(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210616257.4 (22)申请日 2022.05.31 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO. 22648 2021.0 6.01 (71)申请人 廊坊梅花生物技术开发有限公司 地址 065001 河北省廊坊市开发区华 祥路 66号 (72)发明人 张苏龙　杨帆　宫卫波　李岩　 赵津津　 (74)专利代理 机构 北京路浩知识产权代理有限 公司 11002 专利代理师 孙怡 (51)Int.Cl. C12P 13/08(2006.01) C12N 1/20(2006.01)C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 一种生产赖氨酸的方法及应用 (57)摘要 本发明涉及生物发酵技术领域， 具体公开了 一种生产赖氨 酸的方法及应用。 本发 明的生产赖 氨酸的方法， 将生产赖氨酸的发酵菌与生产苏氨 酸的发酵菌在同一发酵培养基中进行共同发酵 培养。 该方法可既提升底物利用率， 又节工省能， 简化工艺设备， 减少环境污染， 提供了一种生产 赖氨酸的新方法。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 114875090 A 2022.08.09 CN 114875090 A 1.一种生产赖氨酸的方法， 其特征在于， 将生产赖氨酸的发酵菌与生产苏氨酸的发酵 菌在同一发酵培 养基中进行共同发酵培 养。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述生产赖氨酸的发酵菌为MHZ ‑0914， MHZ‑0914的保藏编号 为CGMCC No.22648； 所述生产苏氨酸的发酵菌为M HZ‑0216‑5。 3.根据权利要求1或2所述的方法， 其特征在于， 所述生产赖氨酸的发酵菌与生产苏氨 酸的发酵菌的接种量之比为1： (0.04 ‑0.16)， 优选为1:0.08。 4.根据权利要求1 ‑3任一项所述的方法， 其特征在于， 在进行共 同发酵培养时， 初始发 酵葡萄糖浓度19 ‑21g/L， 发酵温度36 ‑38℃， 发酵压力控制0.07 ‑0.09MPa， 通气量0.9 ‑ 1.1vvm； 发酵过程中连续流加葡萄糖和硫酸铵， 控制发酵过程残糖浓度为0 ‑1g/L， 发酵氨氮 浓度为0.8 ‑1.2g/L， 以氨水进行pH调控， 发酵pH值为6.7 ‑7.1， 发酵时间35 ‑37h； 当发酵罐中 的培养液体积至发酵 罐总体积的68 ‑72％时放料， 放料体积为培 养基体积的4.8 ‑5.2％。 5.根据权利要求1 ‑4任一项所述的方法， 其特征在于， 所述发酵培养基的碳源包括葡萄 糖和蔗糖， 氮源 包括硫酸铵和氨水。 6.根据权利要求1 ‑5任一项所述的方法， 其特 征在于， 所述发酵培 养基包括： 葡萄糖19‑21g/L， H3PO4 1.2‑1.7g/L， KCl  0.4‑0.6g/L， MgSO4 0.6‑0.8g/L， 糖蜜9 ‑11g/ L， 玉米浆58 ‑62g/L， 豆粕水解液29 ‑31g/L， MnSO4 0.0018‑0.0022g/L， FeSO40.0018‑ 0.0022g/L， VB1 95‑105 μg/L， 生物素190 ‑210 μg/L； 流加葡萄糖和硫酸铵。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特征在于， 所述发酵培养基包括： 葡萄糖20g/L， H3PO4  1.5g/L， KCl  0.5g/L， MgSO4 0.7g/L， 糖蜜10g/L， 玉米浆60g/L， 豆粕水解液30g/L， MnSO4  0.002g/L， FeSO4 0.002g/L， VB1 100 μg/L， 生物素20 0 μg/L。 8.