(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210874531.8 (22)申请日 2022.07.25 (83)生物保 藏信息 GDMCC No： 60687 2019.0 6.13 GDMCC No： 61615 2021.04.23 (71)申请人 广西民族大 学 地址 530006 广西壮 族自治区南宁市大 学 东路188号 (72)发明人 张红岩　申乃坤　姜明国　谢晨杰　 王一兵　李吉玲　 (74)专利代理 机构 北京睿智保诚专利代理事务 所(普通合伙) 11732 专利代理师 刘晓静 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01)C12P 13/04(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/385(2006.01) (54)发明名称 一种家禽羽毛降解复合菌剂及其制备方法 和应用 (57)摘要 本发明属于微生物应用领域， 具体涉及一种 家禽羽毛降解复合菌剂及其制备方法和应用。 所 述 复 合 菌 剂 由 拟 蕈 状 芽 孢 杆 菌 (Bacillusparamycoides)Gxun ‑30和铜绿假单胞 菌(Pseudomonasaeruginosa)GXun ‑2混合配置制 成， 所述拟蕈状芽孢杆菌， 保藏编号为GDMCCNo： 60687； 所述铜绿假单胞菌保藏编号为GDMCCNo： 61615。 本发明提供的家禽羽毛降解复合菌剂用 于家禽羽毛降解具有降解速度快、 羽毛降解彻 底、 羽毛降解产物氨基酸含量丰富等优势， 可显 著缩短羽毛周期， 提升羽毛降解效果， 有助于缓 解家禽羽毛废弃物对环境污染， 实现废弃蛋白资 源的再利用。 权利要求书1页 说明书8页 附图3页 CN 115141777 A 2022.10.04 CN 115141777 A 1.一 种 家 禽 羽 毛 降 解 复 合 菌 剂 ，其 特 征 在 于 ，包 括 拟 蕈 状 芽 孢 杆 菌 (Bacillusparamycoides)Gxun ‑30和铜绿假单胞菌(Pseudomonas  aeruginosa)GXun ‑2， 所 述拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏编号为GDMCC  No： 60687； 所述铜绿假单胞菌GXun ‑2保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏编号为GDMCC   No： 61615； 所述复合菌剂中， 拟 蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑2的活菌数之比 为1： 3～3： 1。 2.根据权利要求1所述的家禽羽毛降解复合菌剂， 其特征在于， 所述复合菌剂中， 拟蕈 状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单 胞菌GXun ‑2的活菌数之比为1:1.5～ 2:1。 3.根据权利要求1或2所述的家禽羽毛降解复合菌剂， 其特征在于， 所述复合菌剂为液 体复合菌剂， 所述液体复合菌剂中拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑2的活菌 量之和不低于4亿CFU/ mL； 所述复合菌剂为固体复合菌剂， 所述固体复合菌剂中包含的拟 蕈 状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单 胞菌GXun ‑2的活菌量之和不低于10亿CFU/g。 4.权利要求1所述复合菌剂的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单 胞菌GXun ‑2分别经过LB固体斜 面活化成原种； (2)将活化后的拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和活化后的铜绿假单胞菌GXun ‑2分别接种发 酵培养培养， 获得拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单 胞菌GXun ‑2发酵液； (3)将步骤(2)培养的拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑2的发酵液混合， 即得复合菌剂。 5.根据权利要求4所述复合菌剂的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 具体的发酵培养 步骤为： 将活化的菌株 分别接种到LB液体培养基中培养， 培养温度为30～35℃， 培养至菌液 浓度为4～15亿cel l/mL， 得两种菌株的发酵 液。 6.