵培 养基通气量 为1： 0.6。 6.根据权利要求1所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 步骤七中的载体有机肥和白炭黑的比例为3:1， 固体粉碎至70目。 7.根据权利要求1所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的制备， 其特征在于， 所述地衣芽孢杆菌以及球孢白僵菌均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物 中心内。 8.一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的应用， 其特征在于， 所述复合微生物菌剂 具体应用于防治 茄子根腐病以及 烟草根腐病。 9.根据权利要求8所述的一种用于防治根腐病的复合微生物菌剂的应用， 其特征在于， 所述复合 微生物菌剂的应用具体如下： 步骤1： 向搅拌容器内加入一定量的复合 微生物菌剂； 步骤2： 向步骤1的搅拌容器中加入液态水， 且液态水与复合微生物菌剂的比例为100: 1， 之后进行搅拌混合；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114958677 A 2步骤3： 将步骤2中混合得到的液体进行灌根处 理。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114958677 A 3