(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211092048.0 (22)申请日 2022.09.08 (71)申请人 上海现代制药股份有限公司 地址 200131 上海市浦东 新区建陆路378号 (72)发明人 高芸　倪峰　刘海良　李辉　 邢世华　周昊　 (51)Int.Cl. C12P 19/26(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/045(2006.01) (54)发明名称 一种提高阿卡波糖产量的发酵工艺 (57)摘要 本发明公开了一种提高阿卡波糖产量的发 酵工艺， 涉及生物工程技术领域， 方法包括以下 步骤： 将阿卡波糖生产菌接种于基础发酵培养基 中； 25‑27℃下发酵； 向培养基中加入包括刀豆 素 A和透明质酸的添加物A， 调整参数继续发酵； 向 培养基中加入包括N ‑乙酰神经氨酸、 2， 5 ‑二巯 基‑134‑噻二唑的添加物B， 调整参数继续发酵； 发酵结束后， 所得发酵液进行分离提取， 得到阿 卡波糖。 本发 明仅通过在发酵过程中在特定时段 加入特定添加物， 并调整发酵参数 （温度和培养 基pH） ， 这样非常简单的手段， 即可显著提升阿卡 波糖发酵产量， 生产和检测成本大 大降低。 权利要求书1页 说明书7页 CN 115161365 A 2022.10.11 CN 115161365 A 1.一种提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特 征在于： 包括以下步骤： S1、 将阿卡波糖生产菌 接种于基础发酵培 养基中； S2、 25‑27℃下发酵； S3、 向培养基中加入 包括刀豆素A和透明质酸的添加物 A， 调整参数继续发酵； S4、 向培养基中加入包括N ‑乙酰神经氨酸、 2， 5 ‑二巯基‑1， 3， 4‑噻二唑的添加物B， 调整 参数继续发酵； S5、 发酵结束后， 所 得发酵液进行分离提取， 得到阿卡波糖。 2.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S2所述发酵， 初 始发酵pH为6.4 ‑6.6。 3.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S3所述添加物A 中， 刀豆素A和透明质酸的质量比为(20 ‑35):1。 4.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S3所述添加物A 的加入时间为： 第一次加入时间为发酵第8 ‑10h， 第二次加入时间为发酵第14 ‑20h。 5.根据权利要求4所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S3第 一次加入添 加物A后， 培养基中刀豆素A的浓度为2.0 ‑3.3g/L； 第二次加入 添加物A后， 培养基中刀豆素A 的浓度为3.5 ‑4.7g/L。 6.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S3所述调整参 数， 包括调节培 养基pH至6.8‑7.0， 调节发酵温度至 30‑32℃。 7.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S4所述添加物B 中， N‑乙酰神经氨酸与2， 5 ‑二巯基‑1， 3， 4‑噻二唑的质量比为(1.7 ‑5.5):1。 8.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S4所述添加物B 的加入时间为发酵第5 5‑70h。 9.根据权利要求7所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S4加入添加物B 后， 培养基中2， 5 ‑二巯基‑1， 3， 4‑噻二唑的浓度为5.5 ‑9.0g/L。 10.根据权利要求1所述的提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 其特征在于： S4所述调整参 数， 包括调节培 养基pH至6.5‑6.7， 调节发酵温度至27 ‑30℃。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115161365 A 2一种提高阿卡波糖产量的发酵工艺 技术领域 [0001]本发明涉及 生物工程技术领域， 具体涉及发酵技术中的提高阿卡波糖产量的发酵 工艺。 背景技术 [0002]阿卡波糖(Acarbose)为一种α ‑葡萄糖苷酶抑制剂， 是复杂的低聚糖， 其结构类似 寡糖， 这种非寡糖的 “假寡糖”可在小肠上部细胞刷状缘处和寡糖竞争而与α ‑葡萄糖苷酶可 逆地结合， 抑制各种α ‑葡萄糖苷酶如麦芽糖酶、 异麦芽糖酶、 葡萄糖淀粉酶及蔗糖酶的活 性， 使淀粉分解成寡糖如麦芽糖(双糖)、 麦芽三糖及糊精(低聚糖)进而分解成葡萄糖的速 度减慢， 使蔗糖分解成葡萄糖和果糖的速度减慢， 因此造成肠道葡萄糖的吸收减缓， 从而缓 解餐后高血糖， 达 到降低血糖的作用。 长期服用， 可降低空腹血糖和糖化血红蛋白的浓度。 [0003]目前糖尿病已经成为 一种常见病， 阿卡波糖的市场需求 量不断增加。 [0004]目前国内外阿卡波糖的生产都是利用微生物发酵法制备而得到， 其中游动放线菌 应用的最为广泛。 人们对阿卡波糖产量提升的技术开发， 主要集中在诱变选育新菌种以及 优化发酵培养基、 控制碳源浓度曲线、 控制渗透压等， 但目前来讲， 对发酵培养基现有常见 组分的优化已经不能进一步提高产量， 控制参数不仅检测控制方面需要专用设备， 设备较 为昂贵， 且 对阿卡波糖产量 提升的贡献并不显著。 发明内容 [0005]未解决上述问题， 本发明提供一种通过调整培养基组分， 加入新组分及发酵过程 中分时段控制 培养基组分的方法， 以较低的成本， 在同等条件下取得了更高的阿卡波糖产 量， 具体方案如下： 一种提高阿卡波糖产量的发酵工艺， 包括以下步骤： S1、 将阿卡波糖生产菌 接种于基础发酵培 养基中； S2、 25‑27℃下发酵； S3、 向培养基中加入 包括刀豆素A和透明质酸的添加物 A， 调整参数继续发酵； S4、 向培养基中加入包括N ‑乙酰神经氨酸、 2， 5 ‑二巯基‑1， 3， 4‑噻二唑的添加物B， 调整参数继续发酵； S5、 发酵结束后， 所 得发酵液进行分离提取， 得到阿卡波糖。 [0006]优选地， S1所述阿卡波糖生产菌包括现有公开的可生产阿卡波糖的游动放线菌 。 [0007]优选地， S1所述基础发酵培 养基包括 碳源、 氮源、 微 量元素。 [0008]优选地， 所述 碳源包括葡萄糖、 乳糖、 麦 芽糖中的一种或二种以上。 [0009]进一步优选地， 所述 碳源包括葡萄糖和麦 芽糖， 二者质量比为(0.7 ‑1.3):1。 [0010]优选地， 所述氮源 包括肉汁、 酵母膏、 蛋白胨中的一种或二种以上。 [0011]进一步优选地， 所述氮源 包括酵母膏和蛋白胨， 二 者质量比为1:2。 [0012]优选地， 所述微量元素包括Na盐、 K盐、 Ca盐、 Mg盐、 Fe盐、 Mn盐、 Zn盐、 Co盐或Ni盐中说　明　书 1/7 页 3 CN 115161365 A 3