(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210679938.5 (22)申请日 2022.06.16 (71)申请人 南京农业大 学 地址 210095 江苏省南京市玄武区卫岗1号 (72)发明人 何琳燕　盛下放　刘君辉　邓雪婷　 (74)专利代理 机构 南京天华专利代理有限责任 公司 32218 专利代理师 傅婷婷　徐冬涛 (51)Int.Cl. A01B 79/02(2006.01) A01G 7/06(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/07(2006.01) (54)发明名称 一种生物炭基芽孢杆菌菌剂的固态发酵制 备及其应用 (57)摘要 本发明涉及的是生物炭基芽孢杆菌制剂的 固态发酵工艺和菌剂的应用， 属于微生物、 土壤 改良剂和生态改良应用领域。 本发 明提供一种以 生 物 炭 为 主 要 原料 ， 包 含 编号 为 C C T C C   M20211144的短小芽孢杆菌(Bacillus  pumilus) YG35的固态菌剂JHM03。 固态发酵培养基配方为： 以生物炭为基质， 糖蜜2.5％， 大豆粉2.0％， 水 48％， 培养条件为接种量13％， 温度30℃， 发酵4 天。 制备的生物炭基芽孢杆菌菌剂JHM03， 有效活 菌数≥2.5 ×108CFU/g。 菌剂JHM03钝化土壤镉， 减少蔬菜吸收镉， 显著促进蔬菜生长， 增加土壤 有机碳。 权利要求书1页 说明书4页 CN 114982413 A 2022.09.02 CN 114982413 A 1.保藏编号为CCTCC  NO:M 20211144的短小芽孢杆菌(Bacillus  pumilus)YG35在降低 蔬菜及农田土壤Cd含量、 促进蔬菜生长和/或增 加土壤有机碳含量中的应用。 2.保藏编号为CCTCC  NO:M 20211144的短小芽孢杆菌(Bacillus  pumilus)YG35在制备 降低蔬菜及农田土壤Cd含量、 促进蔬菜生长和/或增加土壤有机碳含量的生物菌剂中的应 用。 3.一种生物炭基芽孢杆菌菌剂， 其特征在于以含有生物炭的固态发酵培养基发酵权利 要求1中所述的短小芽孢杆菌 YG35制备得到。 4.根据权利要求3所述的生物炭基芽孢杆菌菌剂， 其特征在于所述的固态发酵培养基 由生物炭、 糖蜜、 大豆粉和水组成。 5.根据权利要求4所述的生物炭基芽孢杆菌菌剂， 其特征在于所述的固态发酵培养基 以生物炭的质量为基准， 其他组分的分重量百分比为： 糖蜜2 ‑3％、 大豆粉1 ‑3％、 水45 ‑ 50％。 6.根据权利要求4所述的生物炭基芽孢杆菌菌剂， 其特征在于所述的固态发酵培养基 以生物炭的质量 为基准， 其 他组分的分重量百分比为： 糖蜜2.5％、 大豆粉2.0％、 水48％。 7.根据权利要求3 ‑6中任一项所述的生物炭基芽孢杆菌菌剂， 其特征在于发酵条件为 发酵温度为3 0‑33℃、 最佳接种量 为13％， 发酵 72～96h。 8.权利要求3 ‑6中任一项所述的生物炭基芽孢杆菌菌剂在降低蔬菜及农田土壤Cd含 量、 促进蔬菜生长和/或增 加土壤有机碳含量中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114982413 A 2一种生物炭基芽孢杆菌 菌剂的固态发酵制备及其应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物、 土壤改良剂和生态改良应用领域， 涉及芽孢杆菌固态发酵制 备微生物菌剂的工艺， 以及微 生物菌剂在土壤修复和 增加土壤碳汇等领域的应用。 背景技术 [0002]我国土壤重金属污染日益严重。 在这些重金属污染土壤中生长 的蔬菜， 其重金属 含量一般都会超标， 并以铅和镉超标为最多。 重金属污染农田土壤修复的三种方法中， 物理 修复消耗人力、 物力， 并且治标不治本， 化学修复可能造成二次污染， 而生物修复中的微生 物修复通过生物吸附和生物氧化—还原机制对污染土壤进行修复， 具有效果好、 投资省、 费 用低、 易于管理与操作、 不产生 二次污染等优点， 日益成为污染土壤修复研究的热点。 [0003]中国微生物菌剂领域的发展十分迅速， 在修复土壤污染方面的应用正逐步上升。 随着我国对生态农业和有机农业的推广与发展， 固态发酵技术在农业生产中的应用日益广 泛， 已涵盖土壤改良剂、 植物保护、 生物饲料等多个领域。 与液态发酵相比， 固态发酵用水量 少、“三废”排放少、 能量消耗少、 设备投资少、 原料适用性强、 产物浓度高。 发展与推广固态 发酵技术， 替代或部分替代液态发酵， 在节能减排中具有重要意义。 细菌、 放线菌和真菌等 微生物菌剂均可采用固态发酵的方法生产。 但有关修复菌剂的发酵培养基和培养条件优化 技术、 以及符合 《农用微 生物菌剂》 国家标准的产品还很少见。 [0004]生物炭是由可再生生物质在密闭缺氧的条件下， 经过高温热解而 成的一种高科技 产品。 生物炭含碳量丰富、 孔隙多、 稳定性强， 它能改善土壤质地， 提高土壤肥力， 增强土壤 碳汇能力， 降低重金属对植物的毒害， 作为土壤改良剂被广泛应用。 考虑到生物炭多孔性和 营养作用， 可以将生物炭作为微生物菌剂的载体材料。 但大多数研究都将生物炭与菌液混 合或与菌液混施。 有关利用生物炭作为基质进行固态发酵生产菌剂的应用还未 见报道。 发明内容 [0005]本发明的目的是针对固态发酵活菌数较低的问题， 提供一种能够提高微生物菌剂 有效活菌数的固态发酵工艺。 [0006]本发明的目的可通过如下技 术方案实现： [0007]保藏编号为CCTCC  NO:M 20211144的短小芽孢杆菌(Bacillus  pumilus)Y G35在降 低蔬菜及 农田土壤Cd含量、 促进蔬菜生长和/或增 加土壤有机碳含量中的应用。 [0008]保藏编号为CCTCC  NO:M 20211144的短小芽孢杆菌(Bacillus  pumilus)Y G35在制 备降低蔬菜及农田土壤Cd含量、 促进蔬菜生长和/或增加土壤有机碳含量的生物菌剂 中的 应用。 [0009]一种生物炭基芽孢杆菌菌剂， 以含有生物炭的固态发酵培养基发酵权利要求1中 所述的短小芽孢杆菌 YG35制备得到. [0010]作为本发明的一种优选， 所述的固态发酵培养基由生物炭、 糖蜜、 大豆粉和水组 成。说　明　书 1/4 页 3 CN 114982413 A 3