(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210850434.5 (22)申请日 2022.07.19 (83)生物保 藏信息 CGMCC No： 24850 2022.05.09 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 申请人 浙江浩迈科技有限公司 (72)发明人 周文文　解婉悦　何昱霄　蒋锦杰　 郭文华　陈红　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 专利代理师 郑海峰 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)A61K 35/742(2015.01) A61P 17/00(2006.01) A61P 31/10(2006.01) A61K 8/99(2017.01) A61Q 5/02(2006.01) A61Q 5/12(2006.01) A61Q 17/00(2006.01) A61Q 19/10(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌及其 应用 (57)摘要 本发明公开了一种抑制马拉色菌的多粘类 芽孢杆菌(Paenibacillus  polymyxa)及其应用。 该多粘类芽孢杆菌JWYB12现保藏于中国微生物 菌种保藏管 理委员会普通微生物中心， 保藏号为 CGMCC No： 24850。 本发明经过16S  rDNA菌种鉴定 确定JWYB12为多粘类芽孢杆菌。 其对马拉色菌的 抑制作用明显， 可将其应用到包括花斑癣、 马拉 色菌毛囊炎、 脂溢性皮炎、 特征性皮炎在内的马 拉色菌过度繁殖所导致的皮肤病的预防和治疗 中， 还可以应用到日常洗化产品中用于抗头皮 屑， 具有安全性高、 作用明显、 成本较低、 生产较 快、 绿色环保等优点。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115491327 A 2022.12.20 CN 115491327 A 1.一种多粘类芽孢杆菌， 其特征在于： 保藏名称为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus   polymyxa)JWYB12， 现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏号为 CGMCC No： 24850， 保藏日期为202 2年5月9日。 2.一种基于 权利要求1所述多粘类芽孢杆菌的发酵 方法， 其特 征在于包括如下步骤： 1)将冻存的多粘类芽孢杆菌取出， 于LB固体培养基上划线培养， 置于28 ‑37℃培养箱中 16‑24h； 划取固体培养基上的单菌落， 于发酵液体培养基中， 28 ‑37℃、 150 ‑200rpm摇床培养 16‑24h后完成活化； 2)取活化好的多粘类芽孢杆菌， 按照1 ‑3％的接种比例接种到发酵液体培养基中， 28 ‑ 37℃、 150‑200rpm摇床培 养36‑48h后取出； 得到发酵 液。 3.如权利要求2所述的发酵方法， 其特征在于： 其所需要的发酵液体培养基的配置方法 是在每1L水中添加蔗 糖50g， 胰蛋 白胨5g， 酵母浸粉1g， 磷酸氢二钠3g， 然后 经过115℃灭菌 20min。 4.如权利要求2所述的发酵方法， 其特征在于： 所述LB固体培养基的配方是在每1L水中 添加胰蛋白胨10g， 酵母 浸粉5g， 氯化钠10g， 琼脂20g， 然后经 过121℃灭菌15mi n。 5.权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌在抑制马拉色菌生长中应用。 6.权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌在制备预防和治疗皮肤疾病的药物中的应用， 其 特征在于： 所述皮肤病是指因马拉色菌过度繁殖导 致的疾病。 7.权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌在制备洗化产品上的应用。 8.一种马拉色菌抑制剂， 其特征在于包括权利要求1所述的多粘类芽孢杆菌， 或权利要 求2所述方法得到的发酵 液， 或基于上述发酵 液制备的产物。 9.根据权利要求8所述的马拉色菌抑制 剂， 其特征在于， 所述的基于发酵液制备的产物 的制备方法为： 将权利要求2方法所得的发酵液离心吸去上清液， 加入相同体积的生理盐水 吹打混匀后配成原菌液。 10.根据权利要求8所述的马拉色菌抑制剂， 其特征在于， 马拉色菌抑制剂中多粘类芽 孢杆菌的浓度不低于1.7 ×104CFU/mL。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115491327 A 2一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及医药与日化领域， 具体涉及一种抑制马拉色菌 的多粘类芽孢杆菌， 及 其在医药 领域与日化领域上的应用。 背景技术 [0002]马拉色菌是一种条件致病菌， 在人群皮肤毛发样品中可以检出， 有些未展现危害， 但当某些内外条件改变时会引起马拉色菌过度繁殖， 导致花斑癣、 马拉色菌毛囊炎、 脂溢性 皮炎、 特征性皮炎等皮肤疾病， 严重影响人们的生活质量， 同时给人们造成精神困扰。 因此 寻找一种能够抑制马拉色菌过度繁殖的药物刻不容缓。 酮康唑、 伊 曲康唑等 唑类抗真菌剂 曾因效果明显而备 受患者们的青睐， 但随着时间的推移， 人们发现此类药物存在副作用大、 容易复发等问题， 一些新型的抗马拉色菌制剂开 发也在不断探索中(朱敏.中草药及其单体 抗马拉色菌作用的研究[ D].复旦大 学,2003)。 [0003]作为类芽孢杆菌属的模式菌， 多粘类芽孢杆菌具有革兰氏染色呈阳性、 好氧或兼 性厌氧、 能产生芽孢、 抗逆性强等特点(和林松,陶玲庆,韦露萍,等.多粘类芽孢杆菌胞外多 糖的功能研究进展[J].安徽农学通报,2022,28(06):41 ‑45.)， 在自然界中广泛存在。 近些 年来多粘类芽孢 杆菌的研究主要集中于以下两个方面： 一是多粘类芽孢 杆菌本身在生物防 治方面上的应用， 抑制植物病原菌贮藏腐败菌， 例如防治小麦赤霉病、 燕麦根腐病和葡萄霜 霉病等； 二是其生产的胞外多糖、 抗菌肽为代表的代谢产物所具有的生理功能， 包括抑菌特 性、 抗氧化性、 免疫活性和抗肿瘤活性等。 综合前人研究， 尚未发现多粘类芽孢杆菌在抑制 马拉色菌方面的报道。 [0004]近期Nature子刊中的一篇文章介绍一种新的皮肤病治疗模式， 该模式认为特征性 皮炎等皮肤疾病处于菌群失调的状态， 应该在皮肤上重新接种有益微生物去治疗， 而不是 使用药物(Schmidt  C.Out of your skin[J].Nature  Biotechnology,  2020,38(4):392 ‑ 397.)。 该治疗模式受到了较大的关注， 不少公司或科研团队纷纷投入其中， 例如美国的 MatriSys  Biosciences公司。 该公司声称其开发的人葡萄球菌制剂可以通过抑制金黄色葡 萄球菌的生长用于治疗特征性皮炎。 目前皮肤微生态研究是化妆品公司为主导。 多家化妆 品公司瞄准微生态化妆品市场， 将皮肤微生态作为研发的焦点， 以益生菌、 益生元、 后生元 等作为研究对象， 希望开发出 具有显著护肤效果的洗化产品。 发明内容 [0005]本发明的目的是提供一种能够抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌， 使其能在医药领 域和日化领域能作为益生菌调节皮肤微生态， 从而为治疗或缓解某些皮肤问题提供新方 案， 扩展芽孢杆菌在日化和医药 领域应用。 [0006]本发明公开了一种抑制马拉色菌的多粘类芽孢杆菌JWYB12， 其经过16S  rDNA菌种 鉴定确定为多粘类芽孢杆菌， 现保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏号为CGMCC  No： 24850， 保藏日期为2022年5月9  日。 体外抑菌实验显示多粘类芽孢杆菌说　明　书 1/5 页 3 CN 115491327 A 3