(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210894220.8 (22)申请日 2022.07.27 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.24933 2022.05.19 CGMCC No.24931 202 2.05.19 CGMCC No.24934 202 2.05.19 (71)申请人 中国农业科 学院植物保护研究所 地址 100193 北京市海淀区 圆明园西路2号 (72)发明人 戴小枫　陈捷胤　王丹　宋健　 张丹丹　李冉　孔志强　刘晓炜　 (74)专利代理 机构 北京英创嘉友知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11447 专利代理师 杨月 (51)Int.Cl. A01N 63/27(2020.01)A01N 63/22(2020.01) A01N 63/20(2020.01) A01P 3/00(2006.01) A01P 21/00(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/38(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种微生物菌剂及其应用 (57)摘要 本公开涉及一种微生物菌剂， 该微生物菌剂 含有菌粉和辅助剂； 所述菌粉包括产碱假单胞 菌、 贝莱斯芽孢杆菌和伯克霍尔德氏菌的菌粉； 所述辅助剂 包括分散剂、 润湿剂、 悬浮剂、 增效剂 和保护剂中的至少一种； 所述产碱假单胞菌的分 类 命 名为 产碱 假 单 胞 菌 Ps e ud o m o na s   alcaligenes， 保藏编号为CGMCC  No.24933； 所述 贝莱斯芽孢杆菌的分类命名为贝莱斯芽孢杆菌 Bacillus  velezensis， 保藏编号为CGMCC   No.24931； 伯克霍尔德氏菌的分类命名为唐菖蒲 伯克霍尔德氏菌Burkholderia  gladioli， 保藏 编号为CGMCC  No.24934。 该微生物 菌剂对环境友 好， 能够有效促进棉花生长， 降低棉花黄萎病的 发病率。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115191443 A 2022.10.18 CN 115191443 A 1.一种微生物菌剂， 其特征在于， 该微生物菌剂含有菌粉和辅助剂； 所述菌粉包括产碱 假单胞菌菌粉、 贝莱斯芽孢杆菌 菌粉和伯克霍尔德氏菌 菌粉中的至少一种； 所述辅助剂包括分散剂、 润湿剂、 悬浮剂、 增效剂和保护剂中的至少一种； 所述产碱假单胞菌的分类命名为产碱假单胞菌Pseudomonas  alcaligenes， 保藏编号 为CGMCC  No.24933； 所述贝莱斯芽孢杆菌的分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus   velezensis， 保藏编号为CGMCC  No.24931； 伯克霍尔德氏菌的分类命名为唐菖蒲伯克霍尔 德氏菌Burkho lderia gladioli， 保藏编号 为CGMCC No.24934。 2.根据权利要求1所述的微生物菌剂， 其中， 所述微生物菌剂中， 所述菌粉与所述辅助 剂的重量比为1： (0.25 ‑0.65)。 3.根据权利要求1所述的微生物菌剂， 其中， 所述分散剂包括木质素磺酸钠、 羧甲基纤 维素钠、 皂角粉中的至少一种； 所述润湿剂包括聚乙二醇、 十二 烷基磺酸钠、 吐温 ‑80中的至少一种； 所述悬浮剂包括朗钛 LT676、 朗钛EF96、 朗钛 LTQ661中的至少一种； 所述增效剂包括矿 源黄腐殖酸钾、 壳聚糖、 复合氨基酸粉中的至少一种； 所述保护剂包括 抗坏血酸VC、 腐殖酸、 环糊精中的至少一种。 4.根据权利要求1所述的微生物菌剂， 其中， 所述菌剂的剂型为可湿性粉剂、 水分散粒 剂和水剂中的任意 一种， 优选为可湿性粉剂。 5.根据权利要求1所述的微生物菌剂， 其中， 所述菌粉的制备方法包括： 将分离纯化后 的菌株接种至培养基中培养得到菌株发酵液， 再将硅藻土作为载体与所述菌株发酵液混 合， 烘干后粉碎， 得到所述菌粉。 6.