(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210615690.6 (22)申请日 2022.05.31 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO:M 20185 58 2018.08.21 CCTCC NO： M 20185 56 2018.08.21 CCTCC NO： M 2021838 2021.07.08 (71)申请人 大连工业大 学 地址 116034 辽宁省大连市甘井 子区轻工 苑1号 (72)发明人 妥彦峰　丁翔　钱方　牟光庆　 姜淑娟　朱雪梅　吴晓萌　宋莹龙　 (74)专利代理 机构 大连东方专利代理有限责任 公司 21212 专利代理师 周媛媛　李馨(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/25(2006.01) (54)发明名称 一种用于植物乳杆菌高密度富集培养的通 用增菌剂及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种用于植物乳杆菌高密度 富集培养的通用增菌剂及其应用， 属于生物技术 领域。 本发 明所述增菌剂由以下几个组分及浓度 组成： 蔗糖20 ‑35g/L， 大豆蛋白胨 20‑40g/L， 酵母 浸粉10‑20g/L， 无水 乙酸钠5‑8g/L， 磷酸氢二钾 1‑2g/L， 柠檬酸氢二胺1 ‑2g/L， 无水硫酸镁0.3 ‑ 0.5g/L， 无水硫酸锰0.1 ‑0.2g/L， 吐温 ‑80 1‑ 2ml/L。 本发明提供的增菌剂， 较传统牛肉膏培养 相比， 原料取材方便， 操作简单， 能显著地提高植 物乳杆菌发酵液中的活菌数。 权利要求书1页 说明书4页 附图2页 CN 115287220 A 2022.11.04 CN 115287220 A 1.一种用于植物乳杆菌 高密度富集培养的增菌剂， 其特征在于， 所述增菌剂包括氮源、 碳源， 所述氮源 包括酵母 浸粉和大豆蛋白胨， 所述 碳源包括蔗糖。 2.根据权利要求1所述的增菌剂， 其特征在于， 所述增菌剂包括缓冲盐及其他组分， 所 述缓冲盐及其他组分包括无水乙酸钠， 磷酸氢二钾， 柠檬酸氢二胺， 无水硫酸镁， 无水硫酸 锰， 吐温‑80。 3.根据权利要求1或2所述的增菌剂， 其特征在于， 所述增菌剂包括： 蔗糖20 ‑35g/L， 大 豆蛋白胨20 ‑40g/L， 酵母浸粉10 ‑20g/L， 无水乙酸钠5 ‑8g/L， 磷酸氢二钾1 ‑2g/L， 柠檬酸氢 二胺1‑2g/L， 无水硫酸镁0.3 ‑0.5g/L， 无 水硫酸锰0.1 ‑0.2g/L， 吐温 ‑80 1.5‑2ml/L。 4.根据权利要求1 ‑3中任一项所述的增菌剂， 其特征在于， 所述植物乳杆菌包括植物乳 杆菌(Lactobacillus  plantarum)Y44、 植物乳杆菌(L actobacillus  plantarum)Y42、 植物 乳杆菌(L actobacillus  plantarum)Y12、 植物乳杆菌(Lactobacillus  plantarum)Y16、 植 物乳杆菌(Lactobaci llus plantarum)D PUL‑F50。 5.根据权利要求1所述的增菌剂， 其特征在于， 所述高密度富集培养为微生物在液体培 养中细胞密度超过常规培 养10倍以上时的生长状态的培 养技术。 6.权利要求1 ‑5中任一项所述的增菌剂在植物乳杆菌发酵增殖培 养中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115287220 A 2一种用于植物乳杆菌高密 度富集培养的通用增菌剂及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 尤其涉及一种用于植物乳杆菌高密度富集培养的通用 增菌剂及其应用。 背景技术 [0002]植物乳杆菌属于乳酸杆菌属， 革兰氏阳性菌， 最适生长温度为30～ 37℃， 属于兼 性厌氧菌， 最适pH为6.2左右， 菌体形状为直或者弯的杆状， 主要存在于奶油、 肉类及蔬菜类 发酵制品中， 大部分菌种从植物原材料中分离得到， 因此得名植物乳杆菌。 大量的研究证明 植物乳杆菌有着良好的益生性能与发酵潜力， 如通过调节肠道微生物群来改善肠道炎症和 脂质代谢紊乱、 抗氧化等功能。 植物乳杆菌在实验室的培育中主要使用MRS 肉汤培养基进 行培养， 使用MRS肉汤琼脂培养基进行倾倒平板计数， 不同的菌种培养14～16h后活菌数基 本可以达 到107～109cfu/mL。 [0003]实验室发酵不同于工业发酵， 实验室多为小批量、 小规模进行菌种培育， 基本满足 日常科研实验， 但工业为大批量 发酵进行菌种培育， 不仅发酵规模较大， 而且对菌种活菌数 稳定性有着一定的需求， MRS培养基由于成本较高， 且培养获得活菌数与投入不成正比， 因 此在工业发酵的应用较为困难。 目前有研究使用天然绿色材料进 行碳源、 氮源替换， 但是随 着季节的更替， 天然 材料的来源变得不可控， 而且发酵制品工厂多远离 市区， 特别 在寒冷的 冬季， 天然绿色材 料的成本过 大、 来源不充足以及天然制品的贮藏又成为另一个难题。 发明内容 [0004]为解决现有技术存在的问题， 本发明对植物乳杆菌培养基的成分进行科学优化， 并且实施例使用5株植物乳杆菌进行培养验证， 旨在发明一种植物乳杆菌通用的发酵培养 基。 [0005]本发明提供了一种用于植物乳杆菌高密度富集培养的增菌剂， 所述增菌剂包括氮 源、 碳源， 所述氮源 包括酵母 浸粉和大豆蛋白胨， 所述 碳源包括蔗糖。 [0006]进一步地， 上述技术方案中， 所述增菌剂包括缓冲盐及其他组分， 所述缓冲盐及其 他组分包括无 水乙酸钠， 磷酸氢二钾， 柠檬酸氢二胺， 无 水硫酸镁， 无 水硫酸锰， 吐温 ‑80。 [0007]进一步地， 上述技术方案中， 所述增菌剂包括： 蔗糖20 ‑35g/L， 大豆蛋白胨20 ‑40g/ L， 酵母浸粉10 ‑20g/L， 无水乙酸钠5 ‑8g/L， 磷酸氢二钾1 ‑2g/L， 柠檬酸氢二胺1 ‑2g/L， 无水 硫酸镁0.3 ‑0.5g/L， 无 水硫酸锰0.1 ‑0.2g/L， 吐温 ‑80 1.5‑2ml/L。 [0008]进一步地， 上述技术方案中， 所述植物乳杆菌包括植物乳杆菌Y44(菌种保藏号为 CCTCC NO:M 2018558)、 植物 乳杆菌Y12(菌种保藏号为 CCTCC N O:M 2018556)、 植物 乳杆菌 DPUL‑F50(菌种保藏 号为CCTCC NO:M 2021838)、 植物乳杆菌 Y42、 植物乳杆菌 Y16。 [0009]植物乳杆菌Y42已发表文章[ 1]Lijuan Zhang,Yuan Meng,et.al.Lactobacillus plantarum Y42 in biofilm and planktonic states improves intestinal barrier ‑ integrity and modulates gut microbiota of Balb/c mice[J].Foods,2022.[2]宋杏说　明　书 1/4 页 3 CN 115287220 A 3