(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210685775.1 (22)申请日 2022.06.16 (83)生物保 藏信息 CCTCC No: M 202 2596 202 2.05.11 (71)申请人 安徽农业大 学 地址 230036 安徽省合肥市蜀山区长江西 路130号 申请人 湖北省烟草公司十堰市公司 (72)发明人 曹媛媛　蔡柯　丁月　刘岱松　 王义伟　欧康苗　艾文峰　张晓亮　 柯于忠　张自豪　马俊锋　刘俊峰　 苗春雨　刘猛　徐传强　邓瑞宁　 李昀煜　周周　汪若涵　蒲静娴　 许海栋　(74)专利代理 机构 合肥和瑞知识产权代理事务 所(普通合伙) 34118 专利代理师 王挺 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A01N 63/20(2020.01) A01P 21/00(2006.01) A01C 1/00(2006.01) A01G 29/00(2006.01) C12R 1/06(2006.01) (54)发明名称 一种烟草用增钾提质微生物菌剂及其制备 方法和应用 (57)摘要 本发明涉及一种烟草用增钾提质 微生物菌 剂及其制备方法和应用。 该菌剂由LK30菌株发酵 而成， 所述LK30菌株的分类命名为节杆菌属 (Arthrobacter  sp.)， 2022年5月11日保藏在中 国典型培养物保藏中心， 保藏编号为CCTCC  M  2022596。 本发明的微生物菌剂具有显著的解钾 能力， 可提高土壤中速效性钾的含量， 具有产吲 哚乙酸、 产铁载体的能力， 可促进烟草生长， 改善 土壤理化性质。 并且， 该菌株可降低烟叶氯含量， 提高烟叶钾氯比， 提高烟草品质。 LK30菌株还可 在凝集素介导下长期定殖在烟草根部， 稳定地发 挥促生效果。 本发明的微生物菌剂在烟草种植和 提升烟草品质上 具有广阔的应用前 景。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 CN 115197878 A 2022.10.18 CN 115197878 A 1.一种烟草用增钾提质微生物菌剂， 其特征在于， 该菌剂由LK30菌株发酵而成， 所述 LK30菌株的分类命名为节杆菌属(Arthrobacter  sp.)， 2022年5月11日保藏在中国典型培 养物保藏中心， 保藏编号 为CCTCC M 2022596。 2.根据权利要求1所述的一种烟草用增钾提质微生物菌剂， 其特征在于， 所述微生物菌 剂为液态菌剂。 3.根据权利要求2所述的一种烟草用增钾提质微生物菌剂， 其特征在于， 所述液态菌剂 中活菌数在1 ×108～9×108CFU·mL‑1范围内。 4.一种如权利要求2所述的烟草用增钾提质微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 包括 以下步骤： S1.菌种活化， 将LK3 0菌株接种在LB固体培 养基上， 28～37℃培 养14～28h； S2.摇瓶培养， 使用生理盐水洗涤S1中LB固体培养基上的菌种， 以体积比2 ‑5％接种量 接种于80～150mL  LB液体培养基中， 置于摇床 28～37℃、 130～180r ·min‑1振荡培养至L K30 菌液浓度为OD680≥0.8； 将菌液调节至活菌数在1 ×108～9×108CFU·mL‑1范围内， 即制得所 述微生物菌剂。 5.一种如权利要求3所述的微生物菌剂的使用方法， 其特征在于， 所述微生物菌剂用于 烟草的浸种或浇根； 当所述微生物菌剂用于浸种时， 将烟草露白的种子在所述微生物菌剂中浸泡30～ 60min后再播种； 当所述微生物菌剂用于 浇根时， 每 株烟草幼苗的施用量 为0.1～2mL。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115197878 A 2一种烟草用增钾提质微生物菌剂及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物促生技术领域， 具体涉及一种烟草用增钾提质微生物菌剂及其 制备方法和应用。 背景技术 [0002]烟草(Nicotiana  tabacum L.)是我国重要的经济作 物。 钾素不仅是烟草生长所必 需的重要营养元素之一， 同时烟叶含钾 量也是评价烟草品质的一项重要指标。 含钾 量高的 烟草， 其烟叶无论在质地、 填充力、 色度， 还是在燃烧性、 吃味等方面均明显优于含钾量低的 烟草。 烟叶钾氯比是衡量烟叶燃烧的重要指标， 比值越高， 其燃烧性越好。 [0003]我国烟叶钾含量仅为1.3％左右， 低于优质烟叶大于2％标准。 为了提高烟叶钾含 量， 在现代农业生产过程中， 常施用硫酸钾等化学钾肥， 但是施用硫酸钾的同时， 大量的硫 素也进入土壤中， 过量的SO42‑会抑制烟草的生长， 间接影响烟草的品质。 同时， 过量施用化 肥容易造成环境污染以及资源浪费。 [0004]土壤中全钾含量很高， 但是供给作物可直接吸收利用的速效钾含量仅占全钾含量 的1％～10％。 土壤中的钾素大多以钾长石等固态矿石的形态存在， 不能直接被植物所吸收 利用。 近年来， 已有报道利用土壤中解钾细菌制作的微生物肥料菌剂施用到田间， 可以增加 土壤速效钾浓度， 减少钾肥用量。 [0005]专利CN105779334A公开了一种芽孢杆菌促进烟叶品质提升的应用， 专利   CN107828691A公开了一种假单胞菌促进烟草生长的应用， 但目前还 未见节杆菌在促进烟草 生长上的报道。 [0006]另外， 由于生物肥料往往和目标作物之间缺乏亲和性， 两者不能相互识别进而产 生稳定关系， 也难以保证菌株能长期存活在植物根际发挥稳定的有益作用， 造成田间施用 效果波动， 无法稳定的发挥促生功效。 市面上这一类的微生物菌剂仅限于提高烟叶钾含量， 而同时对于烟叶品质指标提升的报道却鲜见， 这也限制了烟草促生菌剂的发展。 因此， 迫切 需要筛选到与烟草具有高度亲和性的烟草亲和性根际解钾菌株， 以此为目标生产烟草专用 的减肥提钾增质的微生物菌剂， 改变传统施肥方式， 提高烟叶品质， 为保护农业生态环境健 康和实现农业的可持续发展提供新的发展方向。 发明内容 [0007]为了解决现有技术中存在的问题， 本发明的目的之一在于提供一种烟草用增钾提 质微生物菌剂。 [0008]该菌剂由LK30菌株发酵而成 ， 所述LK30菌株的分类命名为节杆菌属   (Arthrobacter  sp.)， 2022年5月11日保藏在中国典型培养物保藏中心， 保藏地址为湖北省 武汉市武昌区八一路珞珈山， 保藏编号 为CCTCC M 2022596。 [0009]优选的， 所述 促生菌剂为液态菌剂。 [0010]优选的， 所述液态菌剂中活菌数在1 ×108～9×108CFU·mL‑1范围内。说　明　书 1/6 页 3 CN 115197878 A 3