(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210754549.4 (22)申请日 2022.06.30 (83)生物保 藏信息 CCTCC NO： M 2021 1178 2021.09.15 (71)申请人 南京工业大 学 地址 211899 江苏省南京市江北新区浦珠 南路30号 (72)发明人 蒋羽佳　杨欣怡　刘岩松　姜万奎　 章文明　信丰学　姜岷　 (74)专利代理 机构 南京新慧恒 诚知识产权代理 有限公司 32424 专利代理师 王月霞 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12P 7/56(2006.01)C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一种生产乳酸的菌 株及其应用 (57)摘要 本发明公开了一株生产乳酸的菌株及其应 用， 所述菌株的分类命名为副干酪乳杆菌 （Lactobacillus  paracasei ） LYS2， 已保藏于中 国典型培养物保藏中心， 保藏编号为CCTCC  NO： M  20211178， 保藏日期为2 021年9月15日。 该菌株能 够在发酵1~2天内迅速生长， 利用葡萄糖合成乳 酸， 具有乳酸产量高、 糖酸转化率高等优势。 在5   L发酵罐中发酵6天， 共消耗144  g/L葡萄糖， 生产 120 g/L乳酸， 其耗糖速率为1.00  g/ （L·h） ， 产 乳酸速率为0.833  g/ （L·h） ， 与现有产乳酸菌株 相比， 该菌株发酵液残 糖量少、 副产物少， 且发酵 培养基氮源添加量少、 成本低廉， 在乳酸生产方 面有着极高的应用价 值。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图4页 CN 115353990 A 2022.11.18 CN 115353990 A 1.一种菌株， 其分类命名为副干酪乳杆菌 （ Lactobacillus  paracasei ） LYS2， 已保藏于 中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC NO： M 20211178。 2.权利要求1所述菌株在生产乳酸中的应用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 将菌株LYS2以接种量1~10% v/v接种到种 子培养基中活化， 然后以接种量1~10% v/v接种到发酵培 养基中生产乳酸。 4.根据权利 要求3所述的应用， 其特征在于， 所述的种子培养基各组分的含量为： 10~15  g/L葡萄糖， 5~10 g/L酵母粉， 5~10 g/L玉米浆干粉， 5~10 g/L NaH2PO4·2H2O， 10~20 g/L  K2HPO4·3H2O， 5~15 g/L CaHCO3。 5.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述种子培养的温度为28~37 ℃， 周期为 12~72 h， 培养方式为震荡培 养， 转速为80~200 r·min‑1。 6.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述发酵培养基各组分的含量为： 50~70  g/L葡萄糖， 5~10 g/L酵母粉， 5~10 g/L玉米浆干粉， 5~20 g/L CaCO3， 5~10 g/L NaH2PO4· 2H2O， 10~20 g/L K2HPO4·3H2O， 5~15 g/L CaHCO3。 7.根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 所述发酵培养的温度为28~37 ℃， 周期为 48~96 h， 培养方式为震荡培 养， 转速为80~200 r·min‑1。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115353990 A 2一种生产乳酸 的菌株及其应用 技术领域 [0001]本发明属于微 生物发酵 领域， 具体涉及一株生产乳酸的菌株及其应用。 背景技术 [0002]乳酸是重要的生物化工产品， 可广泛用于食品、 制药、 纺织、 制革、 环保和农业中， 其产品主要用做酸味剂、 调味剂、 防腐 剂、 鞣制剂、 植物 生长调节剂、 生物可降解材料和手性 药物等。 工业乳酸的生产方法主 要有化学合成法和微 生物发酵法。 [0003]化学合成法主要是为乳腈法， 以乙醛与氢氰酸经碱性催化作用生成乳腈， 粗乳腈 通过蒸馏回收纯化并用浓盐酸或硫酸水解为乳酸， 粗乳酸用甲醇酯化得到乳酸甲酯， 精馏 提纯后再用浓硫酸 或浓盐酸水解生 成乳酸。 合 成法获得产品是DL ‑乳酸， 但人体仅能吸收L ‑ 乳酸。 因此， 化学合成法的生产成本和产物构型限制了其大规模的工业 化生产。 [0004]发酵法采用天然原料， 主要以淀粉、 葡萄糖、 糖蜜等为原 料， 生产成本低。 发酵法生 产乳酸对环境污染小、 提纯方便。 随着人们对食品安全越来越关注， 对乳酸及其衍生物的开 发力度在逐年加大， 在食品行业乳酸将替代无机酸和对人体有害的防腐剂， 在饲料添加剂 中也正逐步代替无机酸。 因此， 低 成本、 高收率、 高品质和轻污染的发酵法生产乳酸便具有 了较大的市场和较强的竞争力。 [0005]发酵法的关键是菌种的选择。 用于发酵生产乳酸的菌株主要有细菌和根霉， 其中 大多数乳酸菌发酵除生成乳酸外， 还生成乙醇、 CO2和乙酸等副产物， 米根霉在发酵过程中 会形成巨大 的菌丝团造成生产速率低、 生产不稳定的问题。 目前利用乳酸菌生产乳酸的发 酵培养基中玉米浆干粉 添加量为30 ‑55 g/L， 一定程度上导致了培养基成本偏高， 因此开发 可利用低廉成本 培养基且同时具 备高产量、 少副产物的微 生物菌株是目前 所关注的热点。 发明内容 [0006]发明目的： 本发明提供了一种高效生产乳酸的菌株， 所要解决的技术问题是在优 化培养基提高乳酸产量的同时， 提高糖酸 转化率、 降低培 养基成本、 减少发酵 液副产物。 [0007]本发明还要解决的技 术问题是提供 上述菌株的应用。 [0008]为了解决上述 技术问题， 本发明采用的技 术方案如下： 本发明公开了一种菌株， 其分类命名为副干酪乳杆菌（ Lactobacillus   paracasei ） LYS2， 已保藏于中 国典型培养物保藏中心， 保藏地址为中国武汉 ·武汉大学， 保 藏编号为CCTCC NO： M 20211178， 保藏日期为2021年9月15日。 [0009]本发明所述菌株副干酪乳杆菌 （ Lactobacillus  paracasei ） LYS2的筛选方法为： 称取适量泡菜汤汁， 用生理盐水稀释， 吸取100  mL于MRS培养平板上，  28~37 ℃下培养3~4 天。 生长出的菌落划线纯化5代， 从而筛选出能够生产乳酸的菌株副干酪乳杆菌 （Lactobaci llus paracasei ） LYS2。 [0010]菌株LYS2的菌落形态如图1所示， 菌落直径2~3 mm， 菌落呈乳白色微凸圆形， 表面 光滑、 边缘整齐。说　明　书 1/5 页 3 CN 115353990 A 3