(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210860903.1 (22)申请日 2022.07.21 (71)申请人 汇佳网 （天津） 科技有限公司 地址 300203 天津市南 开区卫津路与万德 庄大街交口西南侧新都大厦1-1-505- 1 (72)发明人 刘佳　 (74)专利代理 机构 哈尔滨市松花江专利商标事 务所 23109 专利代理师 高倩 (51)Int.Cl. A01N 65/44(2009.01) A01N 65/30(2009.01) A01N 65/08(2009.01) A01P 21/00(2006.01)C12P 1/02(2006.01) C12P 1/04(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/66(2006.01) C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 一种植物生长调节剂及其制备方法 (57)摘要 本发明提出了一种植物生长调节剂及其制 备方法， 属于植物生长调节剂技术领域， 将玉米 秸秆、 荞麦种子和油菜花粉混合后， 经过复合酶 酶解得到的酶解产物中接种酵母菌、 枯草芽孢杆 菌和紫红曲霉进行发酵， 得到发酵产物， 与助剂、 水混合均匀， 得到植物生长调节剂。 本发明制得 的植物生长调节剂能促进种子生根， 促进植物发 芽、 长苗， 利于苗齐苗壮， 增强植物耐旱耐涝性 能、 抗逆性， 提高耐病耐虫耐菌的效果， 显著提高 作物产量， 成分安全无毒， 易于降解， 不会造成环 境污染， 具有良好的应用前 景。 权利要求书3页 说明书13页 附图1页 CN 115380924 A 2022.11.25 CN 115380924 A 1.一种植物生长调节剂的制备方法， 其特征在于， 将玉米秸秆、 荞麦种子和油菜花粉混 合后， 经过复合 酶酶解得到的酶解产 物中接种酵母菌、 枯草芽孢杆菌和紫红曲霉进 行发酵， 得到发酵产 物， 与助剂、 水混合均匀， 得到植物生长调节剂； 所述复合酶为纤维素酶、 木瓜蛋 白酶和果胶酶的复配混合物。 2.根据权利要求1所述的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S1.组合物的制备： 将玉米秸秆、 荞麦种子和油菜花粉分别洗净， 干燥， 粉碎， 混合均匀， 得到组合物； S2.酶解： 将步骤S1中组合物加入水中， 加入复合酶酶解， 灭酶， 得到酶解产物； 所述复 合酶为纤维素酶、 木瓜蛋白酶和果胶酶的复配混合物； S3.酵母菌和枯草芽孢杆菌的活化： 将酵母菌和枯草芽孢杆菌分别接种到高氏培养基 中， 活化培 养， 然后培 养成活化菌种液； S4.紫红曲霉的活化： 将紫红曲霉接种到P DA培养基， 活化培 养， 得到活化 紫红曲霉； S5.紫红曲霉孢子悬浮液的制备： 将步骤S4中活化紫红曲霉加入无菌水， 用接种环刮取 琼脂表面， 使孢子被刮下， 收集孢子悬浮液， 振 荡， 用无菌滤纸过滤， 计数， 重新加入无菌水， 得到紫红曲霉孢子悬浮液； S6.液体培养基的制备： 将碳源、 氮源、 维生素和无机盐用无菌水溶解， 混合均匀后， 用 PBS溶液调节培 养基pH值， 紫外线灭菌备用； S7.菌种种子液的制备： 将步骤S3中得到的酵母菌活化菌种液和枯草芽孢杆菌活化菌 种液， 以及步骤S5得到的紫红曲霉孢子悬浮液分别接种于步骤S6制得的液体培养基中， 培 养， 得到菌种种子液； S8.复合发酵菌液的制备： 将步骤S7得到的酵母菌、 枯草芽孢杆菌和紫红曲霉菌种种子 液等体积混合并稀释， 得到复合发酵菌液； S9.发酵： 将步骤S8制得的复合发酵菌液加入步骤S2制得的酶解产物中， 发酵， 过滤， 固 体用无菌水洗涤， 合并洗涤液和滤 液， 冷冻干燥， 得到发酵产物； S10.植物生长调 节剂的制备： 将步骤S9制得的发酵产物、 助剂和水混合均匀， 得到植物 生长调节剂。 3.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤S1中所述玉米秸秆、 荞麦种子和 油菜花粉的质量比为(5 ‑10)： (3‑5)： (2‑7)； 步骤S2中所述复合酶中纤维素酶、 木瓜蛋 白酶 和果胶酶的质量比为(5 ‑12)： (2‑5)： (1‑3)； 所述组合物、 水、 复合酶的质 量比为20： (70 ‑ 100)： (1‑3)； 所述酶解条件为3 5‑45℃酶解3 ‑5h。 4.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤S3 中所述酵母菌和枯草芽孢杆菌 的接种量为1 ‑3％和2‑4％； 所述活化培养的条件为35 ‑40℃， 培养 时间为24 ‑36h； 步骤S4中 所述紫红曲霉的接种量为3 ‑5％， 所述活化培养的条件为35 ‑40℃， 培养时间为2 4‑36h； 步骤 S5中所述 紫红曲霉孢子悬浮液的孢子浓度为105‑106个/mL。 