根据权利要求1 ‑7中任一项所述的方法， 其特征在于， 所述生产赖氨酸的发酵菌的种 子培养基包 括： 葡萄糖39 ‑41g/L， KH2PO4 1.4‑1.6g/L， MgSO4 1.4‑1.6g/L， 糖蜜11 ‑13g/L， 玉 米浆24‑26g/L， 硫酸铵1 1‑13g/L， MnSO4 0.0015‑0.0025g/L， F eSO40.0015‑0.0025g/L。 9.根据权利要求1 ‑8中任一项所述的方法， 其特征在于， 所述生产 苏氨酸的发酵菌的种 子培养基包括： 葡萄糖18 ‑22g/L， 玉米浆10 ‑20g/L， 豆粕水解液3 ‑7g/L， MgSO4·7H2O 0.4‑ 0.6g/L， KH2PO4 1.8‑2.2g/L。 10.权利要求1 ‑9任一项所述的方法在降低生产赖氨酸成本中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114875090 A 2一种生产赖氨酸 的方法及应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物发酵技 术领域， 具体地说， 涉及一种生产赖氨酸的方法及应用。 背景技术 [0002]赖氨酸是一种碱性氨基酸， 分子式C6H14N2O2， 分子量146.19， 其分子内含两个氨基。 赖氨酸的应用很广， 作为食品强化剂， 作为药物可作为肝细胞再生剂， 对 改善肝功能， 治疗 肝硬化， 增进食欲， 改善营养状况有明显的疗效。 作为饲料添加剂， 在畜、 禽类的饲料中添加 少许的赖氨酸， 对家禽、 家畜的日增重， 料肉比， 家禽的排卵量 等方面效果尤为显著。 [0003]由葡萄糖生产赖氨酸的代 谢途径包括EMP途径， HMP途径， TCA循环， 乙醛酸循环， 二 氧化碳固定反应， 草酰乙酸氨基化反应生产天冬氨酸， 天冬氨酸在天冬氨酸激酶和天冬氨 酸‑β‑半醛脱氢酶催化下生成环天冬氨 酸‑β‑半醛， 然后分成两 路， 一方面在DDP合 成酶等一 系列酶催化下生 成赖氨酸， 另一方面在高丝氨酸脱 氢酶催化下生产高丝氨酸， 又分成两路， 一路在琥珀酰高丝氨 酸合成酶等一系列酶催化下生成 蛋氨酸， 另一方面在高丝氨酸激酶等 酶催化下生成苏氨酸， 苏氨酸又在苏氨酸脱氢酶等催化下生产异亮氨酸。 [0004]生产赖氨酸的微生物可通过营养突变型来提高赖氨酸产量， 如苏氨酸缺陷菌株。 在赖氨酸发酵过程中， 可在配方中添加苏氨酸， 来满足产赖氨酸菌生长需要。 苏氨酸也是通 过微生物发酵生产的氨基酸。 发酵生产苏氨酸 或生产赖氨酸， 都 需要单独的发酵设备， 原辅 料， 及能源， 不利于节约成本和避免环境污染， 因此有必 要对赖氨 酸的生产发酵进 行进一步 研究。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种底物利用率高， 节工省能， 简化工艺设备， 环境污 染小的 赖氨酸生产方法。 [0006]本发明的技 术方案如下： [0007]一种生产赖氨酸的方法， 其将生产赖氨酸的发酵菌与生产苏氨酸的发酵菌在同一 发酵培养基中进行共同发酵培 养。 [0008]本发明的方法中， 所述生产赖氨酸的发酵菌为MHZ ‑0914， MHZ ‑0914的保藏编号为 CGMCC No.22648； [0009]所述生产苏氨酸的发酵菌为M HZ‑0216‑5。 [0010]本发明提供了一种新的生产碱性氨基酸——赖氨酸的方法， 其将生产赖氨酸的菌 株接入培养基进行发酵培养， 同时接入生产苏氨 酸的菌株， 与赖氨酸菌进 行混合培养。 以苏 氨酸生产菌株所产的苏氨酸作为赖氨酸生产菌株生产赖氨酸的氮源， 供赖氨酸生产菌生长 和代谢， 完成发酵， 生产赖氨酸， 从而使 得赖氨酸氮源的生产和赖氨酸的生产在同样的底物 中同时进行， 无需在生产赖氨酸前先生产苏氨酸， 整体节约了发酵流程、 发酵底物， 提升了 底物利用率， 大幅节约了 工业化生产成本 。 [0011]本发明的方法中， 所述生产赖氨酸的发酵菌与生产苏氨酸的发酵菌的接种量之比说　明　书 1/6 页 3 CN 114875090 A 3