(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210745871.0 (22)申请日 2022.06.29 (71)申请人 杭州师范大学附属医院 （杭州市第 二人民医院） 地址 310015 浙江省杭州市拱 墅区温州路 126号 (72)发明人 张彬彬　付金龙　施军平　 (74)专利代理 机构 杭州永曙知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 33280 专利代理师 商旭东 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/16(2006.01) A61K 36/064(2006.01) A61P 1/16(2006.01)A61P 5/50(2006.01) A61P 3/06(2006.01) A61K 35/741(2015.01) C12R 1/01(2006.01) C12R 1/865(2006.01) (54)发明名称 一种治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复 合物及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种治疗非酒精性脂肪性肝 病的益生菌复合物及其应用， 包括益生菌布劳特 氏属菌、 罗斯拜瑞式菌与酿酒酵母菌， 所述益生 菌布劳特氏属菌、 罗斯拜瑞式菌与酿酒酵母菌的 体积比例为0.1～10:0.1～7:0.2～5； 本发明针 对非酒精 性脂肪性肝病关键环节进行调控， 不仅 能有效控制非酒精性脂肪性肝病病程的发生发 展， 而且能通过改善胰岛素抵抗和调整脂质代谢 异常； 同时也弥补了尚未有上市药物治疗NAFLD 的空缺， 使用方便， 安全 有效。 权利要求书1页 说明书6页 附图2页 CN 114806979 A 2022.07.29 CN 114806979 A 1.一种治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物， 其特征在于： 包括益生菌布劳特氏 属菌、 罗斯拜瑞式菌与酿 酒酵母菌， 所述益生菌布劳特氏属菌、 罗斯拜瑞式菌与酿 酒酵母菌 的体积比例为0.1～10:0.1～7:0.2 ～5。 2.如权利要求1所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物， 其特征在于： 所述益 生菌布劳特氏属菌、 罗斯拜瑞式菌与酿酒酵母菌的体积比为1:1:1。 3.如利要求1或2所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物， 其特征在于： 包括 益生菌布劳特氏属 菌、 罗斯拜瑞式菌与酿酒酵母菌分别按照1 ×10^8cfu/ml密度制作混悬 液， 然后按照体积比进行混合。 4.一种制备如权利要求1所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物的方法， 其 特征在于， 包括下列步骤： 对NO‑NASH与NASH患者的粪便进行宏基因组检测， 在NO ‑NASH中显著富集的益生菌进行 筛选， 获得显著富 集的益生菌布劳特氏属菌； 将所述益生菌布劳特氏菌、 罗斯拜瑞式菌与酿酒酵母菌分别通过培养基在厌氧箱中进 行培养， 按照1 ×10^8cfu/ml密度接种； 3） 将益生菌布劳特氏属菌、 罗斯拜瑞式菌与酿酒酵母菌按照体积比0.1～10:0.1～7: 0.1～5进行混合， 得到的混悬 液，‑80℃冰箱保存备用。 5.如权利要求4所述的一种制备治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物的方法， 其 特征在于： 所述步骤3） 中益生菌布劳特氏属菌、 罗斯 拜瑞式菌与酿 酒酵母菌按照体积1:1:1 进行混合。 6.如权利要求4所述的一种制备治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物的方法， 其 特征在于所述： 所述益生菌布劳特氏菌使用培养基104， 37℃培养； 罗斯拜瑞式菌使用培养 基1611， 37℃培 养； 酿酒酵母菌使用Y M培养基， 25‑28℃培养。 