5.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤S6中所述碳源选自糖蜜、 葡萄糖、 麦芽糖、 乳糖、 蔗糖、 果糖、 可溶性淀粉中的一种或几种混合； 所述氮源选自蛋白胨、 鱼粉、 氨 水、 尿素、 铵盐、 硝酸盐、 氨基酸； 所述维生素选自维生素C、 维生素B1、 维生素B2、 维生素B6、 维生素A、 维生素K、 维生素B12、 维生素D、 维生素E中的一种或几种混合； 所述无机盐选自氯 化钠、 氯化钾、 氯化钙、 硫酸镁、 氯化铁、 硫酸锌、 硫酸铜、 硫酸锰、 氯化锌、 氯化铜、 氯化锰中权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 115380924 A 2的一种或几种混合； 所述氨基酸选自丝氨酸、 甘氨酸、 苏氨 酸、 缬氨酸、 色氨酸、 亮氨酸、 丙氨 酸、 半胱氨酸、 甲硫氨酸、 赖氨酸、 异亮氨酸、 苯丙氨酸中的一种或几种混合； 所述碳源、 氮 源、 维生素、 无机盐和无菌水的质量比为(7 ‑12)： (2‑5)： (0.02 ‑0.15)： (0.4 ‑1)： 100； 所述培 养基pH值调节为6.7 ‑7.0。 6.根据权利 要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤S7中所述培养的条件为35 ‑40℃， 培养时间为36 ‑48h， 所述菌种种子液的含菌量为107‑108cfu/mL； 步骤S8中所述稀释倍数为 100‑200倍。 7.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤S9中所述复合发酵菌液和酶解产 物的质量比为2： (3 ‑5)； 所述发酵 条件为36‑38℃发酵培 养48‑72h。 8.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 步骤S10中所述助剂包括成膜剂、 增稠 剂、 分散剂、 润湿剂、 表面活性剂中的至少一种； 所述成膜剂 选自海藻粉、 羟甲基纤维素钠和 甲壳素中的至少一种； 所述增稠剂选自黄原胶、 羟甲基纤维素、 明胶、 海藻类、 石膏、 羟乙基 纤维素、 甲基纤维素、 硅酸镁铝和聚乙烯醇中的至少一种； 所述分散剂选自MorwetD ‑425、 Terspense ‑2500、 萘磺酸盐、 木质素磺酸盐和聚羧酸盐中的至少一种； 所述润湿剂选自十二 烷基硫酸钠、 Morwet  EFW、 聚氧乙烯烷基酚醚、 聚氧乙烯脂肪醇醚、 聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段 共聚物中的至少一种； 所述表 面活性剂 选自十二烷基苯磺酸钠、 十二烷基磺酸钠、 十二烷基 硫酸钠、 十六烷基苯磺酸钠、 十六烷基磺酸钠、 十六烷基硫酸钠、 十 八烷基苯磺酸钠、 十 八烷 基磺酸钠、 吐温 ‑80中的至少一种； 所述发酵产物、 助剂、 水的质量比为(2 ‑5)： (2‑4)： 100。 9.根据权利要求2所述的制备 方法， 其特 征在于， 具体包括以下步骤： S1.组合物的制备： 将5 ‑10重量份玉米秸秆、 3 ‑5重量份荞麦种子和2 ‑7重量份油菜花粉 分别洗净， 干燥， 粉碎， 混合均匀， 得到组合物； S2.酶解： 将20重量份步骤S1中组合物加入70 ‑100重量份 的水中， 加入1 ‑3重量份复合 酶， 35‑45℃酶解3 ‑5h， 105‑110℃灭酶10 ‑15min， 得到酶解产物； 复合酶为纤维素酶、 木瓜蛋 白酶和果胶酶的复配混合物， 质量比为(5 ‑12)： (2‑5)： (1‑3)； S3.酵母菌和枯草芽孢杆菌的活化： 将酵母菌和枯草芽孢杆菌分别接种到高氏培养基 中， 接种量分别为1 ‑3％和2‑4％， 35‑40℃活化培 养24‑36h， 然后培 养成活化菌种液； S4.紫红曲霉的活化： 将紫红 曲霉接种到PDA培养基， 接种量为3 ‑5％， 35‑40℃活化培养 24‑36h， 得到活化 紫红曲霉； S5.紫红曲霉孢子悬浮液的制备： 将步骤S4中活化紫红曲霉加入无菌水， 用接种环刮取 琼脂表面， 使孢子被刮下， 收集孢子悬浮液， 振荡10 ‑20min， 用无菌滤纸过滤， 计数， 重新加 入无菌水， 得到紫红曲霉孢子悬浮液， 孢子浓度为105‑106个/mL； S6.液体培养基的制备： 将7 ‑12重量份碳源、 2 ‑5重量份氮源、 0.02 ‑0.15重量份维生素 和0.4‑1重量份无机盐用100重量份无菌水溶解， 混合均匀 后， 用PBS溶液调节培养基pH值为 6.7‑7.0， 紫外线灭菌备用； S7.菌种种子液的制备： 将步骤S3中得到的酵母菌活化菌种液和枯草芽孢杆菌活化菌 种液， 以及步骤S 5得到的紫红曲霉孢子悬浮液分别接种于步骤S 6制得的液体培养基中， 35 ‑ 40℃培养