(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210960002.X (22)申请日 2022.08.11 (66)本国优先权数据 202210495480.8 202 2.05.07 CN (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24223 2022.01.02 (71)申请人 青岛农业大 学 地址 266000 山东省青岛市城阳区长城路 申请人 青岛慧和生物科技有限公司 (72)发明人 王宝维　杨铸钰　邹函峪　王秉翰　 张名爱　凡文磊　孔敏　 (74)专利代理 机构 北京识然知识产权代理事务 所(普通合伙) 11975 专利代理师 曾庆国(51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) A23K 10/18(2016.01) A23K 50/75(2016.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/145(2006.01) (54)发明名称 一种提高凝结芽孢杆菌中亚铁离子含量的 方法和复合菌剂 (57)摘要 本发明提供一种提高凝结芽孢杆菌中铁离 子含量的方法， 是在富含铁离子的培养基中同时 发酵培养凝结芽孢杆菌和丁酸梭菌； 所述的培养 基中铁离子的浓度为2 50～350.0mg/L。 其中所使 用的凝结芽孢杆菌在含有高浓度铁离子的培养 基中经过了驯化， 其一种是保藏编号为CGMCC   No.24223的凝结芽孢杆菌菌株。 本发明还提供一 种复合菌剂， 包含有驯化的凝结芽孢杆菌和丁酸 梭菌。 本发 明将经过高铁离子驯化的凝结芽孢杆 菌菌株与丁酸梭菌联合培养， 即可以提高凝结芽 孢杆菌的数量， 而且有效的提高驯化后的凝结芽 孢杆菌菌株中的小肽含量； 发酵产物能有效地增 强动物免疫力， 抑制有害菌， 维护肠道健康， 促进 生长发育， 提高饲料利用率。 权利要求书1页 说明书8页 附图2页 CN 115141781 A 2022.10.04 CN 115141781 A 1.一种提高凝结芽孢杆菌中铁离子含量的方法， 其特征在于， 所述的方法是在富含铁 离子的培养基中同时发酵培 养凝结芽孢杆菌和丁 酸梭菌。 2.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述的培养基中铁离子的浓度为250～ 350mg/L。 3.如权利要求2所述的方法， 其特 征在于， 所述的培 养基中铁 离子的浓度为3 00mg/L。 4.如权利 要求1所述的方法， 其特征在于， 所述的培养基的组成如下： 蛋白胨5～15g/L， 牛肉浸粉1～5g/L， NaCl  1～10g/L， F e2+浓度250～350.0mg/L， pH值5.5～7.9 ±0.2。 5.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述的凝结芽孢杆菌在含有高浓度亚铁离子 的培养基中经 过了驯化。 6.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述的凝结芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC   No.24223。 7.一种复合菌剂， 其特 征在于， 所述的复合菌剂中包 含有凝结芽孢杆菌和丁 酸梭菌。 8.如权利要求7所述的复合菌株， 其特征在于， 所述的凝结芽孢杆菌株与丁酸梭菌的数 量比为1︰ 1～ 2。 9.如权利要求7或8所述的复合菌株， 其特征在于， 所述的凝结芽孢杆菌株在含有高浓 度亚铁离子的培养基中经 过了驯化。 10.如权利要求9所述的复合菌株， 其特征在于， 所述的凝结芽孢杆菌株的保藏编号为 CGMCC No.24223。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115141781 A 2一种提高凝结芽孢杆菌中亚 铁离子含量的方 法和复合菌剂 技术领域 [0001]本发明属于畜禽微生态制备技术领域， 具体涉及 一种提高凝结芽孢杆菌中铁离子 (Fe2+)含量的方法和复合菌剂。 背景技术 [0002]饲料中常用无机铁和有机铁之分。 动物 机体吸收 的是亚铁离子(Fe2+)， 也就是二价 铁。 不管是有机还是无机铁到机体后能解离出亚铁离子(Fe2+)的都能收。 然而， 二价铁(Fe2 +)在有氧环境中很容易被氧化成三价铁(Fe3+)， 影响铁离子吸收。 三价铁(Fe3+)在体内吸收 只为二价铁(Fe2+)三分之一。 有机 铁源生物学效价高于无机 铁源。 [0003]在畜禽养 殖领域中， 饲料中添加适宜二价铁离子(Fe2+)能够促进畜禽生长发育， 增 强蛋禽蛋蛋壳质量。 据报道， 铁消化 吸收利用率很低， 畜禽饲料中铁吸收率仅10％～25％。 饲料中直接添加的铁大部分被排出到机体外； 尤其是规模化畜禽养殖中， 粪污排放到环境 中铁离子的含量很高， 日积月累后很容易造成水体富营养化， 并导致畜禽产品含量高， 从而 危及食品安全和整个生态环境。 因此， 探究一种既满足促进 畜禽正常生长发育、 维护 肠道健 康和提高家禽蛋壳强度， 又能够减少 铁排放量的方法， 对畜禽养殖营养精准化和维护生态 良好循环具有重大意 义。 [0004]在申请人之前的研究中发现， 在发酵过程中， 凝结芽孢杆菌能够迅速消耗外环境 或动物肠道中的游离氧， 造成环境或动物肠道低氧， 大大减少二价铁(Fe2+)在有氧环境中被 氧化成三 价铁(Fe3+)， 保持二 价铁(Fe2+)吸收活性。 [0005]然而， 没有经过驯化的凝结芽孢杆菌对金属富集具有 一定的惰性， 尤其是对Fe2+富 集是十分有限的。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供一种提高凝结芽孢杆菌中铁离子含量的方法， 从而有效的提 高凝结芽孢杆菌中的铁 离子的含量， 弥补现有技 术的不足。 [0007]本发明所提供的提高凝结芽孢杆菌中铁离子(Fe2+)含量的方法， 是在富含铁离子 的培养基中同时发酵培 养凝结芽孢杆菌和丁 酸梭菌； [0008]所述的培 养基中铁 离子的浓度为25 0～350.0mg/L； 优选为3 00.0mg/L。 [0009]作为实施例的具体记载， 所述的培养基的一种具体组成如下： 蛋白胨 5～15g/L， 牛 肉浸粉1～5g/L， NaCl  1～10g/L， F e2+浓度250～350.0mg/L， pH值5.5～7.9 ±0.2。 [0010]更进一步的， 所述的凝结芽孢杆菌在含有高浓度F e2+离子的培养基中经 过了驯化。 [0011]所述的凝结芽孢 杆菌菌株， 为凝结芽孢 杆菌(Bacillus  coagulans)耐铁凝结芽孢 杆菌NT68株， 于2022年1月2日保藏在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号， 中国科学院微 生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏编号为CGMCC   No.24223。 [0012]本发明还提供一种复合菌剂， 包 含有驯化的凝结芽孢杆菌和丁 酸梭菌；说　明　书 1/8 页 3 CN 115141781 A 3