(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210827483.7 (22)申请日 2022.07.13 (71)申请人 西安工程大 学 地址 710000 陕西省西安市金花 南路19号 (72)发明人 武占省　陶治东　刘啸尘　孙琳琳　 朱双喜　张子言　贺旭旭　 (74)专利代理 机构 北京盛凡佳华专利代理事务 所(普通合伙) 11947 专利代理师 汤镇宇 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C05F 15/00(2006.01) C05F 17/20(2020.01) C12R 1/125(2006.01)C12R 1/40(2006.01) C12R 1/885(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种复合菌剂及其在提高香菇菌渣堆肥产 品质量的应用 (57)摘要 本发明提供了一种复合菌剂及其在提高香 菇菌渣堆肥产品质量的应用， 复合菌剂的活性成 分由枯草芽孢杆菌DPPG ‑26、 恶臭假单胞菌SRPG ‑ 396、 里氏木霉DGW1和氧化微杆菌YD4组成。 本发 明的复合菌剂中的枯草芽孢杆菌DPPG ‑26和恶臭 假单胞菌SRPG ‑396均具有较强的溶磷能力， 且 枯 草芽孢杆菌DPPG ‑26其适宜生长温度较广， 可在 10‑60℃保持较高活性； 所述复合菌剂中的里氏 木霉DGW1和氧化微杆菌YD4具有较强的纤维素降 解能力， 且里氏木霉DGW1具有较强的对抗外界有 害因子的能力， 能够在较宽的pH(4.0 ‑8.0)环境 中具有较强的产酶能力。 复合菌剂的应用实现了 香菇菌渣堆肥快速进入高温期， 提高了堆肥温度 和腐熟程度， 堆肥产品总磷含量、 有效磷含量和 腐殖质显著增加， 种子 萌发指数大于215％， 有效 提升了堆肥产品质量。 权利要求书1页 说明书8页 附图7页 CN 115109727 A 2022.09.27 CN 115109727 A 1.一种复合菌剂， 包括， 其特征在于， 所述复合菌剂的活性成分由枯草芽孢杆菌DPPG ‑ 26、 恶臭假单 胞菌SRPG ‑396、 里氏木霉DGW1和氧化 微杆菌YD4组成。 所述复合菌剂由浓度不低于109个/ml的里氏木霉DGW1菌液与浓度不低于109CFU/ml的 枯草芽孢杆菌DPPG ‑26、 恶臭假单胞菌SRPG ‑396和氧化微杆菌YD4等体积比混合而成； 其中 各菌液的浓度相同； 其中： 复合菌剂由以下方法制 备得到： 将所述的枯草芽孢杆菌DPPG ‑26、 恶臭假单胞菌SRPG ‑ 396、 氧化微杆菌YD4分别接种到LB培养基中， 在30℃、 170rpm下培养48 ‑50h； 将菌株里氏木 霉DGW1接种到PDA培养基中， 在30℃下培养72 ‑75h， 用蒸馏水反复冲洗培养基， 获得孢子悬 液； 用蒸馏水调节浓度， 使细菌浓度在109CFU/ml以上， 真菌孢子在109个/ml以上； 然后将四 种发酵液按照体积比例0.8 ‑1.2： 0.8‑1.2： 0.8‑1.2： 0.8‑1.2混匀， 得到复合菌剂。 2.根据权利要求1所述的一种复合菌剂， 其特征在于， 所述枯草芽孢杆菌DPPG ‑26的保 藏号为CGMCCNo.9393； 所述恶臭假单 胞菌SRPG ‑396的菌种保藏 号为CGMCCNo.9397。 3.根据权利要求1所述的一种复合菌剂， 其特征在于， 所述里氏木霉DGW1和氧化微杆菌 YD4从废弃香菇菌渣筛 选得到， 具有高效 纤维素降解能力。 4.一种复合菌剂在提高香菇菌渣堆肥产品质量的应用， 所述复合菌剂应用在香菇菌渣 堆肥原料， 其中， 堆肥原料还 包括鸡粪、 羊粪的一种或多种。 5.一种复合菌剂用于处 理香菇菌渣的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： S1： 将香菇菌渣碾碎至2 ‑3cm， 然后将碾碎后的香菇菌渣与鸡粪或羊粪充分混合形成C/ N比为1.8 ‑2.0的均匀混合物， 香菇菌渣与鸡粪或羊粪质量比为2:1.0 ‑2： 1.2， 调节混合物中 的含水率达 到50‑60％； S2： 在混合物中添加复合菌剂， 所述的复合菌剂的添加量为发酵原料质量的1.5 ‑2％， 物料充分 混匀后进行发酵； S3： 采用底部曝气， 堆肥期间前两周每周人工翻堆两次， 之后 每周翻动一次， 共发酵25 ‑ 30天， 得到高质量 堆肥产品。 