根据权利要求4所述家禽羽毛降解复合菌剂的制备方法， 其特征在于， 当所述家禽羽 毛降解复合菌剂为固体复合菌剂时， 所在述拟 蕈状芽孢杆菌 Gxun‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑ 2混合前还 包括制备拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30菌粉和铜绿假单 胞菌GXun ‑2菌粉的步骤； 所述制备拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30菌粉包括从发酵培养后的拟蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30 中收集菌体、 烘干和粉碎的步骤； 所述制备铜绿假单胞菌GXun ‑2菌粉的步骤包括从发酵培养后的铜绿假单胞菌GXun ‑2 中收集菌体、 冻干和粉碎的步骤。 7.根据权利要求6所述家禽羽毛降解复合菌剂的制备方法， 所述烘干温度为50～70℃； 所述冻干为 ‑80℃预冻2h， 冻干4h； 所述粉碎粒径为10 0～300目。 8.权利要求1～3任意一项所述家禽羽毛降解复合菌剂在羽毛降解中的应用， 其特征在 于， 将所述家禽羽毛降解复合菌剂接种至羽毛发酵培 养基中进行发酵。 9.根据权利要求8所述家禽羽毛降解复合菌剂在羽毛降解中的应用， 其特征在于， 每升 羽毛发酵培养 基包含： 羽毛30～50g， K2HPO41～2g， KH2PO40.5～1.2g， NaCl  3～8g， MgSO40.02 ～0.3g， pH＝6～8； 每升羽毛发酵培养基接种4～20ml所述液体复合菌剂或接种2～8g固体 复合菌剂。 10.根据权利要求8所述家禽羽毛降解复合菌剂在羽毛降解中的应用， 所述发酵的温度 为33～38℃， 所述发酵的转速为16 0～230转/分， 所述发酵的时间为 40～55h。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115141777 A 2一种家禽羽毛降解复合菌剂及其制备方 法和应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物应用领域， 尤其涉及一种家禽羽毛降解复合菌剂及 其制备方法 和应用。 背景技术 [0002]家禽产业作为我国畜牧业领域中增长较快的领域， 年增速可达8～10％。 随之， 每 年产生的羽毛量也超过了数百万吨， 家禽屠宰产生的羽毛除少量被服装、 体育等行业利用 外， 大部分被丢弃或填埋， 不但会引发健康问题， 加剧环境污染， 而且会造成蛋白质资源的 浪费。 羽毛蛋白含量丰富， 其中以角蛋白为主， 占羽毛总蛋白的90％。 但角蛋白是一类富含 二硫键、 氢键和疏水作用力的不溶或微溶于水的硬性蛋白， 很难被常见的蛋白酶水解。 羽毛 传统处理方法是采用高温、 强酸 强碱等进 行降解， 存在耗能高、 污染大、 氨基酸破环严重、 释 放有毒气体等问题。 利用微生物对羽毛进行降解， 具有成本低， 处理条件温和、 且不会破坏 氨基酸等优点， 是一种环境友好型的废弃物资源利用方式。 [0003]目前已报道大量可降解羽毛菌株， 包括真菌、 放线菌和细菌等。 但真菌多为皮肤致 病菌， 不宜投入实际生产使用； 而放线菌的培养周期过长， 也不适宜应用。 可降解细菌具有 生长速度快、 降解效果好等优点， 成为目前羽毛降解菌的研究热点之一。 但目前微生物降解 羽毛仍存在降解周期长(大于3天)、 酶活低(小于1000U/mL)且不稳定等系 列问题， 导致目前 废弃羽毛工业 化生产受到影响。 发明内容 [0004]为了克服现有微生物降解羽毛技术中的缺陷， 针对现有单个菌株降解效果差、 不 稳定的不足， 本发明提供一种家禽羽毛降解复合菌剂及其制备方法和应用， 该复合菌剂用 于家禽羽毛具有降解速度、 降解效果好、 羽毛降解液氨基酸含量丰富等优点， 可显著缩短羽 毛降解周期， 提升羽毛降解效果。 [0005]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0006]本发明提供了一种家禽羽毛降解复合菌剂， 包括拟蕈状芽孢杆菌(Bacillus   paramycoides)Gxun ‑30和铜绿假单胞菌(Pseudo monas aerugino sa)GXun‑2， 所述拟蕈状芽 孢杆菌Gxun ‑30保藏于广东省微生物菌种保藏中心， 保藏编号为GDMCC  No： 60687； 所述铜绿 假单胞菌GXun ‑2保藏于广东省微 生物菌种保藏中心， 保藏编号 为GDMCC No： 61615。 [0007]优选的， 所述复合菌剂中， 拟蕈状芽孢 杆菌Gxun ‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑2的活菌 数之比为1： 3～3： 1； 进一步优选的， 拟 蕈状芽孢杆菌Gxun ‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑2的活菌 数之比为1： 1.5～ 2： 1。 [0008]优选的， 所述复合菌剂为液体复合菌剂， 所述液体复合菌剂中拟蕈状芽孢杆菌 Gxun‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑2的活菌量之和不低于4亿CFU/mL。 优选的， 所述复合菌剂为 固体复合菌剂， 所述固体复合菌剂中包含的拟 蕈状芽孢杆菌 Gxun‑30和铜绿假单胞菌GXun ‑ 2的活菌量之和不低于10亿CFU/g。说　明　书 1/8 页 3 CN 115141777 A 3