7.一种如权利要求1所述的治疗非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合物的应用， 其特征 在于： 益生菌复合物在治疗非酒精性脂肪性肝病、 改善胰岛素抵抗与调整脂质代谢异常上 的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114806979 A 2一种治疗非酒精 性脂肪性肝病的益生菌复合物及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及 生物技术领域， 尤其涉及一种治疗 非酒精性脂肪性肝病的益生菌复合 物及其应用  。 背景技术 [0002]非酒精性脂肪性肝病 （NA FLD） 是一个复杂的代 谢性相关疾病， 影响着全球约1/4的 人口， 对社会构成了重大的健康和经济负担。 NAFLD与T2DM和腹型肥胖密切相关， 随着生活 方式和饮食习惯的改变， NAFLD的全球流行率急剧上升。 NAFLD  在所有大洲都很普遍， 南美 洲 （31％） 和中东 （32％） 的发病率最高， 其次是亚洲 （27％） ， 美国 （24％） 和欧洲 （23％） ， 而在 非洲发病率最少 （14％） 。 特别是其组织学表型NASH， 可能会发展为晚期肝病， 肝硬化和肝细 胞癌 （HCC） 。 NAFLD的患病率持续增加 （2 005年为15％， 2010年为25％） ， 同样， NASH  的发病率 在同一时间段内几乎翻了一番 （5.91％到33％） 。 现在， NASH  被认为是继慢 性病毒型肝炎 之 后美国第二大最常见的肝移植 适应症， 并且 还在持续增长 。 [0003]关于 《非酒精性脂肪性肝病防治指南》 （2018版） 中指出  NAFLD 首要目标是减肥和 改善 IR， 防治代谢综合征 （MetS） 、 T2DM及其相关并发症， 次要目标是减少肝脏脂肪沉积， 抑 制肝纤维化和肝硬化进展。 目前关于NAFLD的治疗尚未有关于脂质沉积的特效药应用与临 床， 目前的药物治疗尚定位到 辅助治疗。 [0004]NAFLD病因虽然是由于肝脏对营养物质， 尤其是果糖、 葡萄糖和脂肪酸的过量供应 导致的应激反应， 但是现在研究表明， 肠道微生态紊乱是NAFLD的发生发展的重要病理机 制， 这主要是通过 “肠‑肝”轴起作用。 肠道和肝脏通过胆道， 门静脉和全身循环进行广泛的 交流， 这种双向串扰称为 “肠‑肝”轴。 [0005]还有研究发现， 肠道菌群可以影响NAFLD疾病的进程。 肠道微生物和菌源性代谢物 可能通过增加脂质吸收， 能量吸收、 肠道通透性增加和诱导慢 性炎症等多种机制导致NAFLD 的发生和发展。 将 HFD饮食喂养的代谢综合模 型小鼠粪便移 植到无菌受体小鼠身 上， 诱导受 体小鼠肝脏脂质从头合成， 使受体小鼠肝脏中甘油三酯含量增加3倍， 并且肝脏中脂肪生成 基因的表达增加。 此外， 肠道菌群微生物可以调节NAFLD ‑HCC的进展， NAFLD ‑HCC的肠道微生 物结构较健康人群紊乱， 而来自NAFLD ‑HCC微生物的细菌提取物可 以诱导T细胞的扩增和 CD8+T细胞的减少。 [0006]目前尚未有可以改善肝纤维化的药物上市， 而新的临床细菌疗法策略， 即使用特 定的益生元， 益生菌， 合生元和健康志愿者粪便移植， 以恢复肠道微生物群落的平衡， 从而 防治NASH等代谢性疾病正在引起人们的关注。 中 国工程院李兰娟院士科研团队在中 国工程 院院刊 《Engineer ing》 2021年第5期撰文指出， 非酒精性脂肪性肝病治疗中最受关注的益生 菌主要包括以双歧杆菌属和乳酸杆菌属为代表的传统益生菌以及下一代新兴益生菌， 如嗜 黏蛋白阿克 曼菌和普拉梭菌等。 [0007]在一项针对人类的肠道菌研究表明， 将健康瘦人供体的粪便移植到肥胖患者身上 从而控制肥胖者体重， 这可能与丁酸盐生产者Roseburia  intestinalis菌的比例显着增加说　明　书 1/6 页 3 CN 114806979 A 3