6.根据权利要求5所述的一种复合菌剂用于处理香菇菌渣的方法， 其特征在于， 复合菌 剂的应用实现了香菇菌渣堆肥快速进入高温期， 提高了堆肥温度和腐熟程度， 堆肥产品总 磷含量、 有效磷含量和腐殖质显著增加， 种子萌发指数大于215％， 有效提升了堆肥产品质 量。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115109727 A 2一种复合菌剂及其在提高香菇菌渣堆肥产品质量的应用 技术领域 [0001]本发明属于环境微生物技术领域， 涉及一种复合菌剂及 其在提高香菇菌渣堆肥产 品质量的应用。 背景技术 [0002]目前全国每年种植香菇产生的废弃菌渣多达400万吨， 香菇菌渣若没有得到合理 安全的处置， 如焚烧、 填埋、 露天焚烧和在土地上随意堆积等， 将导致严重的环 境问题。 然而 香菇菌渣包含大量营养物质， 包括多糖、 氨基酸、 碳氢化合物和微量元素等， 完全可以资源 化利用。 目前已有报到利用菌渣开发为有用产品， 比如有机肥料、 绿色吸附剂、 动物饲料和 生物炭等。 然而从经济效应和技术可行性考虑， 大多菌渣主要用作生产有机肥料， 仅有一小 部分用于生产其 他产品。 [0003]利用菌渣开发生物有机肥实现资源化利用是经济可持续发展的趋势， 但菌渣转化 为生物有机肥， 往往存在腐殖化程度低、 营养含量低等问题。 堆肥期间营养物质常被生物稳 定化， 堆肥中的有效磷常常被转化为中等稳定磷， 导致堆肥产品有效磷含量大幅缩减。 除此 之外， 香菇菌渣含有 大量木质纤维素， 是制约菌渣资源化利用的重要因素之一。 目前添加纤 维素降解菌的生物处理方法是绿色、 经济、 有效的， 得到普遍应用。 但由于废弃菌渣碳氮营 养比例失衡、 含有大量纤维素， 直接添加一般纤维素降解菌难以降解 香菇菌渣。 [0004]然而目前市售的复合菌剂， 多数用于秸秆等木质纤维素含量较低的农业废弃物， 对于香菇菌渣的降解效果并不显著。 除此之外， 在提高堆肥产品营养含量的作用大打折扣， 限制了植物对堆肥中营养元素的利用效率。 所以针对香菇菌渣难降解和其堆肥产品营养含 量低等特点， 开发高效 纤维素降解复合菌剂尤为重要。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种复合菌剂及其在提高香菇菌渣堆肥产品质量的应用， 以解决上述背景技 术中提出的问题。 [0006]本发明的目的可通过 下列技术方案来实现： [0007]一种复合菌剂， 其包括保藏号为CGMCC  No.9393枯草芽孢杆菌DPPG ‑26(Bacillus   subtilis)、 保藏号为CGMCC  No.9397恶臭假单胞菌SRP G‑396(Pseudomon as putida)、 里氏 木霉DGW1(Tric hodermare esei)和氧化 微杆菌YD4(Microbacterium  oxydans)。 [0008]菌株DPPG ‑26具有较强溶磷性能,对无机磷的溶解量为60.58mg/L， 此外， 菌株 DPPG‑26具有产嗜铁素、 固氮和分泌IAA的能力； 菌株SRPG ‑396也同样具有较强的溶磷性能， 对无机磷的溶解量为82.41mg/L， 并且具有较强的耐盐能力； 菌株DGW1和菌株YD4具有较高 的纤维素降解能力， 其纤维素酶活分别为112.71U/g和9.74U/g； ITS构建序列的发育树比对 结果表明， 菌株DGW 1和木霉属同源性最高， 结合ITS构建序列的发育树比对分析结果和形态 学观察， 菌株DGW1鉴定为里氏木霉； 根据16S  rDNA构建序列的发育树比对结果表明， 菌株 YD4和微杆菌属同源性最高， 结合16S  rDNA构建序列的发育树比对分析结果和生理生化形说　明　书 1/8 页 3 CN 115109727 A 3