根据权利 要求5所述的微生物菌剂， 其中， 所述培养基包括： LB固体培养基、 LB液体培 养基、 NA固体培 养基和NA液体培 养基； 所述LB固体培养基中包括4 ‑6g/L的酵母提取物、 9 ‑11g/L的胰蛋白胨、 9 ‑11g/L的NaCl、 15‑18g/L琼脂粉； 所述LB液体培养基中包括4 ‑6g/L的酵母提取物、 9 ‑11g/L的胰蛋白胨、 9 ‑11g/L的NaCl、 0.2‑0.4g/L的98重量％腐殖酸钾、 1.4 ‑1.6g/L的复合氨基酸粉和0.0 5‑0.15mL/L的消泡剂； 所述NA固体培养基中包括2 ‑4g/L的牛肉膏、 9 ‑11g/L的蛋白胨、 4 ‑6g/L的NaCl、 15 ‑18g/ L琼脂粉； 所述NA液体培养基中包括2 ‑4g/L的牛肉膏、 9 ‑11g/L的蛋白胨、 4 ‑6g/L的NaCl、 0.2 ‑ 0.4g/L的98重量％腐殖酸钾、 1.4 ‑1.6g/L的复合氨基酸粉和0.0 5‑0.15mL/L的消泡剂。 7.根据权利要求1所述的微生物菌剂， 所述复合微生物菌剂的活菌数为(0.6 ‑1.5)× 1010CFU/mL， 优选为(0.7 ‑1.5)×1010CFU/mL。 8.权利要求1 ‑7中任意一项所述 微生物菌剂在防治棉花黄 萎病中的应用。 9.权利要求1 ‑7中任意一项所述 微生物菌剂在促进棉花 生长中的应用。 10.权利要求1 ‑7中任意一项所述 微生物菌剂在防治大丽轮枝菌中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115191443 A 2一种微生物菌剂及其应用 技术领域 [0001]本申请属于微 生物技术领域， 具体地， 涉及一种微 生物菌剂及其应用。 背景技术 [0002]棉花是重要的经济作物， 在国民经济中占有重要的地位， 但在其生长过程中极易 受到高温、 干旱等非生物胁迫和来自于病 虫害的生物胁迫， 其中黄萎病 是棉花生产过程中 的头号病害， 是典型的土传性维管束病害， 棉花黄萎病病原大丽轮枝菌(Verticillium   dahliae)， 其形成的微菌核可以在土壤中存活数年， 难以防治。 目前棉花黄萎病研究主要防 治手段包括抗病品种的选育、 轮作倒 茬、 加强田间管理以及棉田种植前的药剂处理。 抗病品 种的选育是最为经济有效的方法， 但是实际推广过程中容易产生品种退化导致的抗病性丧 失、 其他病原菌发展为优势种群等困难； 物理措施如轮作倒 茬、 加强田间管理不能从根本上 起到防治黄萎病发生的目的； 长期使用化学农药会导致土壤有益微生物的减少、 病原菌抗 药性增加， 此外还 会对自然环境造成危害。 [0003]生物防治因其具有对环境无污染、 改善土壤有益微生物群落、 病原菌难以产生抗 药性等优点成为防治棉花黄萎病的一条极具发展前景 的措施， 因此， 发掘对棉花黄萎病的 病原大丽轮枝菌具有抑制作用的生防菌株、 研制具有实际生产应用价值的复合微生物菌剂 是防治棉花黄 萎病的有效途径。 发明内容 [0004]为了满足实际需要， 本公开提供了一种微生物菌剂， 该微生物菌剂能够有效促进 棉花生长， 降低棉花黄 萎病的发病率。 [0005]一方面， 本公开提供了一种微生物菌剂， 该微生物菌剂含有菌粉和辅助剂； 所述菌 粉包括产碱假单 胞菌菌粉、 贝莱斯芽孢杆菌 菌粉和伯克霍尔德氏菌 菌粉中的至少一种； [0006]所述辅助剂包括分散剂、 润湿剂、 悬浮剂、 增效剂和保护剂中的至少一种； [0007]所述产碱假单胞菌的分类命名为产碱假单胞菌Pseudomonas  alcaligenes， 保藏 编号为CGMCC  No.24933； 所述贝莱斯芽孢杆菌的分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus   velezensis， 保藏编号为CGMCC  No.24931； 伯克霍尔德氏菌的分类命名为唐菖蒲伯克霍尔 德氏菌Burkho lderia gladioli， 保藏编号 为CGMCC No.24934。 [0008]根据本公开， 其中， 所述微生物菌剂中， 所述菌粉与所述辅助剂的重量比为1： (0.25‑0.65)。 [0009]根据本公开， 其中， 所述分散剂包括木质素磺酸钠、 羧甲基纤维素钠、 皂角粉中的 至少一种； 所述润湿剂包括聚乙二醇、 十二烷基磺酸钠、 吐温 ‑80中的至少一种； 所述悬浮剂 包括朗钛LT676、 朗钛EF96、 朗钛LTQ661 中的至少一种； 所述增效剂 包括矿源黄腐殖酸钾、 壳 聚糖、 复合氨基酸粉中的至少一种； 所述保护剂包括抗坏血酸VC、 腐殖酸、 环糊精中的至少 一种。 [0010]根据本公开， 其中， 所述菌剂的剂型为可湿性粉剂、 水分散粒剂和水剂中的任意一说　明　书 1/7 页 3 CN 115191443 A 3