(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210864761.6 (22)申请日 2022.07.21 (71)申请人 东北农业大 学 地址 150030 黑龙江省哈尔滨市香坊区木 材街59号 (72)发明人 王傲雪　王倩　谢桂林　周玉雪　 莫福磊　陈秀玲　程谟桢　王迎春　 (74)专利代理 机构 哈尔滨市晨晟知识产权代理 有限公司 23219 专利代理师 刘坤 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/22(2020.01) A01P 3/00(2006.01) A01P 21/00(2006.01)A01G 13/00(2006.01) A01C 21/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆 菌菌剂及其制备方法及其应用 (57)摘要 一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆 菌菌剂及其制备方法及其应用， 它属于生防菌应 用技术领域。 本发明要解决的技术问题为发明一 种多功能菌剂。 本发明方法为发酵贝莱斯芽胞杆 菌菌剂， 配置富硒营养液， 将配置的富硒营养液 稀释， 得到稀释的富硒营养 液， 待用； 按照一定的 质量比将得到的发酵贝莱斯芽胞杆菌菌剂和得 到的稀释的富硒营养液混合均匀后， 得到一种用 于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂。 本发 明进行了培养基组分优化和摇床发酵条件优化 优化后的菌量是优化前的3.28倍， 对灰霉病的抑 菌率也显著增加。 在此基础上与富硒营养液复配 进行了生防促 生试验， 具有良好的预防效果。 权利要求书2页 说明书11页 附图9页 CN 115011530 A 2022.09.06 CN 115011530 A 1.一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方法， 其特征在于： 包括如 下步骤： 步骤1、 发酵贝莱斯芽胞 杆菌菌剂， 待用； 步骤2、 配置富硒营养液， 待用； 步骤3、 将步骤2配置的富硒营养液稀释， 得到稀释的富硒营养液， 待用； 步骤4、 按照一定的质量比将步骤1得到的发酵贝莱斯芽胞杆菌菌剂和步骤3得到的稀 释的富硒营养液混合均匀后， 得到一种用于番 茄的多功能复合贝莱斯芽胞 杆菌菌剂。 2.根据权利要求1所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方 法， 其特征在于： 步骤1 发酵贝莱斯芽胞 杆菌菌剂具体方法包括如下步骤： 步骤1.1、 将贝莱斯芽胞杆菌接种在具有LB液体培养基 的三角瓶中， 35℃， 180r/min摇 床中振荡培 养48h， 得到种子液， 待用； 步骤1.2、 将步骤1得到 的种子液在YSP培养基中培养， 培养温度30℃， 接种量4％， 装液 量为250ml三角瓶中装液125ml， 转速180r/min， 摇床中振荡培养48h， 得到发酵贝莱斯芽胞 杆菌菌剂。 3.根据权利要求1或2所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备 方法， 其特 征在于： 步骤2中的YS P培养基包括蛋白胨2.0g/L， 酵母膏1.0g/L， 葡萄糖4.0g/L。 4.根据权利要求2所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方 法， 其特征在于： 步骤2富硒营养液的配置方法包括如下步骤： 步骤2.1、 按照重量分数分别称量1 ‑5份的蛋氨酸硒， 2 ‑3份的磷酸二氢钾， 2 ‑3份的磷酸 二氢钠， 1 ‑2份的叶酸， 3 ‑10份的蚯蚓粘液， 80 ‑100份的无菌水， 待用； 步骤2.2、 将步骤2.1称量好的蛋氨酸硒、 磷酸二氢钾、 磷酸二氢钠、 叶酸、 蚯蚓粘液加入 无菌水中， 搅拌均匀后， 室温下静止1 ‑2小时后， 得到富硒营养液。 5.根据权利要求4所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方 法， 其特征在于： 步骤3配置的富硒 营养液加入10 ‑20倍的无菌水， 搅拌均匀后， 室温下静止 1‑2小时后， 得到稀释的富硒营养液。 6.根据权利要求5所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方 法， 其特征在于： 步骤4中发酵贝莱斯芽胞杆菌菌剂和稀释的富硒营养液的质量比为 1‑4:1‑ 4。 7.一种权利要求1 ‑6之一所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制 备方法制备 的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂， 其特征在于： 所述贝莱斯 芽胞杆菌(Bacillusvelezen sis)为WZ ‑37， WZ‑37已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会 普通微生物中心， 保藏编号 为CGMCCNo.15766。 8.根据权利要求7所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方法 制备的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂， 其特征在于： 所述发酵贝莱斯芽 胞杆菌菌剂和稀释的富硒营养液的质量比为3:2。 9.根据权利要求7所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的制备方法 制备的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂， 其特征在于： 所述发酵贝莱斯芽 胞杆菌菌剂和稀释的富硒营养液的质量比为2:3 。 10.一种权利要求1 ‑6之一所述的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115011530 A 2制备方法制备 的一种用于番茄的多功能复合贝莱斯芽胞杆菌菌剂的应用， 其特征在于： 用 于番茄灰霉病的防效和番 茄的促生长。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115011530 A 3