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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211042325.7 (22)申请日 2022.08.29 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 23231 2021.09.15 (71)申请人 山西农业大 学高粱研究所 地址 030600 山西省晋中市榆次区蕴华 街 238号 (72)发明人 郝佳丽 张建华 白文斌 曹昌林 贾峥嵘 (74)专利代理 机构 西安铭泽知识产权代理事务 所(普通合伙) 61223 专利代理师 崔瑞迎 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/14(2006.01)B09C 1/10(2006.01) A01B 79/00(2006.01) A62D 3/02(2007.01) A01N 63/22(2020.01) A01N 63/30(2020.01) A01N 63/34(2020.01) A01P 21/00(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/66(2006.01) C12R 1/685(2006.01) A62D 101/04(2007.01) (54)发明名称 一种复合菌剂及其在降解土壤中烟嘧磺隆 的应用 (57)摘要 本发明属于微生物 技术领域, 具体涉及一种 复合菌剂及其在降解土壤中烟嘧磺隆的应用。 所 述复合菌剂活性成分为保藏编号为CGMCC No.23231的土曲霉(Aspergillus terreus)、 保 藏 编 号 为 C G M C C N o .8 4 3 8 的 黑 曲 霉 (Aspergillusniger)和保藏编号为CGMCC No.8437的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。 该复合菌剂的菌种之间协同性好, 具有高效的降 解烟嘧磺隆的能力, 增强了对环境的适应性。 权利要求书1页 说明书5页 CN 115353997 A 2022.11.18 CN 115353997 A 1.一种用于降解烟嘧磺隆的复合菌剂, 其特征在于, 其活性成分为保藏编号为CGMCC No.23231的土曲霉(Aspergillus terreus)、 保藏编号为CGMCC No.8438的黑曲霉 (Aspergillus niger)和保藏编号为CGMCC No.8437的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。 2.根据权利要求1所述的复合菌剂, 其特征在于, 所述复合菌剂由所述土曲霉、 黑曲霉 和枯草芽孢杆菌的菌液复配而成, 所述复合菌剂的菌浓度为1 ×107‑1×109CFU/ml, 其中所 述土曲霉、 黑曲霉和枯 草芽孢杆菌的活菌数量之比为2 ‑3:3‑4:1‑2。 3.权利要求2所述复合菌剂的制备 方法, 其特 征在于, 包括如下步骤: a1、 将所述枯草芽孢杆菌接种于LB培养基中, 于25℃ ‑30℃、 125r/min ‑150r/min条件下 发酵培养1 ‑2天, 将黑曲霉和土曲霉分别接种于PDA培养基中, 于28 ‑32℃、 150 ‑160r/min培 养2‑4天; a2、 培养结束后, 按照比例将三种菌液混合, 然后用蒸馏水调节浓度。 4.权利要求1所述的复合菌剂在降解土壤中烟嘧磺隆的应用。 5.权利要求1所述的复合菌剂在促进作物生长中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用, 其特 征在于, 所述作物生长 于烟嘧磺隆残留的土壤。 7.根据权利要求5所述的应用, 其特征在于, 土壤中烟嘧磺隆的含量在0.025 ‑0.1mg/ kg。 8.根据权利要求5所述的应用, 其特 征在于, 所述作物为高粱。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115353997 A 2一种复合菌剂及其在降解土壤中烟嘧磺隆的应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域, 具体涉及一种复合菌剂及 其在降解土壤中烟嘧磺隆 的应用。 背景技术 [0002]烟嘧磺隆是日本石原产业株式会社发现的, 20世纪80年代末与美国杜邦公司联合 开发的磺酰脲类内吸性除草剂。 可以防 除一年生和多年 生禾本科杂草、 部分阔叶杂草。 [0003]烟嘧磺隆主要用于玉米田间杂草 防治, 是目前使用量最大的化学除草剂。 烟嘧磺 隆在土壤中较易移动, 很容易对土壤及地下水造成污染, 可以造成后 茬敏感植物药害, 影响 生态环境及人体健康, 因此去除烟嘧磺隆在土壤和水体中的残留具有重要意 义。 [0004]目前有关微生物降解烟嘧磺隆的研究已受到广泛关注, 研究人员已经筛选到多种 可以降解烟嘧磺隆的微生物。 但目前经筛选得到的单一菌种在降解烟嘧磺隆方面有很多局 限性, 包括单一菌种环境适应性较差, 对农药降解不彻底等。 驯化筛选可降解烟嘧磺隆的菌 系, 是生物降解烟嘧磺隆的可 行方向。 [0005]在降解污染物时, 不 同微生物之间可存在协同作用, 因此混合菌的降解效果往往 比单一菌要好, 降解时间更短。 开 发一种配伍合理, 高效降解烟嘧磺隆的复合菌剂是我们需 要解决的技 术问题。 发明内容 [0006]为解决上述技术问题, 本发明提供了一种复合菌剂及其在降解土壤中烟嘧磺隆的 应用。 [0007]本发明的第一个方面, 提供一种用于降解烟嘧磺隆的复合菌剂, 其活性成分为保 藏编号为CGMCC No.23231的土曲霉(Aspergillus terreus)、 保藏编号为CGMCC No.8438的 黑曲霉(Aspergillus niger)和保藏编号为CGMCC No.8437的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。 [0008]进一步的, 所述复合菌剂由所述土曲霉、 黑曲霉和枯草芽孢杆菌的菌液复配而成, 所述复合菌剂的菌浓度为1 ×107‑1×109CFU/ml, 其中所述土曲霉、 黑曲霉和枯草芽孢杆菌 的活菌数量之比为2 ‑3:3‑4:1‑2。 [0009]本发明的第二个方面, 提供 所述复合菌剂的制备 方法, 包括如下步骤: [0010]a1、 将所述枯草芽孢杆菌接种于LB培养基中, 于25℃ ‑30℃、 125r/min ‑150r/min条 件下发酵培养1 ‑2天, 将黑曲霉和土曲霉分别接种于PDA培养基中, 于28 ‑32℃、 150 ‑160r/ min培养2‑4天; [0011]a2、 培养结束后, 按照比例将三种菌液混合, 然后用蒸馏水调节浓度。 [0012]本发明的第三个方面, 提供 所述的复合菌剂在降解土壤中烟嘧磺隆的应用。 [0013]本发明的第四个方面, 提供 所述的复合菌剂在促进作物生长中的应用。 [0014]进一步的, 所述作物生长 于烟嘧磺隆残留的土壤。说 明 书 1/5 页 3 CN 115353997 A 3
专利 一种复合菌剂及其在降解土壤中烟嘧磺隆的应用
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