(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221074197 7.3 (22)申请日 2022.06.28 (71)申请人 中国农业大 学 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 丁国春　李蕙秀　 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 马欢欢 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 11/14(2006.01) C05F 17/20(2020.01) C05G 3/60(2020.01) A01N 63/22(2020.01) A01N 25/08(2006.01)A01P 1/00(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/085(2006.01) (54)发明名称 一种抑制番茄青枯病的复合微生物菌剂及 强化堆肥的制备方法 (57)摘要 本发明涉及微生物菌肥技术领域， 提供了一 种抑制番茄青枯病的复合微生物菌剂及强化堆 肥的制备方法， 包括复合微生物和载体， 所述复 合微生物包括甲基营养 型芽孢杆菌BOX 10和蜡样 芽孢杆菌BOX11； 所述菌剂中各菌的浓度分别为 1.0×109～5.0×109CFU/g。 本发明所述复合微 生物菌剂能够有效降低青枯病的发病率， 防治效 果能够提高60～73％。 将复合微生物菌剂作为菌 肥施用到土壤中能够改善土壤和根际微生物环 境、 抑制番 茄青枯病和促进植物生长 。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图1页 CN 115011525 A 2022.09.06 CN 115011525 A 1.一种抑制番茄青枯病的复合微生物菌剂， 其特征在于， 包括复合微生物和载体， 所述 复合微生物包括甲基营养型芽孢杆菌BOX10和蜡样 芽孢杆菌BOX11； 所述菌剂中各菌的浓度 分别为1.0 ×109～5.0×109CFU/g。 2.根据权利要求1所述的复合 微生物菌剂， 其特 征在于， 所述载体为硅藻土 。 3.权利要求1或2所述复合 微生物菌剂的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)将甲基营养型芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌单独进行发酵培 养， 得到发酵菌液后混合； (2)将步骤(1)得到的发酵菌液与载体混合， 干燥后得到 菌剂干粉。 4.根据权利要求3所述复合微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述发酵 培养的培养基包括以下重量份的组分： 麸皮60～70份， 豆粕粉25～35份， 玉米浆粉1～4份， KH2PO4 0.1～0.5份， MgSO4 0.2～1份， MnSO4 0.01～0.05份， CaCO3 3～6份， 水180～220份， 所述发酵培 养基的pH值6.8～7.3 。 5.根据权利要求3所述复合微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中发酵菌液 与载体的比例为1～ 2mL:1～2g。 6.根据权利要求3所述复合微生物菌剂的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中干燥的温 度为55～65℃， 干燥的时间为24～3 6h； 所述菌剂干粉的含水率<10％。 7.利用权利要求1所述复合微生物菌剂发酵制备菌肥的方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： 调整有机废弃物的碳氮比为25～30， 调整有机废弃物的含 水率为55～65％进行发酵， 发 酵7～12d后温度降至 38～45℃时添加复合 微生物菌剂， 再发酵2 ～3天， 陈化后得到 菌肥。 8.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述有机废弃物为蘑菇渣、 畜禽粪便和秸 秆中的一种或几种。 9.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述发酵过程中采用间息式曝气方法进行 曝气， 所述曝气的时间为10～ 20min/h， 所述曝气的强度为10～10 0L·L‑1·min‑1。 10.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述复合微生物菌剂与有机废弃物的体 积比为1～3∶ 10 0。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115011525 A 2一种抑制番茄青枯病的 复合微生物菌剂及强化堆肥的制备 方法 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物菌肥技术领域， 尤其涉及一种抑制番茄青枯病的复合微生物菌 剂及强化 堆肥的制备 方法。 背景技术 [0002]青枯病广泛分布于热带或亚热带地区， 能够危害50多个科200多种植物， 如番茄、 茄子、 花生、 香蕉、 烟草等重要的经济作物。 导致青枯病的青枯雷尔氏菌(Ralstonia   solanacearum)能够在土壤中进入假死状态长期存活。 据报道， 我国有30多个省份均有青枯 病的发生， 南方地区发病严重。 随着全球气候变暖和温室大棚种植推广， 青枯病的危害程度 会不断加大， 且发病范围有逐渐北移的趋势。 在青枯病的防治方面尚缺乏高效的化学药剂， 而土壤熏蒸等方式较为昂贵， 农民常常采取在发病地块弃种寄主作物的方式来防治青枯 病。 因此， 寻 求绿色、 高效、 环境友好和可 行的策略来预防或抑制青枯病具有重要意 义。 [0003]好氧发酵能够较容易地实现有机废弃物处理与资源化转化， 发酵产物堆肥常对多 种植物病害具有抑制作用， 如真菌(枯萎病、 黄萎病、 腐霉病、 丝核病等)和细菌(青枯病， 斑 疹病， 叶枯病)病害。 堆肥中微生物具有防治植物病害的作用已有研究， 但尚无明确的结论。 其中一部分研究支持堆肥微生物是其抑制植物病害的关键因子， 例如， 堆肥中存在大量的 对植物病原物有拮抗作用的微生物， 如Pseudomonas， Bacillus， 灭菌处理后堆肥的抑病作 用会降低、 甚至完全消除； 而另一方面， 现代组学技术显示堆肥中的微生物组与土壤和根际 的微生物种群存在较大 的差异， 且堆肥施用后堆肥中的主要类群的丰度会迅速降低， 这些 结果表明堆肥中的主要类群不能在土壤中大量存活。 我们对全国堆肥微生物组的调研也显 示堆肥中的核心 微生物组主要参与有机废弃物的降解， 不包含参与植物病害的抑制的微生 物。 对我国6个省份38个堆肥厂采集的38种堆肥分析结果也显示： 堆肥在防治番茄青枯病作 用不稳定， 72.7％的具有抑制发病的作用， 而27.3％会促进发病。 这一结果表明不同堆肥抑 制青枯病的作用不稳定。 具有抑病功能的根际微生物如芽孢 杆菌属的多个种在保障植物健 康方面具有重要的作用， 多菌种复合或能进一步增加抗病微生物强化堆肥在不同生态情形 下的抑制番 茄青枯病的效果。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种抑制番茄青枯病的复合微生物菌剂及强化堆肥的制 备方法， 本发明复合微生物菌剂能够有效改善土壤和 根际微生物环境、 抑制番茄青枯病和 促进植物生长 。 [0005]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0006]本发明提供了一种抑制番茄青枯病的复合微生物菌剂， 包括复合微生物和载体， 所述复合微生物包括甲基营养型芽孢杆菌BOX10和蜡样 芽孢杆菌BOX11； 所述菌剂中各菌的 浓度分别为1.0 ×109～5.0×109CFU/g。说　明　书 1/6 页 3 CN 115011525 A 3