(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210603359.2 (22)申请日 2022.05.30 (71)申请人 西南大学 地址 400716 重庆市北碚区天生路2号 (72)发明人 周旭　索化夷　 (74)专利代理 机构 深圳博敖专利代理事务所 (普通合伙) 44884 专利代理师 王国亮 (51)Int.Cl. C12N 1/04(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/25(2006.01) (54)发明名称 一种植物乳杆菌复合冻干保护剂 (57)摘要 本发明属于微生物 技术领域， 公开了一种植 物乳杆菌复合冻干保护剂。 这株植物乳杆菌的名 称 为 植 物 乳 杆 菌 S 5 8 (LactobacillusplantarumS58)， 保藏在中国典 型培养物保藏中心， 保藏地址为湖北省武汉市武 昌区八一路299号； 保藏编号为CCTCCNO： M2019595。 植物乳杆菌复合冻干保护剂， 包括如 下成分： 脱脂奶粉9.24％， 青稞多糖5.62％， 谷氨 酸钠4.85％。 将植物乳杆菌菌液与复合冻干保护 剂液体按1:2比例进行冷冻干燥， 冻干存活率达 到90.49％。 本发明提供的冻干保护剂具有存活 率高、 低污染、 便 于保藏、 运输， 使用方便等优点。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115029247 A 2022.09.09 CN 115029247 A 1.一种植物乳杆菌复合冻干保护剂， 其特征在于， 所述保护剂组份具体如下： 脱脂奶 粉， 青稞多糖， 谷氨酸钠。 2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌复合冻干保护剂， 其特征在于： 脱脂乳粉、 青稞多 糖和谷氨酸钠加超纯水水， 并进行灭菌， 灭菌温度115℃， 灭菌时间20min， 完成灭菌后放置 到常温。 3.根据权利要求1 ‑2所述植物乳杆菌复合冻干保护剂， 其特征在于： 所述脱脂奶粉含量 为9.24％。 4.根据权利要求1 ‑2所述植物乳杆菌复合冻干保护剂， 其特征在于： 所述青稞多糖含量 为5.62％。 5.根据权利要求1 ‑2所述植物乳杆菌复合冻干保护剂， 其特征在于： 所述谷氨酸钠含量 为4.85％。 6.根据权利要求1所述植物乳杆菌复合冻干保护剂应用方法， 其特征在于， 所述方法具 体如下： 在植物乳杆菌发酵培养到对数生长稳定期18h， 将发酵液4℃， 4000rpm， 10min离心 得到菌泥， 用0.9％无菌生理盐水洗涤两次得到菌泥； 按照菌泥与复合冻干 保护剂体积比1: 1加入灭菌的脱脂奶粉、 青稞多糖、 谷氨酸钠。 7.根据权利要求6所述的植物乳杆菌复合冻干保护剂， 其特征在于， 在 ‑80℃冷冻冰箱 中进行预冷冻处理3h ‑5h， 然后进行真空冷冻干燥， 冷阱温度 ‑40℃左右， 真空度10Pa， 干燥 24h后得到植物乳杆菌 干粉， 冻干存活率达 到90.49％。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115029247 A 2一种植物乳杆菌复合冻干保护剂 技术领域 [0001]本发明涉及一种植物乳杆菌复合冻干保护剂， 属于微 生态制剂工艺 技术领域。 背景技术 [0002]植物乳杆菌是一种革兰氏阳性、 兼性厌氧细菌， 因其促进健康的特性而被用作食 品补充剂或发酵剂。 植物乳杆菌可以天然定植于人类胃肠道， 因其益生菌特性而受到人们 的高度重视。 植物乳杆菌过程保藏过程中， 为了避免菌体的衰 老死亡， 通常是将菌体的水分 去除， 以避免菌体的新陈代谢， 从而保存菌体。 通常使用的去除水分的方法是冷冻干燥法， 冷冻干燥又称升华干燥， 其基本原理是在低温低压下传热传质。 冷冻干燥过程会对菌体细 胞造成一定的伤害甚至使菌体死亡， 主要原因包括冻干过程中形成的冰晶将菌体撑破和部 分蛋白变性等， 降低了菌种的存活率， 对生产十分不利。 在实际生产中通常采用各种保护剂 以保护菌体免遭破坏。 [0003]冻干保护剂根据不同的标准可以分成不同的类别， 按其作用方式可分为渗透型和 非渗透型； 按分子大小分为低分子和高分子化合物； 根据其性质又可分为多元醇类， 糖类， 氨基酸类， 蛋白质及肽类， 聚合物类， 其他类型 的保护剂等。 保护剂 中蛋白类如乳清蛋白等 保护机理为蛋白类可以在细胞外形成一层致密的蛋白保护 层， 通过蛋白保护 层阻止细胞与 外界的接触， 降低氧、 营养物等与菌体接触的几率， 进而减少 菌体体内的代谢， 最终达到稳 定益生菌在冷冻干燥过程的活性。 保护剂中的多糖类如 海藻糖、 透明质酸钠等作用机理是： 多糖类的氢键等可以与微生物细胞膜上 的糖蛋白等结合， 使细胞 的功能蛋白、 多糖等相对 稳定； 多糖类可以在微生物细胞膜周围形成玻璃 化的保护壳， 保护益生菌的空间结构稳定。 保护剂从外层 包裹着菌体， 极大地减少了它们 与氧的接触， 进而降低了细胞代谢死亡率。 冻 干保护剂既可以提高菌体在冻干过程中的存活率， 又 可以巩固其在后期保藏时的稳定性。 [0004]此外， 菌体与保护剂的配比会影响冻干后细胞存活率。 若保护剂太少， 会有大量细 胞膜裸露在介质中， 在冻干时就可能改变细胞通透性， 不能起到保护菌体的作用； 若保护剂 太多， 细胞的渗透压和通透性也会受影响。 另外， 几种物质的复合物较单一保护剂有 更好效 果。 因此， 对复合冻干保护剂进行响应面试验， 选出最优配比， 提高菌体在冻干和储藏过程 中的稳定性和存活率， 对于 工业生产具有重要的意 义。 发明内容 [0005]为解决上述问题， 本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌复合冷冻干燥保护剂。 [0006]为了实现上述目的， 本发明提供如下技 术方案： [0007]一种植物乳杆菌复合冻干保护剂， 包括如下成分： 脱脂乳粉、 青稞多糖和谷氨酸 钠。 [0008]进一步的， 按植物乳杆菌 菌液的重量百分比计， 包括如下成分： [0009]脱脂奶粉1％ ‑20％ [0010]青稞多糖2％ ‑10％说　明　书 1/5 页 3 CN 115029247 A 3