(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210831505.7 (22)申请日 2022.07.15 (71)申请人 周莹 地址 412000 湖南省株洲市 茶陵县思聪街 道居委会红桥散户216号 (72)发明人 周莹　 (74)专利代理 机构 北京众允专利代理有限公司 11803 专利代理师 孔辉 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/04(2006.01) A23L 33/135(2016.01) A23L 33/00(2016.01) C12R 1/225(2006.01) (54)发明名称 一种活性 益生菌及其在食品中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种活性益生菌， 由特殊的发 酵培养基发酵制备而成， 该特殊的发酵培养基能 显著的促进益生菌的增殖， 本发 明制备的活性益 生菌具有药食同源、 降血糖效果， 将该活性益生 菌应用于制备红树莓酵素中， 能有效地提高红树 莓酵素清除D PPH自由基的作用。 权利要求书2页 说明书9页 CN 115029284 A 2022.09.09 CN 115029284 A 1.一种活性 益生菌的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)菌株活化： 固体培养基灭菌后接种罗伊氏乳杆菌， 接种量为2 ‑4wt％， 于30 ‑40℃下 培养20‑30h， 得到活化菌株； (2)扩大培养： 扩大培养基灭菌后接种步骤(1)制 得的活化菌株， 接种量为2 ‑5wt％， 于 温度为35 ‑42℃、 震荡速度为200 ‑400rpm条件下震荡培养10 ‑18h， 调节溶液pH为6 ‑7得到种 子液； (3)发酵： 特种发酵培养基灭菌后接种种子液， 接种量为2 ‑5wt％， 于30 ‑35℃下无氧发 酵25‑30h， 调节溶 液pH为6‑7， 得到发酵物； (4)菌泥收集及乳化： 将步骤(3)得到的发酵物离心、 弃上清液、 收集菌泥； 按质量比1： (2‑3)将菌泥加入到冻干保护剂1中乳化， 得到 乳化液； (5)制备冻干粉： 将步骤(4)得到的乳化液冷冻干燥、 粉碎， 得到所述活性 益生菌。 2.如权利要求1所述的活性益生菌的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中特种发酵 培养基由0.5 ‑2wt％酪蛋白胨、 0.05 ‑1wt％硫酸锰、 0.01 ‑0.5wt％亚硒酸钠、 余量为水混合 均匀制成。 3.如权利要求1所述的活性益生菌的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中特种发酵 培养基由1 ‑5wt％绿豆肽、 0.5 ‑2wt％酪蛋白胨、 0.05 ‑1wt％硫酸锰、 0.01 ‑0.5wt％亚硒酸 钠、 余量为水混合均匀制成。 4.如权利要求1所述的活性益生菌的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中特种发酵 培养基由1 ‑5wt％绿豆肽、 2 ‑5wt％胡柚提取物、 0.5 ‑2wt％酪蛋白胨、 0.05 ‑1wt％硫酸锰、 0.01‑0.5wt％亚硒酸钠、 余 量为水混合均匀制成。 5.如权利要求1所述的活性益生菌的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中特种发酵 培养基由1 ‑5wt％绿豆肽、 2 ‑5wt％胡柚提取物、 1 ‑4wt％海带提取物、 0.5 ‑2wt％酪蛋白胨、 0.05‑1wt％硫酸锰、 0.01 ‑0.5wt％亚硒酸钠、 余 量为水混合均匀制成。 6.如权利要求4所述的活性益生菌的制备方法， 其特征在于， 所述胡柚提取物的制备方 法如下： 1)将胡柚果肉洗净干燥、 粉碎后， 取100 ‑200重量份 的胡柚果肉粉末， 加入200～600重 量份的水， 再加入果胶酶进行酶解， 酶解 温度为50 ‑70℃， 酶解时间为1 ‑2h， 酶解完成后用1 ‑ 3mol/L的碳酸氢钠水溶液调节溶液的pH值为5 ‑7得到混合液， 果胶酶的用量为柚子果肉粉 末质量的0.0 01‑0.01倍； 2)按体积比1： (0.2 ‑0.4)向步骤1)的混合液中加入70 ‑90wt％乙醇水溶液， 在70 ‑78℃ 条件下反应1‑2h后冷却至20 ‑40℃， 离心收集上清液， 将上清液减压蒸除溶剂后得到胡柚提 取物。 7.如权利要求1所述的活性益生菌的制备方法， 其特征在于： 所述步骤(4)中冻干保护 剂1由3‑10wt％亚麻籽、 1 ‑3wt％食用明胶、 0.5 ‑2wt％益生元、 2 ‑6wt％维生素C、 余量为水混 合均匀制备而成。 8.一种活性益生菌， 其特征在于： 由权利要求1 ‑7任一项所述的活性益生菌的制备方法 制备而成。 9.如权利要求8所述的活性 益生菌在食品中的应用。 10.一种含活性 益生菌的食品的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115029284 A 2M1红树莓果浆预处理： 将红树莓冻果解冻， 用水清洗干净沥干， 用榨汁机破碎打浆， 充 分搅拌均匀后置 于在80‑100℃下杀菌10‑20min得到预处 理后的红树莓果 浆； M2发酵： 将预处理后的红树莓果浆加入到发酵罐中进行无氧发酵， 接种权利要求8所述 的活性益生菌， 接种量为2 ‑3wt％， 发酵温度为25 ‑35℃， 发酵时间为20 ‑24h， 然后加热至 110‑130℃下灭菌10 ‑30min， 得到发酵的红树莓果 浆； M3制备红树莓酵素冻干粉： 将发酵的红树莓果浆与冻干保护剂2按质量比为1:2 ‑3混合 均匀后置于 ‑20～‑60℃下冷冻2 ‑5h， 再置于真空温度为 ‑40～‑60℃、 真空度为0.05 ‑0.1Mpa 条件下干燥 40‑48h， 粉碎过10 ‑40目筛， 得到含活性 益生菌的食品。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115029284 A 3