(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210601945.3 (22)申请日 2022.05.30 (71)申请人 山东胜利生物工程有限公司 地址 272000 山东省济宁市高新区同济路 118号 (72)发明人 张翠芬　梁景乐　何鲁波　苏薇　 朱明贺　刘正光　高鹏　 (74)专利代理 机构 北京弘权知识产权代理有限 公司 11363 专利代理师 逯长明　许伟群 (51)Int.Cl. C12P 17/18(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/465(2006.01) (54)发明名称 一种海南霉素的发酵培 养基以及发酵 方法 (57)摘要 本申请提供了一种海南霉素的发酵培养基 以及发酵方法， 与原有的发酵培养基相比， 本申 请的发酵培养基减少了淀粉和葡萄糖等碳源的 使用， 但增加了不同品种的氮源， 即优质且易利 用的鱼蛋白胨和甲基供体蛋氨 酸， 使得生物合成 更快更早。 相比于现有的海南霉素发酵过程， 采 用本申请发酵培养基发酵海南霉素时， 菌体浓度 比原来的50％降低到42 ‑44％， 因此， 降低了原材 料成本与动力消耗， 同时， 其平均发酵液效价达 到10413u/ml以上， 相较于原有发酵液效价 9250u/ml， 发酵效价提高率约12％。 因此， 采用本 申请发酵培养基发酵海南霉素， 使用较少的原材 料投入， 获得更高发酵效价， 降低生产成本与动 力消耗， 同时成品质量 也有一定提高。 权利要求书1页 说明书9页 CN 114854805 A 2022.08.05 CN 114854805 A 1.一种海南霉素的发酵培养基， 其特征在于， 包括以下原料： 玉米淀粉， 黄豆饼粉， 葡萄 糖， 酵母粉， 鱼蛋白胨， 硫酸镁， 蛋氨酸， 氯化钠， 淀粉酶， 碳 酸钙， 饮用水。 2.根据权利要求1所述的海南霉素的发酵培养基， 其特征在于， 包括以下重量份的原 料： 玉米淀粉7.0 ‑10.0％， 黄豆饼粉1.5 ‑2.5％， 葡萄糖为1.0 ‑2.0％， 酵母粉为0.7％， 鱼蛋 白胨为0.05％， 硫酸镁为0.07％， 蛋氨酸为0.02 ‑1.0％， 氯化钠为0.2 ‑0.4％， 淀粉酶为玉米 淀粉份量的0.1％， 碳 酸钙为0.6 ‑0.8％， 饮用水， pH为7.5 ‑7.7。 3.根据权利要求1或2所述的海南霉素的发酵培养基， 其特征在于， 所述淀粉酶为玉米 粉的0.1％。 4.一种海南霉素发酵 方法， 其特 征在于， 包括， 步骤S10:取稠李东方链霉菌FCD21001 ‑1甘油管接种到摇瓶培养基中， 摇床振荡培养， 得到摇瓶种子液； 步骤S20： 将S10制备的摇瓶种子液接入一级罐和二级罐分别进行培养， 得到二级罐种 子液； 步骤S30:将S20得到的二级罐种子液按10％接种量转入发酵罐中， 在28 ±1℃、 0.05MPa 罐压条件下， 通过搅拌转速以及空气流量控制发酵进程， 发酵过程中补加淀粉液， 其中， 发 酵罐内的发酵培 养基采用上述权利要求1 ‑3中任一项所述的发酵培 养基。 5.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法， 其特征在于， 步骤S10 中， 接种到摇瓶培养 基中的种子液的接种量为0.04％， 将接种后的种子液放置偏心距5cm的摇床上， 在转速 200rpm、 温度28 ±1℃条件下培 养44‑48h， 得到摇瓶种子液。 6.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法， 其特征在于， 步骤S20 中， 获得的摇瓶种子 液按0.04％接种量接种到一级种子罐中， 28 ±1℃， 1： 1气比培养34 ‑40h得到一级种子液， 其 中， 一级种子液转种标准菌浓达 到30％以上， pH 达到7.50以上； 一级种子液按照8 ‑10％接种量接入二级罐， 28 ±1℃， 1： 0.8气比培养20h得到二级种子 液， 其中， 二级种子液转种标准菌浓达 到20％以上， pH 达到8.00以上。 7.