(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210673363.6 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 南京工业大 学 地址 211816 江苏省南京市浦口区浦珠南 路30号 (72)发明人 王瑞　王宇　徐虹　杨凯　雷鹏　 谷益安　孙良　陈乾　 (74)专利代理 机构 江苏圣典律师事务所 32 237 专利代理师 仲凌霞　肖明芳 (51)Int.Cl. C12N 11/14(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12N 1/04(2006.01) C12R 1/01(2006.01) C12R 1/38(2006.01) (54)发明名称 一种延长保质期的非芽孢微生物菌剂及其 制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种延长保质期的非芽孢微 生物菌剂及其制备方法， 所述非芽孢 微生物菌剂 包括非芽孢 微生物菌液和草炭土； 所述非芽孢微 生物菌液为骆驼刺泛菌、 施氏假单胞菌及其他非 芽孢菌中任意一种菌或多个菌的菌液。 本发明所 提供的粉末型 非芽孢微生物菌剂， 和一般商业化 液体型芽孢菌剂相比， 极大提高了非芽孢微生物 菌剂的常温保藏稳定性及长效性、 且绿色无污 染、 贮藏方便。 其中， 驼刺泛菌XK ‑11菌剂的保藏 效果最好， 保质期为180d， 有效提升了35倍； 其次 是施氏假单胞菌NRCB010菌剂， 保质期为360d， 有 效提升了11倍。 权利要求书1页 说明书7页 附图2页 CN 114934039 A 2022.08.23 CN 114934039 A 1.草炭土在延长非芽孢微 生物菌剂保质期中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非芽孢微生物菌剂包括非芽孢微生物 菌液和草炭土； 所述非芽孢微生物菌液为骆驼刺泛菌、 施氏假单胞菌及其他非芽孢菌中任 意一种菌或多个菌的菌液。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非芽孢微生物菌剂中， 非芽孢微生物 菌液和草炭土的质量含量分别为20％～5 0％和50％～80％。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非芽孢微生物菌剂的活菌数为70～ 100亿/g。 5.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 当所述非芽孢微生物菌液为骆驼刺泛菌的 菌液时， 在180天后， 所述非芽孢微 生物菌剂的活菌数为9.6亿/g以上。 6.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 当所述非芽孢微生物菌液为施氏假单胞菌 的菌液时， 在180天后， 所述非芽孢微 生物菌剂的活菌数为8.4亿/g以上。 7.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述非芽孢微生物菌剂的制备方法包括如 下步骤： S1： 将骆驼刺泛菌、 施氏假单胞菌及其他非芽孢菌中任意一种或多个菌分别进行好氧 培养， 得到非芽孢微 生物菌液； S2： 将步骤S1所得非芽孢微生物菌液与草炭土搅拌均匀， 得到未干燥的润湿非芽孢微 生物菌剂； S3： 将步骤S2所 得未干燥的润湿非芽孢微 生物菌剂干燥， 即得非芽孢微 生物菌剂。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 步骤S1中， 所述非芽孢微生物菌液和草炭 土的质量比为(0.5～3):1。 9.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 步骤S1中， 所述非芽孢微生物菌液和草炭 土的质量比为2:1、 3:2、 4:3 。 10.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 步骤S1中， 所述非芽孢微生物菌液中活菌 数为20～40亿/mL。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114934039 A 2一种延长保质期的非芽孢微生物菌剂及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 微生物菌剂领域， 具体涉及一种延长保质期的非芽孢微生物菌剂及其 制备方法。 背景技术 [0002]我国现已进入生态农业新时代， 农业施肥技术越来越趋于绿色生态理念， 而过量 施用常见 的化学肥料对维持生态平衡和保护环境十分不利。 微生物菌剂具有长效无毒、 无 污染、 节约能源、 成本低等特点， 按照菌剂的外观形态可分为液体菌剂和固体菌剂， 液体菌 剂具有生产效率高、 培养周期短等优点， 但也存在运输不方便、 保藏时间短等缺点； 相比液 体菌剂， 固体菌剂具有储藏运输方便、 微生物活性高、 保藏周期长等优点。 目前商业化的微 生物菌剂多为液体型芽孢菌类， 非芽孢类的革兰氏阴性菌菌剂的制备与保藏仍存在许多障 碍， 主要在于菌剂的存活率低、 保藏稳定性差， 因此探索合适、 低 成本的菌剂制备方法很有 现实意义。 [0003]目前非芽孢菌剂尚无非常成熟的保活方法， 喷雾干燥技术一定程度上可以延长菌 剂货架期， 但干燥过程高温条件对细胞的存活率影响较大。 因此， 本发 明提供了一种用于常 温保藏的粉末型非芽孢微 生物菌剂及其制备 方法。 发明内容 [0004]发明目的： 本发明所要解决的技术问题是针对商业化液体型芽孢菌剂的保藏稳定 性不足的问题， 提供草炭土在延长非芽孢微生物菌剂保质期 中的应用， 以解决液体型芽孢 菌剂的存活率低、 保藏稳定性差 两大关键难题。 [0005]本发明还要解决的技 术问题是提供 上述非芽孢微 生物菌剂的制备 方法。 [0006]发明思路： 最大限度的减少菌剂干粉的水分含量的同时减少细胞死亡是解决该问 题的核心 突破口， 廉价生物质载体具有促进细胞黏附、 增殖和营养供应的作用， 在非芽孢菌 剂产品开发方面具有很好的应用前景。 草炭土是沼泽 发育过程中的产 物， 是一种纯天然、 无 公害、 无污染的绿色物质， 用途非常广泛。 草炭土有机质含量高、 生物降解性好、 含有 大量腐 殖质以及一部分矿物质， 作为一种 可循环再生的生物质材料， 为微生物菌剂的吸 附及保藏 提供了良好载体。 草炭土质地松软， 生产出的肥料具有疏松的外观， 在生产、 贮藏及使用过 程中方便快捷； 草炭土内含有的腐殖酸有吸附作用， 能够增加土壤的团粒结构， 可在水川 和 旱田地使用改良土壤， 肥料强度得到明显提高， 同时成本低廉， 极大提高了微生物菌剂的利 用率及长效性。 [0007]为了解决上述第一个技术问题， 本发明公开了草炭土在延长非芽孢微生物菌剂保 质期中的应用。 [0008]其中， 所述非芽孢微生物菌剂包括非芽孢微生物菌液和草炭土； 所述非芽孢微生 物菌液为 骆驼刺泛菌、 施氏假单 胞菌及其 他非芽孢菌中任意 一种菌或多个菌的菌液。 [0009]在一些实施例中， 所述骆驼刺泛菌、 施氏假单胞菌分别为骆驼刺泛菌XK ‑11、 施氏说　明　书 1/7 页 3 CN 114934039 A 3