(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211007139.X (22)申请日 2022.08.22 (71)申请人 武汉大学 地址 430072 湖北省武汉市武昌区珞珈山 街道八一路2 99号 (72)发明人 朱联东　顾若婷　刘辰辰　 (74)专利代理 机构 武汉科皓知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 42222 专利代理师 常海涛 (51)Int.Cl. C12N 11/14(2006.01) C12N 1/20(2006.01) B09C 1/10(2006.01) C09K 17/42(2006.01) C12R 1/40(2006.01)C12R 1/645(2006.01) (54)发明名称 一种改性生物炭固定化多环芳烃降解混合 菌剂及其制备与应用 (57)摘要 本发明公开了一种改性生物炭固定化多环 芳烃降解混合菌剂及其制备与应用， 属于环境污 染生物处理技术领域。 本发明的改性生物炭固定 化多环芳烃降解混合菌剂包括MnO2改性生物炭、 以及固定在MnO2改性生物炭上的微生物菌群， 所 述的微生物为恶臭假单胞菌(Pseudomonas   putida)和黄孢原毛平革菌(Phanerochaete   chrysosporium  burdsall)。 本发明的菌剂具有 良好的生物活性， 可实现对土壤中多环芳烃的高 效降解。 权利要求书1页 说明书5页 附图3页 CN 115369108 A 2022.11.22 CN 115369108 A 1.一种改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂， 其特征在于： 包括MnO2改性生物炭、 以及固定在MnO2改性生物炭上的微生物菌群， 所述的微生物为恶臭假单胞菌和黄孢原毛平 革菌。 2.根据权利要求1所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂， 其特征在于： 所述 的MnO2改性生物炭通 过包括以下步骤的方 法制备得到： 将生物炭和M nSO4加入到水中充分混 合， 搅拌下 再滴入KMnO4溶液， 混匀后静置老化， 过 滤、 洗涤、 干燥， 得到 MnO2改性生物炭。 3.根据权利要求2所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂， 其特征在于： 所述 的KMnO4溶液的浓度为10 ‑20g/L。 4.根据权利要 求2所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解 混合菌剂， 其特征在于： MnSO4 与KMnO4的摩尔比为1.5:1。 5.根据权利要求2所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂， 其特征在于： 所述 的静置老化的条件为室温静置24 ‑48h； 所述的干燥的条件为80 ‑90℃、 7‑9h。 6.权利要求1 ‑5任一项所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂的制备方法， 其特征在于： 包括以下步骤： 将灭菌的MnO2改性生物炭加入到灭菌的培养基中充分浸润， 加 入黄孢原毛平革菌和恶臭假单细胞菌进行培养， 得到改性生物炭固定化多环芳烃降解混合 菌剂。 7.根据权利 要求6所述的制备方法， 其特征在于： 培养基与改性生物炭的比例为1 ‑2mL/ g； 浸润的时间为10 ‑15h； 黄孢原毛平革菌和恶臭假单细胞菌的加入比例为1:1。 8.权利要求1 ‑5任一项所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂在降解多环芳 烃中的应用。 9.权利要求1 ‑5任一项所述的改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂在修复多环芳 烃污染土壤中的应用。 10.根据权利要求8或9所述的应用， 其特 征在于： 所述的多环芳烃包括萘、 菲、 芘。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115369108 A 2一种改性生物炭固定化多环 芳烃降解混合菌剂及其制备与 应用 技术领域 [0001]本发明属于环境污染生物处理技术领域， 涉及一种改性生物炭固定化多环芳烃降 解混合菌剂的及其制备及与应用。 背景技术 [0002]多环芳烃(Polycyclic  Aromatic Hydrocarbons， PAHs)是一类广泛存在于环境中 的有机污染物， 由两个或两个以上稠合苯环组成的芳香族碳氢化合物， 主要源于石油、 煤等 化石燃料以及木材、 天然气、 秸秆等有机物的不完全燃烧或在 还原条件下经热分解而生 成， 土壤是环境中PAHs的最终去向。 多环芳烃具有长期残 留性、 生物蓄积性以及致癌、 致畸、 致 突变的特性， 由于高疏水性和高立体化学稳定性的特点， 它极易在环境中累积并在食物链 中进行富集， 对人类的健康和生态环境的安全构成极大的威胁。 环境中的PAHs可通过呼吸 道、 皮肤、 消化道进入人体， 对肝、 肾等脏器以及神经系统、 生殖系统产生损害作用， 且伤害 人体免疫系统。 因此， 对PAHs污染土壤的修复尤为重要。 [0003]微生物修复是一种低成本、 高效益和环境友好的修复方法。 然而， 在实际应用中直 接向污染土壤中投加游离微生物的修复方法， 由于游离微生物难以适应复杂环境而不能有 效发挥作用， 导致游离微生物活性低， 降解效果不理想。 微生物固定化技术是微生物修复的 一种， 与游离微生物降解相比具有生物量高、 不易流 失和抗毒害能力强的优点， 在PAH s污染 环境修复中受到广泛关注。 [0004]生物炭是由农业废弃物等生物质热解产生的富碳固体， 具有多孔结构和大的比表 面积， 有利于微生物附着生长并能够抵御不良条件侵害。 生物炭表面丰富的营养元素能为 微生物生长提供营养。 然而， 有限的吸附能力限制了生物炭在实际中的应用。 因此将改性生 物炭作为固定化载体负载混合菌剂用于污染土壤中PAH s修复是一种绿色环保、 且高效的修 复技术。 发明内容 [0005]本发明的首要目的在于提供一种改性 生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂。 [0006]本发明的另一目的在于提供所述改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂的制 备方法。 [0007]本发明的再一目的在于提供所述改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂的应 用。 [0008]本发明的目的通过以下技 术方案实现： [0009]一种改性生物炭固定化多环芳烃降解混合菌剂， 包括MnO2改性生物炭、 以及固定 在MnO2改性生物炭上的微生物菌群， 所述的微生物为恶臭假单胞菌(Pseudomonas  putida) 和黄孢原毛平革菌(Phaneroc haete chrysosporium  burdsall)。 [0010]所述的MnO2改性生物炭通过包 括以下步骤的方法制备得到： 将生物炭和MnSO4加入说　明　书 1/5 页 3 CN 115369108 A 3