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法， 其特征在于， 步骤S30 中， 发酵罐培养温度 为27‑29℃， 搅拌转速为5 0‑100r/min， 通气量 为0.5‑1.2vvm， 发酵培 养周期为280 ‑300h。 8.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法， 其特征在于， 步骤S30 中， 通过搅拌转速以 及空气流 量控制培 养进程， 具体包括： 搅拌转速和空气流量按照溶氧控制， 发酵开始时调整溶氧为100％， 待溶氧下降到40 ％ 时， 通过提高空气流量控制溶氧不低于30％， 最高气比1： 1， 若空气流量到最大时溶氧仍降 低， 则提高搅拌转速， 最高不超 过100r/min， 若60h后溶氧停止降低并发生升高， 则按最低转 速和气比控制， 其中， 最低气比1： 0.4， 最低转速 60r/min。 9.根据权利要求4所述的海南霉素发酵方法， 其特征在于， 发酵过程中补加淀粉液， 具 体包括， 当总糖达到4.5％时， 补加30％ ‑45％的淀粉 液， 控制发酵过程中总糖在4.0％左右， 其中， 补加淀粉液采用的物料包括玉米淀粉、 淀粉酶以及泡敌。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114854805 A 2一种海南霉素的发酵培养基以及发酵 方法 技术领域 [0001]本申请涉及 微生物发酵技术领域， 尤其涉及一种海南霉素的发酵培养基以及发酵 方法。 背景技术 [0002]海南霉素钠是一种多醚类抗生素， 是从我国海南岛土壤中分离的一种稠 李链霉菌 东方变种培养液中提取出 的， 对畜禽球虫有很强的杀虫作用， 而且具有提高牛羊饲料利用 率、 作为“长肉素”促动物生长(增重)的作用。 [0003]现有的海南霉素发酵工艺中， 发酵培养基中基础物料的投入量较大， 导致发酵过 程中的动力消耗较高。 另外， 在发酵培养基中的基础物料充足或富余的情况下， 发酵效价仍 没有达到较高水平。 因此， 目前发酵培养基中大量基础物料的投不造成基础物料的浪费， 也 造成大量的排放废物， 不利于节能减排。 另外， 获得的成品质量中含有较高的杂质量， 也不 利于成品 品质。 发明内容 [0004]本申请提供了一种海南霉素的发酵培养基以及发酵方法， 以解决现有的海南霉素 发酵工艺中发酵培养基中基础物料的投入量较大,造成投入的原材料成本高、 发酵效价低、 动力消耗高以及成品 品质低的问题。 [0005]本申请提供一种海南霉素的发酵培养基， 包括以下原料： 玉米淀粉， 黄豆饼粉， 葡 萄糖， 酵母 粉， 鱼蛋白胨， 硫酸镁， 蛋氨酸， 氯化钠， 淀粉酶， 碳 酸钙， 饮用水。 [0006]一些实施例中， 包括以下重量份的原料： 玉米淀粉7.0 ‑10.0％， 黄豆饼粉1.5 ‑ 2.5％， 葡萄糖为1.0 ‑2.0％， 酵母粉为0.7％， 鱼蛋白胨为0.05％， 硫酸镁为0.07％， 蛋氨酸 为0.02‑1.0％， 氯化钠为0.2 ‑0.4％， 淀粉酶为玉米淀粉份量的0.1％， 碳酸钙为0.6 ‑0.8％， 饮用水， pH为7.5 ‑7.7。 [0007]一些实施例中， 所述淀粉酶为玉米粉的0.1％。 [0008]本申请还提供一种海南霉素发酵 方法， 包括， [0009]步骤S10:取稠李东方链霉菌FCD21001 ‑1甘油管接种到摇瓶培养基中， 摇床振荡培 养， 得到摇瓶种子液； [0010]步骤S20： 将S10制备的摇瓶种子液接入一级罐和二级罐分别进行培养， 得到二级 罐种子液； [0011]步骤S30:将S20得到的二级罐种子液按10％接种量转入发酵罐中， 在28 ±1℃、 0.05MPa罐压条件下， 通过搅拌转速以及 空气流量控制发酵进程， 发酵过程中补加 淀粉液， 其中， 发酵 罐内的发酵培 养基采用上述权利要求1 ‑3中任一项所述的发酵培 养基。 [0012]一些实施例中， 步骤S10中， 接种到摇瓶培养基中的种子液的接种量为0.04％， 将 接种后的种子液放置偏心距5cm的摇床上， 在转速200rpm、 温度 28±1℃条件下培养44 ‑48h， 得到摇瓶种子液。说　明　书 1/9 页 3 CN 114854805 A 3